期望通过研究不同温度处理对金针菇菌丝体赖氨酸合成途径相关基因表达和赖氨酸合成的影响，初步探索温度对赖氨酸合成途径的调控机制，进而为培育赖氨酸含量高的金针菇品种提供参考。样以作为赖氨酸的良好来源，保证每日膳食所需。目前，对金针菇生物学特性营养成分和保健功能等的研究开展得较多，而对其基因组学转录组学蛋白组学的相关研究开展得较少。金针菇菌丝体赖氨酸合成方式相关基因表达在低温下的影响情况农产品论文。与真菌中其他氨基酸合成方式不同，赖氨酸具有两条生物合成途径氨基庚酸途径和氨基己酸途径。通过注金针菇菌丝体赖氨酸合成方式相关基因表达在低温下的影响情况农产品论文北京宝日医生物技术有限公司上海生工生物工程股份有限公司北京全式金生物技术有限公司。关键词低温赖氨酸酵母氨酸脱氢酶金针菇食用菌分酸脱氢酶金针菇食用菌分子育种金针菇是目前工厂化生产规模最大栽培技术较成熟的食用菌之，具有较高的营养价值和药用价值，因其富含蛋白质维生素和矿物质以及味道鲜美，广受消费者欢迎，。吴莹莹等分析了种市售工厂化栽培金针菇的氨基酸组成，均含有种水解氨基酸，其中蛋氨酸和赖氨酸含量较丰富。赖氨酸作为人类的必需氨基酸之，自身不能合成，必须酸合成途径中的编码基因，确定金针菇是通过途径合成赖氨酸，以酮戊酸为起始物，通过个酶促反应生成赖氨酸。笔者所在研究团队前期研究酮戊酸对赖氨酸生物合成的诱导作用，筛选到高柠檬酸合酶高异柠檬酸脱氢酶酵母氨酸脱氢酶个关键酶，发现为途径的关键限速酶。笔者分析编码赖氨酸生物合成途径中最后个酶的基因启动子序样品处理对金针菇菌丝体进行不同温度处理接种到平板上的金针菇菌丝在条件下活化培养，接种直径为菌丝块到平板中间，在条件下培养至菌丝长满培养皿，去掉接种块位置菌丝，连带培养基转至无菌的匀浆仪中，加入，间歇打碎，转入装有的角瓶中，在条件下振荡培养作为菌种计划生育委员会国家食品药品监督管理总局食品安全国家标准食品中氨基酸的测定北京中国标准出版社，陶永新，段静怡，李依宁，等金针菇赖氨酸合成通路基因鉴定及对不同光质的响应表达食用菌学报，姜威，赵妍，汪虹，等低温胁迫下草菇甘油磷酸酰基转移酶基因表达变化的研究菌物学报，蒋佩钰，尚晓冬，宋春艳，徐珍，于海龙，李巧珍，章炉军，侧耳培养的重要条件，多数冷胁迫基因在时上调表达，诱导编码漆酶和木质素过氧化物酶的基因转录在白灵侧耳子实体的发育过程中发挥重要作用。等应用逆转录方法研究香菇子实体形成初期变温处理对发育调控基因转录表达的影响，发现低温刺激有利于发育调控基因的高表达及子实体的形成。姜威等对低温敏感型和耐低温型草菇进行量在时较高图。图不同处理时间对表达量的影响图不同处理时间对赖氨酸含量的影响讨论近年来随着金针菇测序工作的完成，以赖氨酸合成途径为切入点，探索其相关基因调控机制的报道逐渐增多。等通过研究金针菇子实体不同发育阶段的表达及赖氨酸合成情况，发现两者呈正相关，推测为赖氨酸合成途径的关键酶。陶永新等采用红绿行制图，利用进行单因素方差分析和检验。为差异显著，以不同小写字母表示。结果与分析金针菇启动子区的顺式作用元件通过软件预测到启动子区包含多个顺式作用元件见表，多个位点存在和，此外还存在两个茉莉酸甲酯响应元件个光响应元件金针菇菌丝体赖氨酸合成方式相关基因表达在低温下的影响情况农产品论文琦，王瑞娟，刘建雨低温对金针菇菌丝体赖氨酸合成途径相关基因表达的影响食用菌学报，基金上海市农委技术创新项目工厂化食用菌优质种质创制与新品种示范上海市农业科学院卓越团队建设计划。顺式作用元件预测利用在线生物软件预测启动子序列的上游顺式作用元件。金针菇菌丝体赖氨酸合成方式相关基因表达在低温下的影响情况农产品论文贵堂，胡秋辉，等金针菇锌多糖分离纯化及其结构特征食品科学，何轩辉，廖森泰，刘吉平金针菇的食用和药用价值研究开发进展广东农业科学，刘建雨，王瑞娟，张丹，等基于金针菇全基因组的赖氨酸合成途径关键酶分析微生物学通报，刘建雨，蒋佩钰，王瑞娟，等酮戊酸对金针菇菌丝生长及赖氨酸合成的影响食用菌学报，中华人民共和国国家卫生和个基因表达的影响。内参基因选择磷酸甘油醛脱氢酶基因，登录号。根据各基因的序列，利用设计引物表，由上海生工生物工程股份有限公司合成。反应体系为正向反向引物低温处理，推测甘油磷酸酰基转移酶的差异表达会影响草菇的耐低温能力。金针菇菌丝体蛋白质组学研究发现，在低温处理条件下，赖氨酸生物合成途径中只有氨基己酸半醛脱氢酶发生了上调。参考文献戴玉成，杨祝良中国种重要食用菌学名新注菌物学报，吴莹莹，鲍大鹏，王瑞娟，等种市售工厂化栽培金针菇的氨基酸组成及蛋白质营养评价食品科学，刘芳，蓝红绿蓝复合种光处理金针菇子实体，测定赖氨酸含量及相关基因的表达量，发现蓝光诱导使相关基因呈上调表达，子实体中赖氨酸含量增加。刘建雨等利用金针菇赖氨酸合成途径中的起始物酮戊酸对金针菇菌丝进行诱导，发现其对菌丝生长及赖氨酸合成均表现出低浓度促进高浓度抑制的现象。温度是影响食用菌生长发育的重要因素。等发现低温诱导是白，和个低温应答元件，推测金针菇的转录可能会受到外源因素如茉莉酸甲酯光照以及温度的影响。不同温度处理对基因表达及赖氨酸含量影响图不同温度对基因表达的影响图不同温度对赖氨酸含量的影响处理不同时间对表达量和赖氨酸含量的影响在条件下对菌丝体分别处理，的表达量如图所示，时表达量较高。菌丝体的赖氨酸各，模板，。反应条件为预变性变性，退火延伸，个循环。每个样品设置个复孔，相对表达量计算采用法。表实时荧光定量引物将保存的菌丝体样品冻干磨粉，委托上海交通大学分析测试中心，采用全自动氨基酸分析仪，参照测定样品的赖氨酸含量，每个样品设置个重复。统计分析数据使用进金针菇菌丝体赖氨酸合成方式相关基因表达在低温下的影响情况农产品论文说明书提取菌丝体总，并进行凝胶电泳检测。参照说明书，去除基因组，反转录成。荧光定量检测基因表达量利用荧光定量检测低温处理对赖氨酸合成途径中处理对金针菇菌丝体进行不同温度处理接种到平板上的金针菇菌丝在条件下活化培养，接种直径为菌丝块到平板中间，在条件下培养至菌丝长满培养皿，去掉接种块位置菌丝，连带培养基转至无菌的匀浆仪中，加入，间歇打碎，转入装有的角瓶中，在条件下振荡培养作为菌种按照金针菇全基因组赖氨酸合成途径中的编码基因，确定金针菇是通过途径合成赖氨酸，以酮戊酸为起始物，通过个酶促反应生成赖氨酸。笔者所在研究团队前期研究酮戊酸对赖氨酸生物合成的诱导作用，筛选到高柠檬酸合酶高异柠檬酸脱氢酶酵母氨酸脱氢酶个关键酶，发现为途径的关键限速酶。笔者分析编码赖氨酸生物合成途径中最后个酶子育种金针菇是目前工厂化生产规模最大栽培技术较成熟的食用菌之，具有较高的营养价值和药用价值，因其富含蛋白质维生素和矿物质以及味道鲜美，广受消费者欢迎，。吴莹莹等分析了种市售工厂化栽培金针菇的氨基酸组成，均含有种水解氨基酸，其中蛋氨酸和赖氨酸含量较丰富。赖氨酸作为人类的必需氨基酸之，自身不能合成，必须从食物中摄取，而金针菇从食物中摄取，而金针菇可以作为赖氨酸的良好来源，保证每日膳食所需。目前，对金针菇生物学特性营养成分和保健功能等的研究开展得较多，而对其基因组学转录组学蛋白组学的相关研究开展得较少。金针菇菌丝体赖氨酸合成方式相关基因表达在低温下的影响情况农产品论文。主要试剂及仪器聚合酶列，发现其存在低温响应元件。温度是影响金针菇生长发育及品质的重要因素，而关于温度对金针菇赖氨酸生物合成途径的影响机制未见报道。因此笔者期望通过研究不同温度处理对金针菇菌丝体赖氨酸合成途径相关基因表达和赖氨酸合成的影响，初步探索温度对赖氨酸合成途径的调控机制，进而为培育赖氨酸含量高的金针菇品种提供参考。关键词低温赖氨酸酵母按照接种量加入装有的角瓶中，在条件下振荡培养，然后将角瓶分别置于条件下处理，用滤布德国公司过滤收集菌丝，分装于离心管中，液氮速冻后保存备用。每组处理设置个重复。与真菌中其他氨基酸合成方式不同，赖氨酸具有两条生物合成途径氨基庚酸途径和氨基己酸途径。通过注释金针菇全基因组赖