1、学性状产生明显的影响。利用双向电泳技术对其进行分析后发现，不同细胞质环境对金针菇细胞核的基因表达可能起到重要的调控作用。这研究将为不同颜色金针菇品种间生物学特性差异分子调控机理的揭示提供参考，同时也为金针菇乃至其他食用菌的品种选育种性改良方面等提供新的思路。参考文献刘靖宇，刘新锐，邓优锦，等双向核迁移在香菇遗传和育种中的应激酶来调控细胞的生长。有研究表明在白腐真菌中，蛋白可能参与真菌菌丝的蛋白质分泌过程，进而对其生长生理发挥相应的调控作用，。在不同细胞质环境下蛋白表达量增加，表明该蛋白可能参与细胞质环境对菌丝生长的功能调控，但具体参与过程还需进步的研究。热激蛋白般作为分子伴侣参与生理活动，在信号转导蛋白质折叠与降解和应激反应调节方面起到重要。

2、型的酵母杂交种对环境的适应性存在明显的差异。年，等根据研究结果推测双孢蘑菇菌丝的生长与细胞质环境中的线粒体基因有密切关系。等依据香菇双核体子代中的条件离心，去上清，将沉淀臵于超净台内吹干。加适量蛋白质溶解液尿素硫脲载体两性电解质溴酚蓝充分溶解，在条件下离心，备用。蛋白质浓度的测定以牛血清白蛋白为标准蛋白制作标准曲线，按照蛋白浓度测定试剂盒的方法测定蛋白质含量。蛋白质组双向电泳图谱分析按照蛋白质双向电泳实验操作手册进行，对部分实验参数进行优化，设臵生物学重复次。选用规格为的预制胶条，上样量为，上样总体积为，进行第向等电聚焦电泳，之后，将聚焦结束的胶条立即进行平衡，并进行第向电泳。将完成双向电泳的凝胶在固定液无水乙醇冰乙酸超纯水中固定，采用考浅。

3、术对金针菇异质双核菌株菌丝的蛋白质组进行分析。结果表明异质双核菌株和菌丝均具有锁状联合结构，在菌落形态上呈现明显差异，但分子标记的扩增产物具有很高的相似性。在菌丝样品中共鉴定出个差异蛋白，包括个上调蛋白个下调蛋白其中，蛋白微管蛋白谷胱甘肽转移酶果糖磷酸醛缩酶蛋白家族以及热激蛋白和差异蛋白可能在由于受体细胞不同所导致的不同细胞质环境下受体为白色菌株细胞质的双核菌株的菌丝多为匍匐型相比，受体为黄色菌株细胞质的双核菌株菌丝生长较为浓密，气生菌丝较多。这研究结果可能为现有白色金针菇品种可产生原基量较大，并具有较强耐寒性的分子调控机制的揭示提供参考。通过双向核迁移技术获得对金针菇同核异质的双核菌株，结果显示不同细胞质环境会对金针菇菌丝的长速长势等生物。

4、应等关键过程的调控起重要作用。在生物体中，蛋白可以通过促进细胞分裂激酶来调控细胞的生长。有研究表明在白腐真菌中，蛋白可能参与真菌菌丝的蛋白质分泌过程，进而对其生长生理发挥相应的调控作用，。在不同细胞质环境下蛋白表达量增加，表明该蛋白可能蛋白家族以及热激蛋白和差异蛋白可能在由于受体细胞不同所导致的不同细胞质环境下，对金针菇的生长生理起到重要的调控作用。关键词双向核迁移双向电泳遗传与育种野生食用菌金针菇大型食用真菌的遗传生理与生长发育直是研究的热点之，内容多集中于细胞核遗传对其生长发育的影响。等发现当细胞质不同或者线粒体发生突变时，真菌子代在种质性状上会呈现出明显的差异等在研究外源添加葡萄糖氯化钠氯化铵等对线粒体的影响时，发现携带不同线粒体基因。

5、胞质中存在的些生理活性物质有关。等对中国两个香菇种群的线粒体基因组类型的分析结果显示，对于香菇菌株的准确鉴定，应采用细胞核和线粒体分子标记的双重鉴定。年，叶丽云等通过构建肺形侧耳同核异质菌株，并分析线粒体基因对肺形侧耳菌丝生长的影响，发现肺形侧耳线粒体基因会影响核基因的表达，同时对菌丝生长与营养成分也会产生明显影响。上述研究均表明由于受体细胞不同所导致的不同细胞质环境，将会对菌株生物学性状，尤其是菌丝性摘要以黄色金针菇单核菌株和白色金针菇单核菌株为供试菌株，采用双向核迁移技术，获得对具有相同细胞核不同细胞质的双核菌株和简称异质双核菌株。采用菌落形态观察显微镜检查与分子标记对这两个双核菌株进行验证分析，并以菌株菌丝样品为对照，采用双向凝胶电泳。

6、作用。微管蛋白是生物细胞骨架的主要组分之，在真菌菌丝生长过程中，由微管蛋白和肌动蛋白相互依赖的协同作用，分泌囊泡从菌丝体向顶端的连续流动以建立和维持极性的关键步骤，也是细胞壁和细胞膜伸展细胞膜重塑以及细胞质分裂的必要条件，。同时，该协同作用也可能在大型真菌信号转导与组织形态发生改变中发挥至关重要的作用。笔者发现超纯水系统美国密理博公司扫描仪上海中晶科技有限公司人工气候培养箱宁波乐电仪器有限公司生物安全柜上海力申科学仪器有限公司，等电聚焦仪仪和凝胶成像仪美国公司。图双向核迁移图异质双核菌株的获取参照文献的方法，在生物安全柜内，将菌株活化代后，分别取直径为的菌丝块接种于含有培养基的培养皿直径中两菌丝块相距约，臵于人工气候培养箱中避光培养，在菌株。

7、析不同细胞质的金针菇菌丝差异蛋白农产品论文的菌丝蛋白质双向电泳图谱分析结果将采用中方法提取的金针菇双核菌株的菌丝蛋白质样品经双向电泳图谱分析后发现，以菌株为对照组，通过软件分析检测出约个蛋白点，这些蛋白主要集中在等电点，相对分子质量为，蛋白表达丰度出现差异的蛋白点有个，上调表达的蛋白有个，下调表达的蛋白有个图。图引物扩增图谱图金针菇菌株和菌丝蛋白的维电泳图谱差异蛋白的鉴定与分类选取的个差异表达量在倍以上的蛋白胶点经酶解测序与检索，共鉴定出个蛋白，包括个上调蛋白和个下调蛋白表，识别率为。功能注释结果显示，鉴定出的个蛋白与能量代谢次生代谢信号转导细胞骨架结构和调控功能有关。浅析不同细胞质的金针菇菌丝差异蛋白农产品论文。表引物序的区域，转接于含有。

8、，刘靖宇不同细胞质的金针菇菌丝差异蛋白分析食用菌学报，基金山西省自然科学基金面上项目山西省煤基重点科技攻关项目山西省重点研发计划重点项目菌丝体内广泛存在，该酶通过促进谷胱甘肽与活性氧羟基自由基等有害代谢产物的结合，进而提高菌丝对生物与非生物胁迫环境的适应能力。热激蛋白与是目前研究最多的应激蛋白之。研究表明热激蛋白对于双孢蘑菇菌丝在受热胁迫条件下维持自身稳定发挥重要作用。在真菌体内，热激蛋白主要作为分子伴侣参与生命活动，在外界胁迫刺激时被激活，从而提高细胞耐受性。当菌丝内的蛋白质折叠发生时，大量表达以矫正蛋白质的结构，帮助其功能恢复正常。笔者之前的研究也表明在低温与光照的胁迫条件下，果糖磷酸醛缩酶谷胱甘肽转移酶与在金针菇菌丝内的表达量呈现明显。

9、养基的角瓶中，臵于黑暗条件下摇床培养，振荡培养。之后，静臵培养，收集菌丝样品，保存于冰箱中备用。蛋白质的提取参照文献的方法，略作改动。在研钵中加入液氮分别将和的菌丝体研磨成粉末。每菌丝体粉末加入蛋白质抽提液，含巯基乙醇，放臵，加入相同体积的饱和酚。在条件下离心，倒掉上层，取出下层的有机相。加入倍体积预冷的甲醇，放臵以上或者过夜。在的条件下离心，去上清，留沉淀。用预冷甲醇洗涤吹洗蛋白质沉淀，再以相同的条件离心，去上清，将沉淀臵于超净台内吹干。加适量蛋白质溶解液差异。年，刘靖宇等首次通过双向核迁移技术获得的两个具有相同细胞核和不同受体细胞质的香菇双核菌株，其结果显示这两个菌株在菌落形态和出菇期方面存在明显差异，这表明香菇的这些性状差异可能与其细。

10、娇，等核质基因对肺形侧耳菌丝生长营养成分及基因表达的影响菌物学报，戴玉成，杨祝良中国种重要食用菌学名新注菌物学报，陈美元，王泽生，廖剑华浅析不同细胞质的金针菇菌丝差异蛋白农产品论文用研究菌物学报，叶丽云，孟国良，宋燕娇，等核质基因对肺形侧耳菌丝生长营养成分及基因表达的影响菌物学报，戴玉成，杨祝良中国种重要食用菌学名新注菌物学报，陈美元，王泽生，廖剑华，等双孢蘑菇基质降解能力退化的差异蛋白质组学分析菌物学报，曾妍，郑志红，杨磊蛋白功能研究进展现代肿瘤医学，刘军霞超表达高粱果糖，磷酸醛缩酶基因拟南芥对干旱胁迫的响应杨凌西北农林科技大学，陆兆明，徐祯，王珂，等双孢蘑菇耐温差异蛋白质组学研究厦门大学学报自然科学版，宋淋浩，卫银，武晨剑，常明昌，孟俊。

11、上升。本实验中，在黑暗培养后，与其具有相同细胞核的但与菌株的菌丝相比，在受体为白色菌株细胞质的双核菌株菌丝中，蛋白家族果糖磷酸醛缩酶谷胱甘肽转移酶以及热激蛋白与均呈现上调表达。蛋白家族属于小蛋白家族，主要通过调控囊泡运输的方式参与细胞的物质交换和信息交流，是维持机体正常运行的类重要的信号转导蛋白。果糖磷酸醛缩酶不仅在糖酵解途径中是关键酶，而且在卡尔文循环中和磷酸戊糖途径中也是重要限速酶之，主要参与果糖磷酸的合成与分解，进而参与能量的形成与分解。谷胱甘肽转移酶在菌丝体内广泛存在，该酶通过促进谷胱甘肽与活性氧羟基自由基等有害代谢产物的结合，进而提高菌丝对生物与非生物胁迫环境的适应能力。热激蛋白与是目前研究最多的应激蛋白在实际生产中，与白色金针菇。

12、图挑取具有锁状联合的双核菌丝，并将该双核菌株与菌株进行双单杂交，臵于条件下避光培养，在远离杂交线的菌株的菌落侧挑取具有锁状联合的菌丝，从而获得具有黄强耐寒性的分子调控机制的揭示提供参考。通过双向核迁移技术获得对金针菇同核异质的双核菌株，结果显示不同细胞质环境会对金针菇菌丝的长速长势等生物学性状产生明显的影响。利用双向电泳技术对其进行分析后发现，不同细胞质环境对金针菇细胞核的基因表达可能起到重要的调控作用。这研究将为不同颜色金针菇品种间生物学特性差异分子调控机理的揭示提供参考，同时也为金针菇乃至其他食用菌的品种选育种性改良方面等提供新的思路。参考文献刘靖宇，刘新锐，邓优锦，等双向核迁移在香菇遗传和育种中的应用研究菌物学报，叶丽云，孟国良，宋燕。

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