尔酮对人乳腺癌细胞凋亡的影响乳腺癌论文光探针法检测细胞线粒体膜电位蛋白免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白细胞淋巴瘤，细胞淋巴瘤相关蛋白的表达及内质网应激相关蛋白，转录激活因子，蛋白激酶样内质网激酶，磷酸化蛋白激酶样内质网激酶，真核翻译起始因子，磷酸化真品经凝胶电泳后转至膜，脱脂牛奶封闭，孵育抗︰冰箱过夜，洗涤次，抗室温孵育，采用显影液显色，凝胶成像系统拍照，软件分析。统计学方法统计采用软件对所有实验数据进行统计分析，实验数据以表示，数据方差齐性检验后，两组间比较采用标准进行，表示差异有统计学意义。摘要目的观察甘胞存活率的影响与空白组比较，随着药物浓度增大，细胞存活率下降，在浓度时，细胞存活率显著降低。其为，见表。故选择倍，倍，倍个剂量进行后续实验。对细胞凋亡的影响与空白组比较均可诱导细胞凋亡，时细胞凋亡率达方法细胞培养及分组细胞用含胎牛血清，青链霉素的培养基，于，培养箱培养，细胞传代培养。取生长状态良好的对数期细胞进行实验。细胞分为空白组和药物组，药物组分为低中高剂量组，剂量选择为倍半数抑制浓度，倍，倍。细胞存活率检测取状态良好的对数期细胞，以个孔接种于孔板，于，培养箱过夜。质网激酶，磷酸化蛋白激酶样内质网激酶，真核翻译起始因子，磷酸化真核翻译起始因子，肌动蛋白单克隆抗体，山羊抗兔辣根过氧化物酶标记抗美国公司，批号分别为，。仪器型培养箱，型超净工作乳腺癌论文。细胞内活性氧检测采用探针检测，将生长良好的对数期细胞，以个接种于孔板，培养过夜。待细胞贴壁后，分别将终浓度为，的处理。染液用∶稀释成工作液，每孔加入工作液，培养箱中避光孵育，洗涤次，倒臵荧光显微镜拍照，软件检翻译起始因子，磷酸化真核翻译起始因子，肌动蛋白单克隆抗体，山羊抗兔辣根过氧化物酶标记抗美国公司，批号分别为，。仪器型培养箱，型超净工作台美国公司型共聚焦显微镜德国，于培养箱继续培养，酶标仪测吸光度，计算细胞存活率，细胞存活率药物溶剂空白溶剂运用软件计算药物。药品与试剂上海麦克林生化科技有限公司，批号，纯度细胞增殖与活性检测法试剂盒，碘化丙啶凋亡试剂盒，荧光探针，荧光探针，染色剂，磷酸盐缓冲甘草查尔酮对人乳腺癌细胞凋亡的影响乳腺癌论文美国公司型共聚焦显微镜德国公司型离心机德国公司型多功能酶标仪美国公司型电泳仪和转膜仪，型凝胶成像仪美国公探针，荧光探针，染色剂，磷酸盐缓冲液大连美仑生物有限公司，批号分别为培养基，胎牛血清美国公司，批号分别为蛋白定量试剂盒美国公司，批号内质网应激相关蛋白，转录激活因子，蛋白激酶样内时细胞凋亡率达。见表。与空白组比较抗凋亡蛋白表达明显降低，促凋亡蛋白表达明显升高。见图，表。方法细胞培养及分组细胞用含胎牛血清，青链霉素的培养基，于，培养箱培养，细胞传代培养。取生长状态良好的对数期细胞进行实验。细胞分为空白组和药物组，药物组分为低中高剂测荧光强度。细胞线粒体膜电位检测采用探针检测，将生长良好的对数期细胞，以个接种于共聚焦皿，培养过夜。待细胞贴壁后，分别将终浓度为，的处理。药品与试剂上海麦克林生化科技有限公司，批号，纯度细胞增殖与活性检测法试剂盒，碘化丙啶凋亡试剂盒，荧公司型离心机德国公司型多功能酶标仪美国公司型电泳仪和转膜仪，型凝胶成像仪美国公司。甘草查尔酮对人乳腺癌细胞凋亡的影响液大连美仑生物有限公司，批号分别为培养基，胎牛血清美国公司，批号分别为蛋白定量试剂盒美国公司，批号内质网应激相关蛋白，转录激活因子，蛋白激酶样内质网激酶，磷酸化蛋白激酶样内质网激酶，真量组，剂量选择为倍半数抑制浓度，倍，倍。细胞存活率检测取状态良好的对数期细胞，以个孔接种于孔板，于，培养箱过夜。将细胞分为溶剂组空白组和药物组，溶剂组不含细胞，只含培养基，空白组不含药物，只含细胞和培养基，药物组分别以终浓度为的处理细胞，每组个复孔。后每孔加入溶液甘草查尔酮对人乳腺癌细胞凋亡的影响乳腺癌论文癌论文。结果对细胞存活率的影响与空白组比较，随着药物浓度增大，细胞存活率下降，在浓度时，细胞存活率显著降低。其为，见表。故选择倍，倍，倍个剂量进行后续实验。对细胞凋亡的影响与空白组比较均可诱导细胞凋亡，细胞也有毒性作用，往往会带来比较严重的不良反应，而且细胞耐药性也进步限制了其运用。因此，寻找对乳腺癌具有安全有效的抗肿瘤药物是至关重要的。待细胞贴壁后，分别将终浓度为，的处理。用含蛋白酶抑制剂裂解液提取蛋白，法测定蛋白浓度，蛋白变性。蛋白样品经凝胶电泳后转至膜，脱脂表达明显增多，磷酸化表达明显升高，呈浓度依赖性。结论甘草查尔酮可能通过增加细胞内水平，降低引起线粒体功能障碍和内质网应激诱导细胞凋亡。关键词乳腺癌内质网应激活性氧甘草查尔酮线粒体膜电位乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤，年全球每年约有万新发病例，有万人死亡，已经成为女性生核翻译起始因子表达。结果与空白组比较，随着甘草查尔酮浓度增大，从甘草查尔酮开始，细胞存活率明显降低，其半数抑制浓度为甘草查尔酮，组细胞凋亡明显升高，甘草查尔酮时细胞凋亡率达甘草查草查尔酮对人乳腺癌细胞凋亡的影响，并探讨其可能作用机制。方法细胞增殖与活性检测法检测不同浓度甘草查尔酮对细胞存活率的影响甘草查尔酮，作用细胞，分别用细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡情况荧光探针法检测细胞内活性氧水平，。见表。与空白组比较抗凋亡蛋白表达明显降低，促凋亡蛋白表达明显升高。见图，表。甘草查尔酮对人乳腺癌细胞凋亡的影响乳腺癌论文。待细胞贴壁后，分别将终浓度为，的处理。用含蛋白酶抑制剂裂解液提取蛋白，法测定蛋白浓度，蛋白变性。蛋白。将细胞分为溶剂组空白组和药物组，溶剂组不含细胞，只含培养基，空白组不含药物，只含细胞和培养基，药物组分别以终浓度为的处理细胞，每组个复孔。后每孔加入溶液，于培养箱继续培养，酶标仪测吸光度，计算细胞存活率，细胞存活率药物溶剂空白溶剂运用软件计算药物。结果对