1、“.....个绵羊类群中各生长性状不同基因型之间最小二乘均值差异不显著。表各因素效应对绵羊生长性状的关联分析生长性状品种基因型品种基因型体重体长体高胸围胸深表各绵羊群体基因与生长性状的相关分析体重体长体高胸围胸深欧拉羊陶塞特德美小尾寒羊第四部分分析与讨论血样的采集及的提取本试验提取所使用的材料为血液,采集过程中,定将抗凝剂与血样混匀后保存,以防血液凝集成块影响的提取......”。
2、“.....经过多人的验证,该方法是可行的。该方法的优越性在于步骤简单提取的时间短不需要蛋白酶消化。但在提取过程中要注意以下三点在加入核裂解液之后要轻轻颠倒混匀,以防断裂吸上清时尽量小心,避免吸入未消化完全的蛋白质,保证的纯度在吸取上清液时,要剪枪头,避免因枪头太小而造成的断裂。分析的影响因素在基因突变的分析中起着重要的作用,是现代遗传学研究中对已知基因突变检测和未知基因突变筛查的种有用的工具。方法具有灵敏度高分析简单等特点,因此......”。
3、“.....但很多因素会影响到分析的最佳效果,例如产物的大小纯度和浓度聚丙烯酰胺凝胶的制备,电泳的电压和温度等。在试验中为了得到最佳效果应注意以下几个方面产物的长度产物的长度也是影响分析的主要因素之。理论上可检测出序列中所有碱基的突变位点,实际上的检出率与片段长度有关。有资料表明,用于分析的片段较小时,检测敏感性相应较高。和等认为对于分析小于的序列是行之有效的。现有资料分析表明,片段在时,检出率约为当片段为时,则其检测率约为......”。
4、“.....则其检出率约为。因此设计引物时,在之间较好。本试验中设计的引物在之间,适合做分析。采用合适的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,所得电泳图谱带型清晰整齐分型好,且测序结果准确率高。产物的纯度和浓度产物的纯度和浓度也影响的检测分析。若扩增时产生较多的非特异性条带,或是有较严重的拖尾现象,就会导致在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳上产生杂带,导致主带和杂带很难分清,影响带型的判断。因此在进行扩增时设计的引物要特异性强而且引物之间不能形成二聚体......”。
5、“.....因为过低的退火温度会导致非特异性产物出现和增多。本试验所设计的引物特异性强,退火温度高,扩增的产物纯度和浓度高,适合下步所需。电泳条件主要的作用是检测基因的突变,因此,条带分离效果的好坏直接影响到带型的判断。恒定的电压和电泳温度在中起着关键的作用。有资料证明在电泳过程中,温度可能对分子内部稳定力的形成及其所决定的单链构象有直接影响,高温可破坏维持构象的次级键......”。
6、“.....电泳应该在较低恒定的温度下进行,般为。电压对也有很重要的影响。电压过高,产热多,凝胶构象可能发生改变,电压过低,电泳时间长,可致使分子扩散,条带模糊。电压不但与片段大小有关,还与电泳槽的大小型号有关,可以根据这些因素进行摸索,以找到适合各引物的电压。电泳时间不宜过长,条带分开,能清晰判型为好,另外电泳时间也与电泳槽型号有关。本试验所使用的电泳槽为伯乐小型电泳槽,根据扩增产物的不同,在恒温及适宜的恒定电压下电泳小时不等......”。
7、“.....取得较好的实验结果。非变性聚丙烯酰胺凝胶制备制备合适的非变性聚丙烯酰胺凝胶是分析最关键的步,包括丙烯酰胺和,亚甲基双丙烯酰胺的交联度和凝胶浓度的筛选。李其松等认为,高浓度高交联度的凝胶中不同分子条带更易分开,条带清晰,利于判型低浓度低交联度的凝胶中,同泳道中的多个条带之间的绝对距离更远,同样利于不同基因型的判断。本试验经过反复的摸索和筛选认为,产物片段大小在时,采用的聚丙烯酰胺凝胶溶液,配制成的胶浓度,电压为时......”。
8、“.....采用的丙烯酰胺凝胶溶液,分别配制成和的胶浓度,电压为时,获得了清晰的条带。因此,在实验过程中,交联度和胶浓度的确定要经过反复的筛选才能获得很好的实验结果。对于添加甘油是否会影响检出率报道不,等认为凝胶中加入的甘油可以提高检出率,而刘佳健等则认为凝胶中不加甘油效果好。本研究中所配制的凝胶都没有加甘油,但得到的效果很好。单链的迁移速度受甘油的影响很大,但有的是促进作用,有的是阻碍作用,甘油的这机制尚无定论。因此......”。
9、“.....基因多态性及其与生长性状相关性分析单核苷酸多态标记作为种新型的分子遗传标记,越来越受到关注,已成为近年来研究的热点之,它既能被用作重要的遗传学工具,也可用于功能基因组学研究分子标记辅助选择的基础是可靠的分子标记,本研究从基因的生理生化功能出发,通过对绵羊基因和基因进行研究,并将遗传标记与绵羊生长性状进行关联分析,以期用于分子标记辅助选择......”。
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