1、号增菌液批号均购自美国公司细胞培养液批号购自美国公司胎牛述机制的作用越弱，从而出现菌株较单耐药菌株胞内繁殖能力的下降。巨噬细胞的破坏会释放大量的，该物质的吸光度值在处存在特异吸收峰，因此检测反应体系中吸光度值的变化可以直接反映巨噬细胞死亡程度的高低。本研究显示，所有耐药株感染巨噬细胞后的释放量均明显低于，提示耐药株对巨噬细胞的破坏程度均较轻，对其细胞毒力均减弱。小鼠半数生存期分析结果显示，耐药株感染小鼠后的生存时间均明显长于，这与文献报道致且感染和菌株的小鼠较感染和菌株的小鼠存活时间长，提示和菌株的毒力均较弱而双重耐药菌株感染小鼠的存活时间单耐单耐单耐耐药菌株，提示双重耐药菌株的毒力低于单耐药菌株。另外，结。

2、系讨论的毒力因子与感染宿主相互作用，可导致宿主相应组织出现病理性损伤。文献报道，不同的耐药株可出现毒力的不同改变，从而影响菌株的致病能力，如等毒力基因的改变会影响邻苯甲酸硫菌酯的合成，降低菌株在巨噬细胞内的繁殖能力，含贝达喹啉方案治疗耐多药广泛耐药结核病的疗效结核病科论文实验孔和阳性对照孔，共孵育后使用清洗次，去除胞外，再加入新的细胞培养基。臵于培养箱中，培养。将上清液以孔转移至新的酶分析板中，添加底物孔。室温避光孵育后于每孔加入终止液，在波长处检测其吸光度值值，以及实验组含菌液孔与巨噬细胞最大释放组阳性对照孔吸光度值的比值，并以此为测量结果。小鼠生存期测定小鼠生存曲线为菌株毒力判断最重要的指标。将各耐药菌。

3、尚不能完全确定相关性。本研究通过细胞实验及动物实验仅初步评价了临床耐药株实验诱导耐药株相较于标准株的毒力变化情况，而对耐药株毒力减弱的原过敲除回补或者过表达筛选基因，以观察该位点对菌株毒力的影响。综上，笔者通过对临床耐药分离株和耐及菌株的生长繁殖能力巨噬细胞的损伤程度，以及感染后小鼠生存时间的测定，初步了解了这些菌株的致病能力，发现相较于标准株，抗结核新药耐药株的毒力均明显下降，且其毒力的大小与耐药的数量呈负相关。此结论可能为耐药株的发病机制研究和防治提供依据。文章来源周莹宇，付雷，张炜焱，王彬，陈曦，陆宇，陈效友不同耐药类型结核分枝杆菌毒力变化的初步研究中国防痨杂志，。主要试剂和仪器试剂培养基批号培养基批。

4、细胞生长状态最佳，细胞损伤程度较小，的释放程度也较低。而随着菌液密度的增大或培养天数的增加，细胞生长状态不稳定现象逐步增加，甚至出现细胞营养不良贴壁不牢固而加大细胞损失的情况，同时的释放程度也逐渐升高。巨噬细胞释放程度测定该实验通过测定巨噬细胞的损伤程度，反映菌株对巨噬细胞的毒力程度。将巨噬细胞浓度稀释为，铺于孔透明微孔板内，设臵阴性对照孔和发现菌株和的毒力弱于菌株和，双重耐药菌株的毒力单耐菌株单耐单耐菌株。呈现出随着耐药数量的增加菌株毒力下降程度更明显的现象图。表和临床分离株感染的小鼠周内生存期分布的法分析结果表和实验室诱导耐药菌株感染的小鼠周内生存期分布的法分析结果图不同耐药菌株毒力强弱与耐药品数量的关。

5、唑胺菌株单耐菌株，各株，以及同时耐和的菌株，各株。测定临床耐药分离株对线抗结核药物和实验室诱导耐药株对的最低抑菌浓度，值。绘制各研究菌株的体外生长曲线及测量感染巨噬细胞后的胞内菌落形成单位并的毒力均较弱而双重耐药菌株感染小鼠的存活时间单耐单耐单耐耐药菌株，提示双重耐药菌株的毒力低于单耐药菌株。另外，结合菌株值和巨噬细胞实验，结果显示，耐药数量越多的菌株，其感染小鼠后半数生存时间越长，也提示耐药数量越多的菌株其毒力越弱。由此认为，菌株的耐药数量可能与菌株的毒力呈负相关。但在对耐菌株的测定中发现，和组小鼠生存时间明显长于组，可能与诱导过程中和产生了对其他药物的耐药有关，但因本研究未对耐药株进行对其他药物的检测，。

6、合菌株值，菌株感染巨噬细胞后释放量的吸光度值比值分别为均明显低于标准株，差异均有统计学意义，值均。体内毒力实验显示所有菌株感染小鼠后，半数生存期均明显长于标准株。小鼠生存曲线显示准广泛耐药菌株感染小鼠的存活时间长于耐多药菌株，即双重耐药菌株组小鼠存活时间耐药菌株组单耐组单耐耐药菌株组。结论耐药株的毒力均较野生型标准株下降，毒力的大小与该菌株耐药的数量可能呈负相关。关键词分枝杆含贝达喹啉方案治疗耐多药广泛耐药结核病的疗效结核病科论文突变形式，以及适应性的改变与菌株毒力大小的关系未进行深入探究。在未来的研究中，笔者认为可以通过菌株全基因组测序等生物学技术筛选出毒力相关耐药突变位点，再通过敲除回补或者过表达筛选基。

7、株在培养基中培养至对数生长期，使用酶标仪测量其吸光度值值，并使用无菌生理盐水将菌液浓度配制成。使用摇床将菌液混匀后，以尾静脉注射的方式感染小鼠，每只小鼠注射菌量为，只同时将各菌株倍比稀释后接种于固体培态分布的计量资料使用两独立样本检验。而释放实验得到次结果，且符合正态分布，均以表示，各菌株数据与标准菌株的比较采用两独立样本检验。使用生存分析方法绘制小鼠生存曲线，并通过法又称时序检验进行差异性比较。均以为差异有统计学意义。结果菌株表型耐药情况标准株和临床分离株耐药类型及值见表。实验诱导耐药菌株对或药品耐药类型及值见表。结果显示，不同耐药菌株的毒力均较标准菌株有所下降，且耐药种类分别为种种种种表。体外生长曲线体。

8、药株对的最低抑菌浓度，值。绘制各研究菌株的体外生长曲线及测量感染巨噬细胞后的胞内菌落形成单位并测定感染后巨噬细胞释放乳酸脱氢酶清批号购自美国公司。仪器多功能酶标仪型号，瑞士迪肯公司，电热水浴锅型号，上海博讯实业有限公司医疗设备厂。研究方法最低抑菌浓度检测采用微孔板阿尔玛蓝显色法，。甲基亚砜配臵药物储备液，使用前稀释至所需浓度。设臵阴性对照孔和阳性对照孔，将药物在微孔荧光板进行倍稀释至相应浓度后，每孔加入菌液和培养基。臵于恒温培养箱，向各孔加入阿尔玛蓝和吐温利于菌液悬浮，孵育，用酶标仪测定各孔的吸光度值值，并计算药物对菌株的值。含贝达喹啉方案治疗耐多药广泛耐药结核病的疗效结核病科论文。但对于实验室诱导单耐和巨。

9、外第天实际菌量计数约为，根据不同菌株在不同时间的胞内计数结果和生长曲线观察到，经过的培养差异均有统计学意义，值均。另外，菌株感染巨噬细胞后释放量的吸光度值比值分别为均明显低于标准株，差异均有统计学意义，值均。体内毒力实验显示所有菌株感染小鼠后，半数生存期均明显长于标准株。小鼠生存曲线显示准广泛耐药菌株感染小鼠的存活时间长于耐多药菌株，即双重耐药菌株组小鼠存活时间耐药菌株组单耐组单耐耐药菌株组。结论耐药株的毒力均较野生型标准株下降，毒力的大小摘要目的初步评价结核分枝杆菌，临床耐药分离株和实验室诱导耐药株的毒力变化表征。方法选取标准株和减毒株各株株临床耐药分离株和，各株和株实验室诱导耐药株分别为单耐菌株单耐利奈。

10、胞的破坏会释放大量的，该物质的吸光度值在处存在特异吸收峰，因此检测反应体系中吸光度值的变化可以直接反映巨噬细胞死亡程度的高低。本研究显示，所有耐药株感染巨噬细胞后的释放量均明显低于，提示耐药株对巨噬细胞的破坏程度均较轻，对其细胞毒力均减弱。小鼠半数生存期分析结果显示，耐药株感染小鼠后的生存时间均明显长于，这与文献报道致且感染和菌株的小鼠较感染和菌株的小鼠存活时间长，提示和菌，临床耐药分离株和实验室诱导耐药株的毒力变化表征。方法选取标准株和减毒株各株株临床耐药分离株和，各株和株实验室诱导耐药株分别为单耐菌株单耐利奈唑胺菌株单耐菌株，各株，以及同时耐和的菌株，各株。测定临床耐药分离株对线抗结核药物和实验室诱导耐。

11、噬细胞实验，结果显示，耐药数量越多的菌株，其感染小鼠后半数生存时间越长，也提示耐药数量越多的菌株其毒力越弱。由此认为，菌株的耐药数量可能与菌株的毒力呈负相关。但在对耐菌株的测定中发现，和组小鼠生存时间明显长于组，可能与诱导过程中和产生了对其他药物的耐药有关，但因本研究未对耐药株进行对其他药物的检测，尚不能完全确定相关性。本研究通过细胞实验及动物实验仅初步评价了临床耐药株实验诱导耐药株相较于标准株的毒力变化情况，而对耐药株毒力减弱的原因突变形式，以及适应性的改变与菌株毒力大小的关系未进行深入探究。在未来的研究中，笔者认为可以通过菌株全基因组测序等生物学技术筛选出毒力相关耐药突变位点，再生存率分析结核评价研究目。

12、因，以观察该位点对菌株毒力的影响。综上，笔者通过对临床耐药分离株和耐及菌株的生长繁殖能力巨噬细胞的损伤程度，以及感染后小鼠生存时间的测定，初步了解了这些菌株的致病能力，发现相较于标准株，抗结核新药耐药株的毒力均明显下降，且其毒力的大小与耐药的数量呈负相关。此结论可能为耐药株的发病机制研究和防治提供依据。文章来源周莹宇，付雷，张炜焱，王彬，陈曦，陆宇，陈效友不同耐药类型结核分枝杆菌毒力变化的初步研究中国防痨杂志菌株的胞内繁殖能力除耐菌株明显降低外，其他均与标准株相似，考虑与耐药菌株相关基因突变有关，且突变基因的数量越多可能引起巨噬细胞内对抗上述机制的作用越弱，从而出现菌株较单耐药菌株胞内繁殖能力的下降。巨噬细。

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