平出现明显波动，小鼠骨髓巨核细胞计数较对照组显著增加。与对照组比较，清除后，组小肠隐窝缩短，阳性隐窝细胞减少，等肠干细胞相关基因水平显著下降，肠隐窝形成类器官能力降低。放射损伤后，组小鼠存活时间较对照组显著缩短，同时骨髓和小肠再生速度减缓。放射损伤后，枸橼酸盐缓冲液煮沸进行抗原修复。含的抗体封闭液室温条件下封闭后，滴加或工作液∶，冰箱孵育过夜。清洗次后滴加标记抗工作液，室温孵育后，洗去未结合抗，显色并复染胞核，中性树胶封片。定量检测取材的各组小肠组织经液氮速冻后保存于冰箱。使用提取总，经测定浓度与纯度。使用公司进行反转录，获取。所用引物由华大生物合成，引物序列见表。使用配制肠道菌群对小鼠放射敏感组织稳态维持的影响实验医学论文力明显降低。图清除肠道菌群对小鼠肠道形态和干细胞的影响与对照组比较染色观察肠隐窝深度免疫组化染色观察小肠阳性表达检测相关基因的表达图抗生素处理后组肠隐窝形成类器官能力显著降低光镜观察培养两组肠类器官形态两组肠隐窝形成类器官数量，与对照组比较清除肠道菌群导致放射损伤小鼠存活时间缩短并抑制骨髓造血功能重建全身放射损伤后，组照后存活时间较对照组明显缩短，图。骨髓染色发现照射后，组骨髓空虚现象较对照组更加严重，而照射后，对照组骨髓中有核细胞数量有所恢复，但组骨髓中有核细胞仍很少，且可见含有大量红细胞的照试剂盒操作说明进行。免疫组化染色使用枸橼酸盐缓冲液煮沸进行抗原修复。含的抗体封闭液室温条件下封闭后，滴加或工作液∶，冰箱孵育过夜。清洗次后滴加标记抗工作液，室温孵育后，洗去未结合抗，显色并复染胞核，中性树胶封片。表检测所用引物序列图饮用抗生素后组小鼠外周血指标动态变化与比较白细胞水平红细胞水平血红蛋白含量血小板水平图饮用抗生素后组小鼠骨髓染色骨髓染色红色箭头示巨核细胞组巨核细胞计数，与对照组比较清除肠道菌群导致小鼠肠干细胞活性降低抗生素处理理功能维持和疾病演变过程中发挥着重要作用。肠道菌群可参与阿尔茨海默病哮喘糖尿病和肿瘤等多种疾病的发生发展过程例如清除肠道菌群可抑制阿霉素等化疗药物所致肠道损伤中白细胞的浸润速度。此外，通过益生菌等手段恢复和重建正常的肠道菌群组成，对多种慢性疾病显示出良好的治疗效果。定量检测取材的各组小肠组织经液氮速冻后保存于冰箱。使用提取总，经测定浓度与纯度。使用公司进行反转录，获取。所用引物由华大生物合成，引物序列见表。使用摘要目的探讨肠道菌群对小鼠骨髓造血和肠上皮稳态维持及放射损伤修复的影响。方法周龄小鼠分为组组饮用抗生素，饮水清除对照组给予正常饮水。测定实验后小鼠体质量等基础状况改变。检测外周血和骨髓染色评估清除对骨髓造血稳态维持的影响染色免疫组化类器官培养等方法评估清除对肠道干细胞稳态的影响。全身照射小鼠后，取材小肠，通过形态学和组织染色评估清除对小鼠全身放射损伤后骨髓造血和肠道再生修复过程的影响。结果清除后，组小鼠体质量较对照组显著降低外周血中白细胞红细胞血红蛋白和血小板水平出现明显波动，小鼠骨髓巨核细胞受照前骨髓造血功能和肠干细胞增殖活性已受到抑制第，放射损伤后造血和肠道再生过程需要肠道菌群来源的些刺激分子。本研究结果提示应进步优化放射损伤患者临床救治过程中的抗生素使用方案，避免长期过量使用抗生素而延缓肠道菌群对造血和肠道再生的促进作用，通过合理补充适当菌株重建肠道微生态可有助于放射损伤后骨髓造血和肠上皮屏障的重建。本研究结果显示清除肠道菌群可引起放射损伤后杯状细胞和内分泌肠上皮细胞数量发生显著改变，由于信号通路主要调控肠干细胞向分泌系肠上皮细胞分化，所以肠道菌群代谢物可能对通路中的相关分子具有调控作用。此外，内分泌肠上皮细胞可通过去分化机制促进受损肠干细胞的再生，清除肠道菌群胃肠道在内的辐射敏感组织发生放射损伤，研究肠道菌群对放射损伤前后骨髓造血功能和肠上皮屏障功能的影响，将有助于进步阐明放射敏感组织稳态维持和再生修复的调控机制和发掘放射损伤救治的新靶点。本研究结果表明饮用抗生素清除肠道菌群可致小鼠体质量明显下降，抗生素处理后，小鼠外周血白细胞显著低于正常水平，与临床报道长期服用抗生素可引发骨髓抑制相吻合，但直接将抗生素作用于造血干细胞并不能导致其出现相应改变，。因此，服用抗生素引起骨髓造血功能改变的根本原因在于清除了肠道菌群并降低血循环中肠道菌群代谢产物的浓度。值得注意的是，清除肠道菌群过程中白细胞红细胞血红蛋白和血小板水平并非持续降低或升高，而是具有定的时相性，提示使公司。胎牛血清购自以色列公司。肠类器官培养所使用基质胶为，购自美国公司。大鼠抗抗体和兔抗抗体购自美国公司，标记山羊抗购自碧云天公司，显色试剂盒购自北京中杉公司，阿尔新兰购自美国公司。使用辐照仪对实验小鼠进行全身照射，照射剂量为。抗生素饮水配制及饮用按下列浓度配制抗生素饮水氨苄西林，万古霉素，甲硝唑，新霉素，充分溶解混匀。为了减轻小鼠的饮水抗拒，在饮水中加入蔗糖改善抗生素饮水口感。实验分组组小鼠饮用抗生素饮水，对照组小鼠饮用正常饮水观测小鼠的平均饮水再生过程需要肠道菌群来源的些刺激分子。本研究结果提示应进步优化放射损伤患者临床救治过程中的抗生素使用方案，避免长期过量使用抗生素而延缓肠道菌群对造血和肠道再生的促进作用，通过合理补充适当菌株重建肠道微生态可有助于放射损伤后骨髓造血和肠上皮屏障的重建。本研究结果显示清除肠道菌群可引起放射损伤后杯状细胞和内分泌肠上皮细胞数量发生显著改变，由于信号通路主要调控肠干细胞向分泌系肠上皮细胞分化，所以肠道菌群代谢物可能对通路中的相关分子具有调控作用。此外，内分泌肠上皮细胞可通过去分化机制促进受损肠干细胞的再生，清除肠道菌群后肠隐窝中内分泌上皮细胞的减少可能是放射损伤后肠道再生受抑制的另原因。综肠道菌群对小鼠放射敏感组织稳态维持的影响实验医学论文后肠隐窝中内分泌上皮细胞的减少可能是放射损伤后肠道再生受抑制的另原因。综上所述，本研究发现肠道菌群可影响小鼠骨髓造血和肠上皮稳态维持及放射损伤后的再生修复。该研究为深入理解骨髓造血调控和肠上皮稳态维持以及再生修复机制提供了新的实验证据，有助于进步优化放射损伤和盆腹部放疗患者的抗生素使用方案。参考文献徐珍妮，欧静，王钰，等肺腺癌对小鼠肠道干细胞及其微环境的影响第军医大学学报，徐珍妮，欧静，黄灵潇，雷旭丹，王锋超，王军平，粟永萍，王钰，刘登群肠道菌群对小鼠放射敏感组织稳态维持和再生修复的影响第军医大学学报，基金国家自然科学基金面上项目川省科技厅应用基础研究计划川省肿瘤医院研究课题群及其代谢产物可通过样受体和等分子刺激潘氏细胞分泌溶菌酶，从而调控肠黏膜天然免疫功能，潘氏细胞还可分泌等生长因子来维持肠干细胞更新和分化。本研究发现清除肠道菌群可引起潘氏细胞和基因表达下调，潘氏细胞分泌功能降低可造成维持肠干细胞所需各类生长因子含量减少，进而引起肠道增殖能力和类器官形成能力下降。本研究证实肠道菌群可通过其代谢产物直接作用于上皮来源肠干细胞微环境，为深入研究肠干细胞微环境调控提供了新线索。本研究结果显示清除肠道菌群可导致放射损伤后小鼠存活时间显著缩短，同时骨髓和肠道再生速度显著降低，其可能原因主要包括两点第，清除肠道菌群的小鼠在。目前国内外尚无肠道菌群对巨核细胞和血小板调控的研究报道，本研究证实清除肠道菌群后可导致血小板和巨核细胞显著增多，由于巨核细胞可促进造血干细胞再生，提示今后可从肠道菌群代谢产物中筛选促进放射损伤造血重建的新化合物。肠干细胞微环境由上皮细胞主要是潘氏细胞和间质细胞主要是巨噬细胞组成。已发现肠道菌群可通过释放和代谢分子影响肠道巨噬细胞活性，结肠可通过形成隐窝结构避免肠道菌群产生的丁酸盐对肠干细胞造成的损伤，但肠道菌群是否影响潘氏细胞而改变肠干细胞活性，目前尚不清楚。潘氏细胞在肠道免疫和肠干细胞稳态调控中发挥着重要作用。例如肠道菌群及其代谢产物可通过样受体和等分子刺激潘氏细胞分泌用抗生素研究肠道菌群对机体的作用时，需仔细考虑观察时相点对实验结果的影响。目前国内外尚无肠道菌群对巨核细胞和血小板调控的研究报道，本研究证实清除肠道菌群后可导致血小板和巨核细胞显著增多，由于巨核细胞可促进造血干细胞再生，提示今后可从肠道菌群代谢产物中筛选促进放射损伤造血重建的新化合物。肠干细胞微环境由上皮细胞主要是潘氏细胞和间质细胞主要是巨噬细胞组成。已发现肠道菌群可通过释放和代谢分子影响肠道巨噬细胞活性，结肠可通过形成隐窝结构避免肠道菌群产生的丁酸盐对肠干细胞造成的损伤，但肠道菌群是否影响潘氏细胞而改变肠干细胞活性，目前尚不清楚。潘氏细胞在肠道免疫和肠干细胞稳态调控中发挥着重要作用。例如肠道量，在第天时将组抗生素饮水更换为正常饮水。肠道菌群对小鼠放射敏感组织稳态维持的影响实验医学论文。图放射损伤后两组杯状细胞和内分泌肠上皮细胞形态及数量图放射损伤后两组杯状细胞和内分泌肠上皮细胞形态及数量下载原图，与对照组比较阿尔新兰染色观察小肠杯状细胞形态两组肠绒毛中杯状细胞数比较免