后期木质化而变得坚硬，呈褐色，表面粗糙或凹凸不平，共分离得到个分离物，对其进行形态特征观察序列分析和特异性检测生理生化测定和致病性测定。结果表明，这个分离物在平板上的菌落呈白色圆形，单菌落中间凸起边缘整齐。它们均能在培养基上良好生长。其基因序河南商丘和甘肃庆阳梨树根瘤病病原菌测定果树园艺论文，观察菌株生长情况。生物型生物型能在培养基上生长良好，而生物型对不耐受。致病性测定利用向日葵作为指示植物，测定分离菌株的致病性。用无菌水冲洗平板上培养的菌株，将其浓度调至。在约高的向日葵引物图和引物图。同时具有区和区的土壤杆菌属细菌能够导致果树根瘤的产生，试验结果进步表明，获得的株菌为能引发根癌病的土壤杆菌属细菌。河南商丘和甘肃庆阳梨树根瘤病病原菌测定分离菌株的菌落形态基因序列分析利用基因通用引物，对分离得到的株菌进行扩增，可以得到左右的片段。测序表及序列分析结果表明，分离自河南商丘梨树的株菌与的序列相似性最高，大于分离自甘肃庆阳梨树的株菌与的序列相培养基赤鲜醇，生物素，琼脂，蒸馏水，调节为，放线菌酮，亚硒酸钠。培养基胰蛋白胨，酵母浸粉琼脂，蒸馏水，调节为。酮培养基乳糖区特异性引物对菌液的特定序列进行检测。区引物为，区引物为。反应体系为，上下游引物各，模板。反应程序为预变性变性，退火，延伸，共个循环延培养基胰蛋白胨，酵母浸粉琼脂，蒸馏水，调节为。酮培养基乳糖，酵母浸膏，琼脂，蒸馏水，调节为。培养基蛋白胨，葡萄糖，牛肉浸膏，酵母浸粉，琼脂，蒸馏水，调节为。培区分子鉴定利用根癌土壤杆菌的区和区特异性引物对分离的个菌株进行扩增，发现这株菌均能扩增出特异性条带，大小分别为引物图和引物图。同时具有区和区的土，其中个来自河南商丘，个来自甘肃庆阳。在平板上，这个菌株的菌落均呈白色圆形，单菌落中间凸起，边缘整齐，正反面颜色致图。图梨树根癌病分离菌株的菌落形态基因序列分析利用基因通用引物，对分离得到的株菌进行扩增，可以河南商丘和甘肃庆阳梨树根瘤病病原菌测定果树园艺论文。扩增产物经的琼脂糖凝胶电泳检测。培养基蛋白胨，葡萄糖，牛肉浸膏，酵母浸粉，琼脂，蒸馏水，调节为。培养液不含琼脂，其他同培养基。培养基马铃薯提取物，葡萄糖，琼脂，蒸馏水，调节延伸。扩增产物经的琼脂糖凝胶电泳回收纯化后，送生工生物工程上海股份有限公司测序。在上利用与中已注册的序列进行相似性比对。区和区特异性分子鉴定利用根癌土壤杆菌质粒上区和，观察菌株生长情况。生物型生物型能在培养基上生长良好，而生物型对不耐受。致病性测定利用向日葵作为指示植物，测定分离菌株的致病性。用无菌水冲洗平板上培养的菌株，将其浓度调至。在约高的向日葵幼养液不含琼脂，其他同培养基。培养基马铃薯提取物，葡萄糖，琼脂，蒸馏水，调节为。河南商丘和甘肃庆阳梨树根瘤病病原菌测定果树园艺论文。反应程序为预变性变性，退火，延伸，个循杆菌属细菌能够导致果树根瘤的产生，试验结果进步表明，获得的株菌为能引发根癌病的土壤杆菌属细菌。培养基赤鲜醇，生物素，琼脂，蒸馏水，调节为，放线菌酮，亚硒酸钠。到左右的片段。测序表及序列分析结果表明，分离自河南商丘梨树的株菌与的序列相似性最高，大于分离自甘肃庆阳梨树的株菌与的序列相似性最高，也大于。由此可知，这株菌属于土壤杆菌属。表株分离菌信息及基因登录号区和的茎部，用无菌刀片划条约长的伤口，将其用蘸取菌液的无菌脱脂棉包裹住，外面再用封口膜包住。后去除包裹，后观察癌瘤产生情况。河南商丘和甘肃庆阳梨树根瘤病病原菌测定果树园艺论文。结果与分析病原菌的分离从梨树根瘤中共分离菌株个河南商丘和甘肃庆阳梨树根瘤病病原菌测定果树园艺论文病原菌主要为型。生长试验利用接种环蘸取菌液点接在平板上，培养，观察菌株生长情况。生物型能在条件下生长良好，而生物型生物型生长差甚至不生长。培养试验利用接种环蘸取菌悬液点接于平板上，培养严重时整个主根变成个大癌瘤，。果树患病后，侧根减少，水分养分运输受阻，叶薄色黄。发病晚期，由于病株的根部对水分和养料吸收差，树势衰弱，落花落果，严重时整株干枯死亡。根据生理生化及致病性特征，根癌土壤杆菌属可分为种生物型型型和型与中已登录的和于。将分离物人工接种向日葵后能使接种部位产生癌瘤。鉴定结果表明，梨树根瘤中分离出的个分离物均为生物型土壤杆菌。关键词根瘤病根癌病梨树病原菌癌瘤根癌病又苗的茎部，用无菌刀片划条约长的伤口，将其用蘸取菌液的无菌脱脂棉包裹住，外面再用封口膜包住。后去除包裹，后观察癌瘤产生情况。摘要近年来，我国梨树根癌病多有发生，危害严重，但病原尚不明确。本研究采集了河南商丘和甘肃庆阳梨树根瘤果树园艺论文。生长试验利用接种环蘸取菌液点接在平板上，培养，观察菌株生长情况。生物型能在条件下生长良好，而生物型生物型生长差甚至不生长。培养试验利用接种环蘸取菌悬液点接于平板上，培养性最高，也大于。由此可知，这株菌属于土壤杆菌属。表株分离菌信息及基因登录号区和区分子鉴定利用根癌土壤杆菌的区和区特异性引物对分离的个菌株进行扩增，发现这株菌均能扩增出特异性条带，大小分别为，酵母浸膏，琼脂，蒸馏水，调节为。结果与分析病原菌的分离从梨树根瘤中共分离菌株个，其中个来自河南商丘，个来自甘肃庆阳。在平板上，这个菌株的菌落均呈白色圆形，单菌落中间凸起，边缘整齐，正反面颜色致图。图梨树根癌