1、“.....并以平均值标准差表示。当试验组平均每孔中的回复菌落数溶媒对照组数值倍，且存在量效关系时判断结果为阳性反之为阴性。基因突变试验试验数据采用，公司进行数风险评价中国药物警戒，基金国家自然科学基金资助项目国家十重大新药创制专项。大黄素型单蒽酮潜在遗传毒性致基因突变分析中药学论文。数据处理菌落计数及结果判定计数每孔中的回复菌落数量，每个浓度组分别求得均值，并以平均值标准差表示。当试验组平均每孔中的回复菌落数溶媒对照组数值倍，且存在量效关系时判断结果为阳性反之为阴性。基因突变试验试验数据采用，公司进行数据统计，采用检验将各受试物处理组的突变率与溶媒对照组作比较，组间比较视为差异存在统计学意义。当前有关单蒽酮大黄素型单蒽酮潜在遗传毒性致基因突变分析中药学论文示在非代谢活化状态下可引起试验反应阳性以及基因发生突变......”。

2、“.....而经代谢后显示基因突变试验为阴性结果，而试验体系中仅有菌株呈现出突变菌落数明显增加，判断其原因可能是菌株阴性对照组自身生长菌落极少，当受试物给药组出现部分细菌菌落时，极小的差异则会呈现出极大的倍数统计上的差异，存在假阳性的可能性增大。综上，本研究从和体外哺乳动物小鼠淋巴瘤细胞细胞开展大黄素型单蒽酮基因突变风险评价，提示大黄素型单蒽酮原型药物存在致基因突变风险，而其代谢产物安全性存在定的可疑性，后续可针对不同代谢活化状态下的大黄素型单导化合物筛选的首选遗传毒性评价方法，是基于细菌体系评价物质致基因突变的最重要的试验方法之，在药品食品化妆品医疗器械等物质遗传毒性评价中均是组合必选试验之。是在标准平板基础上采用孔板或孔板代替标准平板开展受试物遗传毒性评价......”。

3、“.....研究结果显示非代谢状态下单蒽酮可诱导两种菌株发生基因突变，代谢状态下单蒽酮可诱导菌株发生基因突变，和两种菌株检测的突变类型相同，均为移码型突变，根据本研究中受试物致菌株突变的敏感性可初步推断大黄素型单蒽酮的致突变特点，代谢活化状态下单蒽酮所设浓度组均分布于左右，提示本研究受试物在给药浓度范围内均未见明显细胞毒性作用，排除试验中假阳性结果。基因突变频率单蒽酮对细胞体外基因突变率的影响图。非代谢活化条件下，单蒽酮浓度大于，基因突变率与溶媒对照组相比，存在显著性差异且呈浓度递增趋势代谢活化条件下，单蒽酮各浓度组基因突变率与溶媒对照组相比，不存在显著性差异，且无浓度梯度关系。讨论大黄素型单蒽酮母核结构与蒽醌结构相似，世界卫生组织国际癌症研究机构，于方法细菌回复突变试验试验流程......”。

4、“.....。细菌冻融液与营养肉汤混合后臵于水浴摇床在条件下扩增，扩增后使用酶标仪对光密度进行检测，估算活菌浓度达到个后用于试验。试验平行设臵溶媒对照组，单蒽酮皿分别在有和无代谢活化条件下开展，每组平行皿孔。所有样本臵培养约后进行菌落计数。上述试验共重复次。细胞给药处理预试验对细胞毒性进行摸索，研究显示当单蒽酮浓度大于时都呈现出较大的细胞毒性，出现严重的细胞死亡现象，故最终确定试验用浓度为作用时间。结果试验结果试验使用种不同鼠伤寒沙，葡萄糖磷酸烟酰胺腺嘌呤核苷酸磷酸钠，青链霉素混合液批号，甲基磺酸乙酯苯并芘，购自，阳性对照叠氮钠，购自氨基吖啶，购自。其他试剂包括营养肉汤购自琼脂粉氨苄青霉素葡萄糖组氨酸色氨酸生物素柠檬酸钠均购自大鼠肝混合液由苯巴苷酸磷酸钠，青链霉素混合液批号......”。

5、“.....购自，阳性对照叠氮钠，购自氨基吖啶，购自。其他试剂包括营养肉汤购自琼脂粉氨苄青霉素葡萄糖组氨酸色氨酸生物素柠檬酸钠均购自大鼠肝混合液由苯巴比妥钠和萘黄酮联合诱导大鼠肝脏制成购自北京康瑞杰科技有限公司。培养基购自时珍国医国药，李翠丽，马江，李会军蒽醌类化合物的吸收和代谢研究进展药物生物技术，文海若，王亚楠，杨莹，赵婷婷，马双成，汪祺大黄素型单蒽酮基因突变风险评价中国药物警戒，基金国家自然科学基金资助项目国家十重大新药创制专项。大黄素型单蒽酮潜在遗传毒性致基因突变分析中药学论文。方法细菌回复突变试验试验流程，底层琼脂磷酸盐缓冲液顶层琼脂及混合液等配制方法参考课题组前期已对该方法进行的可行性研究，。细菌冻融液与营养肉汤混合后臵于水浴摇床在条件下扩增，扩增后使用酶标仪对光密度进行检测，估算活菌浓度达到个后用于试验......”。

6、“.....单蒽酮皿代谢活化状态下与溶媒对照组相比无显著性差异，本研究采用的代谢活化系统为相反应启动剂与肝微粒体酶相互作用发生相氧化反应还原反应水解反应。两项研究都显示在非代谢活化状态下可引起试验反应阳性以及基因发生突变。提示大黄素型单蒽酮单体原形存在致基因突变风险，而经代谢后显示基因突变试验为阴性结果，而试验体系中仅有菌株呈现出突变菌落数明显增加，判断其原因可能是菌株阴性对照组自身生长菌落极少，当受试物给药组出现部分细菌菌落时，极小的差异则会呈现出极大的倍数统计上的差异，存在假阳性的可能性增大。综上，本研究从和体外哺乳动物小鼠淋巴瘤细胞细胞开展大黄大黄素型单蒽酮潜在遗传毒性致基因突变分析中药学论文妥钠和萘黄酮联合诱导大鼠肝脏制成购自北京康瑞杰科技有限公司。培养基购自马血清购自购自......”。

7、“.....洋倒臵显微镜免疫磁性分离架，胞重悬于完全培养基，给药后后作细胞计数，将细胞密度维持为个细胞表达。代谢活化条件。细胞达对数生长期后，更换培养基含有青链霉素混合液，并添加不同浓度的单蒽酮和，调整细胞密度为个细胞于离心管中。臵于气浴摇床中振摇。大黄素型单蒽酮潜在遗传毒性致基因突变分析中药学论文。试剂与仪器试剂主要包括大黄素型单蒽酮中国医学科学院药物研究所杨建波博士赠送，纯度阴性对照甲基亚砜，阳性对照呋喃基硝基呋喃基丙烯酰胺氨基蒽体经不同代谢反应后在发挥药效的同时其代谢产物的毒性作用也有定差异。试验作为遗传毒性数据库如，构建的基础以及新药研发初期先导化合物筛选的首选遗传毒性评价方法，是基于细菌体系评价物质致基因突变的最重要的试验方法之......”。

8、“.....是在标准平板基础上采用孔板或孔板代替标准平板开展受试物遗传毒性评价。本研究采用鼠伤寒沙门氏菌和大肠杆菌分别在两种代谢状态下进行研究，研究结果显示非代谢状态下单蒽酮可诱导两种菌株发生基因突变，代谢状态下单蒽酮可诱导马血清购自购自。仪器流式细胞仪高速冷冻离心机倒臵荧光显微镜氧化碳培养箱生物安全柜恒温培养箱，洋倒臵显微镜免疫磁性分离架，。处理结束后收集细胞并计数，细胞经离心室温后，使用洗涤次。将分别在有和无代谢活化条件下开展，每组平行皿孔。所有样本臵培养约后进行菌落计数。上述试验共重复次。细胞给药处理预试验对细胞毒性进行摸索，研究显示当单蒽酮浓度大于时都呈现出较大的细胞毒性，出现严重的细胞死亡现象，故最终确定试验用浓度为作用时间。试剂与仪器试剂主要包括大黄素型单蒽酮中国医学科学院药物研究所杨建波博士赠送......”。

9、“.....葡萄糖磷酸烟酰胺腺嘌呤型单蒽酮基因突变风险评价，提示大黄素型单蒽酮原型药物存在致基因突变风险，而其代谢产物安全性存在定的可疑性，后续可针对不同代谢活化状态下的大黄素型单蒽酮的毒性风险开展研究。参考文献汪祺，戴忠，张玉杰，等何首乌中蒽酮类成分肝毒性研究药物分析杂志，杨建波何首乌肝毒性和茶芎活性成分以及质量分析方法的研究北京中医药大学，颜玉静，文海若，淡墨，等种何首乌单体成分对大鼠肝损伤作用的研究中国现代中药，胡燕平，宋捷，李波细菌回复突变试验背景数据的采集中国新药杂志，文海若，宋捷，鄂蕊，等微孔板与标准平皿试验比较研究药物评价研究，王平，孟宪丽，王进荣，等种大黄游离蒽醌大鼠在体肠吸收的单向灌流法研究株发生基因突变，和两种菌株检测的突变类型相同，均为移码型突变......”。