于对照组，骨髓间充质干细胞组大鼠的视网膜中和蛋白表达量高于青光眼模型组。因此，骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植能治疗大鼠青光眼，可以保护视网膜神经节细胞。综上所述，骨髓间充质干细胞的玻璃体腔移植可以在体内抑制视网膜神经节细胞凋亡，对视网膜神经节细胞具有保护作用，其中间充质干细胞分泌多种细胞因子和生长因子，在青光眼病理过程中对神经节细胞的保护起关键作用。参考文献王霞，刘瀛，刘旭，等诱导多功能干细骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植对青光眼的作用眼科疾病论文对青光眼大鼠模型有保护作用，我们先提取了大鼠原代骨髓间充质干细胞并进行了鉴定，得到纯度高的骨髓间充质干细胞。接着，我们制作了大鼠青光眼模型，并检测了大鼠眼内压，结果表明青光眼大鼠模型均建造成功。为了进步探究骨髓间充质干细胞经玻璃体腔移植后的作用，进行了如下实验染色结果表明，对照组大鼠视网膜神经纤维排列整齐，视网膜神经节细胞数量多，视网膜厚度正常，青光眼组大鼠视网膜神经纤维排列不整齐，视网膜神经节细胞数量明显减少，视网膜厚度变薄，骨髓间充别为，差异有统计学意义，。对照组大鼠视网膜神经纤维排列整齐，视网膜神经节细胞数量多，视网膜厚度正常与对照组比较，青光眼模型组大鼠视网膜神经纤维排列不整齐，视网膜神经节细胞数量明显减少，视网膜厚度变薄骨髓间充质干细胞组大鼠视网膜神经纤维细胞排列较整齐，视网膜神经节细胞数量和视网膜厚度高于青光眼模型组。图染色观察各组大鼠视网膜厚度变化表对照眼和实验眼术后第的眼内压径，经过个激光脉。在第测双眼眼内压，实验眼内压比对照眼内压大于为青光眼模型制作成功。对照组只麻醉大鼠，不进行手术。动物实验设计计划严格经过成都市第人民医院伦理委员会审查。视网膜神经节细胞凋亡如图所示，对照组青光眼模型组骨髓间充质干细胞组大鼠视网膜神经节细胞凋亡数量分别为个，差异有统计学意义，。青光眼组大鼠视网膜神经节细胞凋亡数量显著高于对照组，骨髓间充质干细胞组大鼠的视网膜神经流式细胞术在第代后，收获骨髓间充质干细胞。每细胞悬液中加入抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体，室温避光孵育后，离心，弃去上清液。清洗细胞后加入培养基重悬细胞，使用仪器进行流式细胞术分析。用软件分析数据。动物分组及给药将只大鼠饲养在有锯屑垫料的标准塑料笼中，室内温度为，动物可以不受限制地获得食物和水，保持光照黑暗循环，心，弃上清。培养基重悬细胞，将悬液加入到装有等体积分离液的离心管中，用吸管吹打成细胞悬液离心。吸取中间骨髓基质细胞层白色混浊状，培养基洗次。用含胎牛血清青霉素链霉素的培养基重悬。以接种于细胞培养瓶中，置于的培养箱中培养。后弃去培养基，溶液冲洗次去除未贴壁细胞，加入完全培养基继续培养。以后每换液次，以保证细胞所需的营养成分，并于倒置显微镜下观察细胞，∶脑源性神经营养因子，∶和∶抗，摇床上孵育过夜。洗膜次，每次，加入对应于抗种属来源的标记的抗∶，在室温摇床上孵育，洗膜次，每次。使用化学发光液显色发光，凝胶成像系统拍照，图像分析系统对蛋白条带进行分析。统计学分析采用统计学软件，至少取次独立实验结果，以平均值溶液冲洗次去除未贴壁细胞，加入完全培养基继续培养。以后每换液次，以保证细胞所需的营养成分，并于倒置显微镜下观察细胞生长的形态变化。骨髓间充质干细胞的体外分化对于成骨分化，将骨髓间充质干细胞在含有地塞米松，血酸磷酸和甘油磷酸酯的完全培养基中培养，进行成骨分化。通过用茜素红染色评估。对于成脂分化，通过在含有嘌呤，地塞米松，胰岛素和吲哚美辛的完全培养基中培养骨髓间充质干细胞，进购自北京中杉金桥公司。裂解液购自北京索莱宝公司。抗体抗体抗体和山羊抗兔鼠抗购自美国公司。膜购自美国公司。方法细胞培养取只雄性大鼠，采用麻醉处死，立即用乙醇浸泡，移入超净工作台内，固定大鼠肢于工作台面的泡沫板上。酒精棉球擦拭，无菌条件下用灭菌消毒后的镊子和剪刀分离出大鼠股骨，剔除骨头表面肌肉，溶液冲洗两遍。将骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植对青光眼的作用眼科疾病论文长的形态变化。骨髓间充质干细胞的体外分化对于成骨分化，将骨髓间充质干细胞在含有地塞米松，血酸磷酸和甘油磷酸酯的完全培养基中培养，进行成骨分化。通过用茜素红染色评估。对于成脂分化，通过在含有嘌呤，地塞米松，胰岛素和吲哚美辛的完全培养基中培养骨髓间充质干细胞，进行脂肪形成分化。通过用油红染色细胞内脂滴来显示脂肪形成分化。骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植对青光眼的作用眼科疾病论文公司。膜购自美国公司。方法细胞培养取只雄性大鼠，采用麻醉处死，立即用乙醇浸泡，移入超净工作台内，固定大鼠肢于工作台面的泡沫板上。酒精棉球擦拭，无菌条件下用灭菌消毒后的镊子和剪刀分离出大鼠股骨，剔除骨头表面肌肉，溶液冲洗两遍。将股骨两端剪断，用无菌注射器吸取培养基冲出股骨中的骨髓于离心管中，反复冲洗几次。将冲出的骨髓吹打成悬液，重悬细胞，使用仪器进行流式细胞术分析。用软件分析数据。动物分组及给药将只大鼠饲养在有锯屑垫料的标准塑料笼中，室内温度为，动物可以不受限制地获得食物和水，保持光照黑暗循环，并且在实验之前使大鼠适应环境至少。将大鼠分别随机分为组对照组建模后第向玻璃体腔内注射溶液青光眼模型组建模后第向玻璃体腔内注射溶液骨髓间充质干细胞组在建模后第向玻璃体腔标准差表示，重复测量实验采用重复测量数据的方差分析，多组间数据比较采用单因素方差分析，两组间的两两比较采用检验，率的比较采用χ检验。表示差异有统计学意义。结果骨髓间充质干细胞的形态如图所示，原代培养第出现小集落，细胞形状为类圆形传至第代时，细胞呈现出大的，扁平的或成纤维细胞样的形态。试剂盒购自北京中杉金桥公司。裂解液购自北京索莱宝公司。抗体抗体抗体和山羊抗兔鼠抗购自美脂肪形成分化。通过用油红染色细胞内脂滴来显示脂肪形成分化。骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植对青光眼的作用眼科疾病论文。图骨髓间充质干细胞形态图骨髓间充质干细胞的体外分化图流式细胞术检测的免疫表型特征视网膜组织中加入制备好的裂解液提取蛋白，用法测定总蛋白含量。用凝胶分离蛋白质并转移到膜上。用含有脱脂牛奶的封闭膜，之后加入稀释后的胰岛素样生长因子骨两端剪断，用无菌注射器吸取培养基冲出股骨中的骨髓于离心管中，反复冲洗几次。将冲出的骨髓吹打成悬液，离心，弃上清。培养基重悬细胞，将悬液加入到装有等体积分离液的离心管中，用吸管吹打成细胞悬液离心。吸取中间骨髓基质细胞层白色混浊状，培养基洗次。用含胎牛血清青霉素链霉素的培养基重悬。以接种于细胞培养瓶中，置于的培养箱中培养。后弃去培养基，注射骨髓间充质干细胞悬浮液含有个细胞，连续给药。模型制作按照文献进行青光眼模型制作。大鼠经戊巴比妥钠全身麻醉，将每只大鼠的左眼为实验眼青光眼，右眼为对照眼。实验前测量每只眼的眼内压，在裂隙灯下，从极管激光器向左眼施加脉冲直径，经过个激光脉。在第测双眼眼内压，实验眼内压比对照眼内压大于为青光眼模型制作成功。对照组只麻醉大鼠，不进行手术。动物实验设计计划严格经过成都市第人民医院伦理委员会审查。试剂盒骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植对青光眼的作用眼科疾病论文异有统计学意义，均。青光眼模型组大鼠视网膜中和蛋白表达量明显低于对照组均，骨髓间充质干细胞组大鼠视网膜中和蛋白表达量高于青光眼模型组均。流式细胞术在第代后，收获骨髓间充质干细胞。每细胞悬液中加入抗体抗体抗体抗体抗体抗体抗体，室温避光孵育后，离心，弃去上清液。清洗细胞后加入培养量明显减少，视网膜厚度变薄骨髓间充质干细胞组大鼠视网膜神经纤维细胞排列较整齐，视网膜神经节细胞数量和视网膜厚度高于青光眼模型组。图染色观察各组大鼠视网膜厚度变化表对照眼和实验眼术后第的眼内压，视网膜神经节细胞计数如图所示，对照组青光眼模型组骨髓间充质干细胞组大鼠视网膜神经节细胞数量分别为个，差异有统计学意义，。青光眼模型组大鼠视网膜神经节细胞数量明显在青光眼治疗中的应用研究进展眼科新进展肖婷婷，石珂，廖振忠，等临床抗青光眼药物的新进展眼科新进展黄庆雷，沈丽，邓钺间充质干细胞作用机制的研究进展中国科学生命科学李季，蔡锦芳，邹林，等骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤模型大鼠样受体表达的影响中国老年学杂志田源，张殷建，董志国青光眼视神经保护相关研究进展临床眼科杂志顾志敏，周利晓，齐若视网膜干细胞移植对青光眼视网膜神经节细胞的保护中国组织工程研究高坤，朱文秀，刘伟东，等再生医学干细胞组大鼠视网膜神经纤维细胞排列较整齐，视网膜神经节细胞数量和视网膜厚度明显高于青光眼组视网膜神经节计数结果表明，青光眼模型组大鼠视网膜神经节细胞数量明显低于对照组，骨髓间充质干细胞组大鼠的视网膜神经节细胞数量明显高于青光眼组，但低于对照组染色结果表明，青光眼模型组大鼠视网膜神经节细胞凋亡数量显著高于对照组，骨髓间充质干细胞组大鼠的视网膜神经节细胞凋亡数量明显低于青光眼模型组结果表明，青光眼模型组大鼠视网膜神经节细胞计数如图所示，对照组青光眼模型组骨髓间充质干细