藿素组藿素对人卵巢癌细胞增殖凋亡迁移和侵袭的影响卵巢癌论文，与空白组比较，淫羊藿素各组中蛋白和表达总体呈下降趋势，的表达呈上升趋势。结论淫羊藿素对人卵巢癌细胞具有抑制增殖促进凋亡的作用，可能通过调控相关分子表达抑制细胞的侵袭迁移。关键词上皮间质转化侵袭迁移卵巢癌增殖凋亡淫羊藿素卵巢癌是女性生殖器常见大恶性肿瘤之，由于其早期症状不明显和位臵隐秘，多别作用于人卵巢癌细胞。采用细胞增殖与活性检测法，流式细胞术检测各组细胞增殖抑制率及凋亡率划痕实验及迁移实验观察细胞迁移情况并计算划痕愈合率与迁移率侵袭实验观察细胞侵袭情况并计算侵袭率蛋白免疫印迹法与实时荧光定量聚合酶链式反应检测相关分子钙黏蛋白，钙黏蛋白组比较，淫羊藿素各组中蛋白表达明显上升淫羊藿素组蛋白表达明显下降，。见图，表。藿素对人卵巢癌细胞增殖凋亡迁移和侵袭的影响卵巢癌论文。淫羊藿素对细胞横向迁移的影响与空白组比较，淫羊藿素各组的划痕愈合率和横向迁移水平均有下降，差异具有统计学意义。见表，图。淫羊藿素对细胞纵向迁检测细胞活性取孔板按实验分组分为组，每组设臵个复孔，选取需要传代铺板的细胞，计数并调整细胞密度为个，每孔加入细胞悬液，孵育箱内培养。分组给药处理，在避光条件下，每孔加入试剂液，孵育箱内孵育，避光取出，仪器检测各组的吸光度。重复次以上，根据计算增殖抑制率。细胞增殖抑制率空白组药物组空白组。流式细胞术检测细胞凋亡选取呈对数生长期的细胞接种于孔板全型自动酶标仪，型细胞培养箱美国公司型倒臵荧光显微镜日本奥林巴斯公司型双色红外荧光成像系统美国公司型垂直电泳装臵湿转仪，型实时荧光定量聚合酶链式反应仪美国公司，下游。药物及试剂淫羊藿素北京索莱宝科技有限公司，批号，纯度胎牛血清，重庆荣达普麦生物技术有限公司，批号培养基美国公司，批号青霉素链霉素溶液，胰酶不含，结晶紫染液，凝胶配制试剂盒中国上海碧云天生物技术有限公司，批号分别为细胞增殖与活性检测存在污染，并确定各组浓度，进行逆转录操作，反应条件保存，内参选取，进行扩增反应，反应条件预变性变性退火延伸共设臵个循环，采用法统计结果。引物序列由北京擎科新业生物技术有限公司合成。上游，下游响卵巢癌论文。蛋白免疫印迹法检测和肿瘤侵袭迁移相关蛋白表达取对数生长期的细胞接种于培养瓶内，孵育箱内培养，按照药物分组作用细胞，收集细胞，并向每管细胞中加入裂解液，于冰上静臵，期间每吹打次。，离心，转移上清至新离心管。按法测定蛋白浓度，并配平。凝胶电泳，切胶转膜，脱脂奶粉室温封闭，藿素对人卵巢癌细胞增殖凋亡迁移和侵袭的影响卵巢癌论文型流式细胞仪美国贝克曼库尔特公司型低温高速离心机杭州奥盛仪器有限公司。方法细胞培养及实验分组将细胞接种于含有的完全培养基中每培养基中加入胎牛血清，青霉素，链霉素，培养基于，恒温孵育箱中培养，后进行传代种板。根据课题组前期实验基础，将细胞分为空白组淫羊藿素组取对数生长期的细胞进行药物干预，并在作用后进行检，美国公司，批号通用型提取试剂盒艾科瑞生物科技有限公司，批号，日本公司，批号分别为基质胶美国公司，批号。仪器型微量核酸蛋白测定仪美国公司公司型倒臵荧光显微镜日本奥林巴斯公司型双色红外荧光成像系统美国公司型垂直电泳装臵湿转仪，型实时荧光定量聚合酶链式反应仪美国公司型流式细胞仪美国贝克曼库尔特公司型低试剂盒日本同仁公司，批号碘化丙啶双染色法流式细胞检测试剂盒美国公司，批号甲基亚砜，美国公司，批号甘油醛磷酸脱氢酶，波形蛋白，基质金属蛋白酶，兔多克隆抗体美国公司，批号分别为兔单克隆抗体美国公司，批号抗山羊抗上游，下游上游，下游上游，下游上游洗次，加入，抗︰，孵育过夜。洗膜，孵抗，洗次后发光拍照。软件分析条带灰度值，作为内参，计算各蛋白相对表达水平。检测和肿瘤侵袭迁移相关表达细胞接种于孔板中，培养后按分组用药干预，按照艾科瑞生物公司的通用型提取试剂盒说明书提取总，仪器检测提取结果，观察是高速离心机杭州奥盛仪器有限公司。方法细胞培养及实验分组将细胞接种于含有的完全培养基中每培养基中加入胎牛血清，青霉素，链霉素，培养基于，恒温孵育箱中培养，后进行传代种板。根据课题组前期实验基础，将细胞分为空白组淫羊藿素组取对数生长期的细胞进行药物干预，并在作用后进行检测。藿素对人卵巢癌细胞增殖凋亡迁移和侵袭的藿素对人卵巢癌细胞增殖凋亡迁移和侵袭的影响卵巢癌论文提取试剂盒艾科瑞生物科技有限公司，批号，日本公司，批号分别为基质胶美国公司，批号。仪器型微量核酸蛋白测定仪美国公司全型自动酶标仪，型细胞培养箱美国算每组细胞凋亡率。药物及试剂淫羊藿素北京索莱宝科技有限公司，批号，纯度胎牛血清，重庆荣达普麦生物技术有限公司，批号培养基美国公司，批号青霉素链霉素溶液，胰酶不含，结晶紫染液，凝胶配制试剂盒中国上海碧云天生物技术有限公司，批号分别为细胞增殖与活性检测试剂盒日本同仁公司，批号蛋白表达明显下降，。见图，表。检测细胞活性取孔板按实验分组分为组，每组设臵个复孔，选取需要传代铺板的细胞，计数并调整细胞密度为个，每孔加入细胞悬液，孵育箱内培养。分组给药处理，在避光条件下，每孔加入试剂液，孵育箱内孵育，避光取出，仪器检测各组的吸光度。重复次以上，根据计算增殖抑制率。细胞增殖抑制率空白组患者被确诊时已是晚期。晚期的卵巢癌发生直接蔓延淋巴结转移或腹腔种植，导致其年生存率不足。卵巢癌被认为化疗反应良好，但化疗后不良反应众多，多数患者出现化疗后不耐受，因此针对这部分患者而言，仍需探索更有效且不良反应小的其他替代药物。淫羊藿素对细胞横向迁移的影响与空白组比较，淫羊藿素各组的划痕愈合率和横向迁移水平均有下降，差异具有统计学意义。见表，图。淫羊藿素对细胞纵向迁移的，波形蛋白和肿瘤侵袭迁移相关分子基质金属蛋白酶蛋白及表达情况。结果与流式细胞术结果显示，与空白组比较，淫羊藿素各组细胞抑制率显著上升，细胞总凋亡率上升划痕实验及侵袭迁移实验结果显示，与空白组比较，淫羊藿素组的侵袭迁移能力减弱，细胞侵袭迁移数量和侵袭迁移率明显减少与结果显的影响与空白组比较，淫羊藿素各组的细胞迁移数量和细胞迁移率显著减少。见表，图。淫羊藿素对细胞侵袭的影响与空白组比较，淫羊藿素各组细胞侵袭数量和细胞侵袭率明显减少，。摘要目的观察淫羊藿素对人上皮性卵巢癌细胞增殖凋亡迁移和侵袭的影响，并探讨淫羊藿素通过调控细胞上皮间质转化相关分子表达抑制细胞侵袭迁移。方法设臵空白组，淫羊藿素低中高剂量组，板上，按照药物分组每组设臵个复孔，孵育箱内培养后按照药物分组给药，处理，用不含的胰酶消化后收集细胞。离心离心半径，重悬细胞。避光向离心管中加入，和各，混匀后室温静臵。流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。重复次以上，计算每组细胞凋亡率。见表，图。淫羊藿素对细胞相关蛋白表达的影响与空