1、“.....洛克米兰醇可以时间和浓度依赖性显著激活蛋白的磷酸化，差异显著，而对总的蛋白没影响。洛克米兰醇可以浓度依赖性激活的磷酸化，而对组期细胞比例较洛克米兰醇单独处理组显著降低。结果显示与洛克米兰醇处理组相比，预处理洛克米兰醇组期相关蛋白和的表达明显增加。以上结果表明，信号通路通过调控期调控蛋白和的表达参与洛克米兰醇诱导的细胞期阻滞。图洛克米兰醇对细胞周期和细胞凋亡的影响，洛克米兰醇作用，洛克米兰醇作用图洛克米兰醇对细胞周期调控相关蛋白表达的影响，图洛克米兰醇对信号通路相关蛋白表达的影响，讨论目前，化疗药物杀伤肿瘤细胞的同时，对正常细胞也有较强的细胞毒性作用。阿霉素是治疗肝癌的常用化疗药物......”。

2、“.....其作用机制可能为洛克米兰醇过度激活信号转导通路，作用于磷酸酶而使其失活，导致其无法激活而使复合物活性降低，从而引起细胞周期阻滞。对于洛克米兰醇在体内抗肝癌的活性和机制还需进步研究。参考文献吴征镟新华本草纲要第册上海上海科学技术出版牡，彭花，蒋孝华和在细胞周期调控及肿瘤发生发展中的作用现代医药卫生，基金国家自然科学基金面上项目中国药科大学双流学科创新团队建设项目。肝癌细胞中洛克米兰醇的抗增殖作用及其机制探究肿瘤细胞论文。洛克米兰醇对人肝癌细胞信号通路相关蛋白表达的影响结果如图所示，洛克米兰醇可以时间和浓度依赖性显著激活蛋白的磷酸化，差异显著，而对总的蛋白在核中被完全活化，促进细胞从期进入期。当活性受抑制时，复合物的活性也将受抑制，发生期阻滞。本研究发现洛克米兰醇可显著抑制蛋白的表达。因此......”。

3、“.....进而降低复合物活性，最终诱导细胞发生周期阻滞。图信号通路参与洛克米兰醇诱导的细胞周期阻滞，与对照组比较与洛克米兰醇组比较信号通路在调控细胞增殖方面具有重要作用。有研究表明和信号通路都能通过不同的途径对细胞周期进行调控。还可以直接参与的激活过程，对期检测点进行调控可以参与介导期相关传统化疗药阿霉素抑制肝癌细胞的效果和对正常肝细胞的毒性评价发现，洛克米兰醇在抑制细胞增殖的效果和对细胞选择性优于阿霉素。表明洛克米兰醇是个潜在的治疗肝癌的化合物。为了阐明洛克米兰醇抑制肝癌细胞的分子机制，采用细胞克隆和实验方法发现洛克米兰醇能够抑制细胞的合成，对细胞造成不可逆转的损伤。有研究表明洛克米兰醇能够在前列腺癌细胞引起细胞周期阻滞和细胞凋亡......”。

4、“.....等研究发现洛克米兰醇溴代物可通过抑制和的相互作用激活引起尿路上皮癌细胞细胞周期阻滞。本研究证实洛克米兰醇主要通过引起细胞细胞周期阻滞起到抗增殖的效果。细胞凋亡检测取对数生长期的细胞，调细胞数为个接种于孔培养板，后给药。给药组加入含不同浓度洛克米兰醇的培养基，给药组和对照组各设个复孔，后收集细胞，按双染细胞检测说明书操作，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。细胞周期检测取对数生长期的细胞，以个的密度接种于孔培养板培养。先用无血清的培养基处理细胞使处于细胞周期不同阶段的细胞达到同步化。分别用最高浓度洛克米兰醇处理细胞不同时间或者不同浓度的洛克米兰醇处理细胞，收集细胞，乙醇固定过夜，加入综合染液染色，流式细胞仪检测。法检测相关蛋白表达取对数生长期的细胞，以个的密度接种于培养皿。按照项下方式给药，收集细胞......”。

5、“.....加入。与对照组比较，随着洛克米兰醇作用于细胞的药物浓度的增加，细胞克隆数目和大小逐渐减少，差异显著。以上结果表明洛克米兰醇能够剂量依赖性地抑制细胞增殖，其抑制细胞增殖的活性可能与其抑制细胞合成有关。肝癌细胞中洛克米兰醇的抗增殖作用及其机制探究肿瘤细胞论文。细胞克隆形成实验取对数生长期细胞，每孔接种个细胞于孔培养板，每组设个复孔，臵培养箱培养后加药，使洛克米兰醇的终浓度为，给药后，弃去含药培养基，用磷酸盐缓冲液洗遍，加入新鲜不含药培养基继续培养。在倒臵显微镜下观察并记录每组细胞克隆数目，细胞数大于的克隆记为个细胞克隆。计数后弃去培养基，洗涤次后，用多聚甲醛固定，结晶紫染色后流水冲洗，拍照。计算克隆形成率。染色取对终浓度为，给药后，弃去含药培养基，用磷酸盐缓冲液洗遍，加入新鲜不含药培养基继续培养......”。

6、“.....细胞数大于的克隆记为个细胞克隆。计数后弃去培养基，洗涤次后，用多聚甲醛固定，结晶紫染色后流水冲洗，拍照。计算克隆形成率。染色取对数生长期细胞，以每孔个细胞接种于激光共聚焦平皿中，培养后，给药组分别给予的洛克米兰醇，药物孵育后，加入终浓度为溶液，与药物继续共同孵育。弃培养基清洗细胞次，将未渗入的洗脱掉。按照试剂盒操作固定细胞并染色，将激光共聚焦平皿臵于激光共聚焦显微镜下，以激发波长，发射波长拍照，被标记的细胞为红色，未标记的细胞为蓝色。用软件统计被标记的细胞数目。染色按照试剂盒的说明将国药科大学双流学科创新团队建设项目。肝癌细胞中洛克米兰醇的抗增殖作用及其机制探究肿瘤细胞论文。细胞凋亡检测取对数生长期的细胞，调细胞数为个接种于孔培养板，后给药。给药组加入含不同浓度洛克米兰醇的培养基，给药组和对照组各设个复孔......”。

7、“.....按双染细胞检测说明书操作，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。细胞周期检测取对数生长期的细胞，以个的密度接种于孔培养板培养。先用无血清的培养基处理细胞使处于细胞周期不同阶段的细胞达到同步化。分别用最高浓度洛克米兰醇处理细胞不同时间或者不同浓度的洛克米兰醇处理细胞，收集细胞，乙醇固定过夜，加入综合染液染色，流式细胞仪检测。法检测相关蛋白表达取对细胞周期阻滞，与对照组比较与洛克米兰醇组比较信号通路在调控细胞增殖方面具有重要作用。有研究表明和信号通路都能通过不同的途径对细胞周期进行调控。还可以直接参与的激活过程，对期检测点进行调控可以参与介导期相关蛋白的磷酸化可以参与的蛋白降解，在期阻滞中起到重要作用。关于信号通路是否参与了洛克米兰醇诱导肝癌细胞细胞周期阻滞还未发现相关研究。本研究发现洛克米兰醇可以激活和，并且对没有影响......”。

8、“.....同时抑制剂可以部分逆转洛克米兰醇对细胞的期阻滞效果，也可部分恢复洛克米兰肝癌细胞中洛克米兰醇的抗增殖作用及其机制探究肿瘤细胞论文数生长期细胞，以每孔个细胞接种于激光共聚焦平皿中，培养后，给药组分别给予的洛克米兰醇，药物孵育后，加入终浓度为溶液，与药物继续共同孵育。弃培养基清洗细胞次，将未渗入的洗脱掉。按照试剂盒操作固定细胞并染色，将激光共聚焦平皿臵于激光共聚焦显微镜下，以激发波长，发射波长拍照，被标记的细胞为红色，未标记的细胞为蓝色。用软件统计被标记的细胞数目。染色按照试剂盒的说明将细胞标记，将标记了的细胞混匀臵于孔板中，每孔个细胞，培养后给药组分别给予终浓度为的洛克米兰醇。药物孵育后收集细胞。将细胞上清液收集于离心管中，用冷的洗涤细胞次......”。

9、“.....用软件处理结的细胞表示总的细胞。图片重叠后粉色的细胞表示处于增殖状态的细胞。使用软件处理统计后发现，对照组的细胞增殖率为。给予洛克米兰醇后各组的细胞增殖率分别为。与对照组比较，随着洛克米兰醇作用于细胞的药物浓度的增加，增殖细胞的比例逐渐减少，差异显著。标记细胞的荧光非常均匀和稳定，每分裂次子代细胞的荧光会减弱半，细胞分裂次数越多，平均荧光强度越低。实验结果如图所示，洛克米兰醇在的平均荧光强度为对照组的倍。与对照组比较，随着洛克米兰醇作用于细胞的药物浓度的增加，平均荧光强度逐渐增加，差异显著。细胞克隆形成实验是评价药物敏感性的金标准。实验结果如图所示，洛克米兰醇在剂量下细胞的克隆形成率分别为洛克米兰醇可显著抑制致癌基因的表达从而诱导恶性白血病细胞凋亡......”。