影溶菌酶分离纯化方法的研究新进展广东药学院学报祈静溶菌酶的紫外分光光度法检测仪器仪表与分析监测常凯,邸海洋,何昭阳溶菌酶的提取及其在焙烤食品中的应用食品科技石军英,郭雄军,陈劲春鸡蛋溶菌酶生产过程活力动态监控食品科技致谢时光荏苒，如白驹过隙，转眼之间，大学生活已经步入尾声。在这四年多的日子里，收获的不仅仅是专业知识和实验技能，还有在实验进行中所培养的思维方式和广阔视野。很庆幸这些年来我遇到了许多良师诤友，无论在学习上还是生活上都给予了我无私的帮助和热心的照顾，让我在诸多方面都得以成长。在本文完成之际，特别感谢指导老师梁保红工程师从论文的立题构思实验到撰写，都倾注了老师的智慧和才能。梁老师丝不苟的指导勤奋刻苦的工作作风和积极乐观的人生态度已经并将继续对我今后的工作和生活产生深刻的影响，谨此致以诚挚的敬意和由衷的感谢。感谢赵润柱老师在实验室中给与的帮助，给我们提供了优越的硬件条件而且在他的领导下，实验室成员之间始终维持着兄弟姐妹般的融洽关系，让大家在个如家般的环境中工作学习。在实验进行期间，同实验室中的诸多同学给了我许多帮助，在此表示深深的谢意同时其他实验室的师兄弟姐妹和我起度过了人生中令人难忘的段时光，衷心感谢他们的关心和帮助。最后，感谢直以来给我无限关爱和支持的家人及亲朋好友们。董磊年月日星期六大肠杆菌金黄色葡萄球菌溶菌酶的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度液体倍比稀释法测得溶菌酶对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度，结果见表。可知，溶菌酶对两种供试菌株的和分别是大肠杆菌为和，金黄色葡萄球菌为和。表溶菌酶对不同供试菌株的和菌株溶菌酶对不同供试菌株的和大肠杆菌金黄色葡萄球菌讨论革兰氏阴性菌的细胞壁外层覆盖着大量的脂多糖，细胞表面结构的复杂性决定了细胞表面特性的差异性，如表面电荷表面疏水性以及外膜通透性等，同时也决定了细菌对抑菌剂的敏感程度。溶菌酶主要作用于细菌的肽聚糖层，由于革兰氏阴性菌的外膜脂多糖的阻碍，溶菌酶较难与肽聚糖相结合，从而使得溶菌酶的抑菌效果不明显。但是仍然有些革兰氏阴性菌对溶菌酶敏感，说明溶菌酶对革兰氏阴性菌的作用效果受到细胞的些其他特性的影响，这反映出溶菌酶抑菌机制的复杂性。存在问题由于各类溶菌酶的作用特性强，只对特定的微生物有充份的溶解作用，因此需要充分掌握溶菌酶的酶学特性在最大程度发挥溶菌酶的活力。目前溶菌酶的产量普遍较低，成本较高，导致溶菌酶的价格比较高，难以得到普遍的推广与应用，下步应着重研究摸索出利用国产廉价原料分离纯化工艺并获得廉价纯化的溶菌酶。国内企业生产的溶菌酶主要是蛋清溶菌酶，然而从生物材料提取溶菌酶有其固有缺陷受生物材料来源限制，生物材料由于取自不同生物体，保险程度不，难以保证不受病毒和其他有害物质污染，这会造成产品质量不稳定。由于革兰氏阳性菌的肽聚糖层位于细胞壁外层，因此溶菌酶对大多数革兰氏阳性菌都有较好的抑菌效果而革兰氏阴性菌的肽聚糖层位于细胞膜的中间层，其外部还有细胞外膜物质脂多糖的阻挡，使得溶菌酶难以于营养琼脂平板培养基中涂布均匀。用打孔器打出直径滤纸圆片，高压灭菌，备用。将滤纸圆片分别放入不同浓度的蛋清溶菌酶中浸泡。用无菌镊子夹取已在溶菌酶溶液中浸渍滤纸片，放在上述培养皿中，每皿五片。静置后置于恒温培养箱中培养，观察抑菌效果，测量抑菌圈直径。蛋清溶菌酶最小抑菌浓度及最小杀菌浓度的测定采用液体倍比稀释法测定最小抑菌浓度取灭菌试管支，号依次编号，于无菌操作台上。取无菌葡萄糖酚红肉汤培养基依次加入各管。然后向第管中加入浓度为的溶菌酶样品液，充分混匀后，吸出加入第管中混匀，按此法依次重复稀释至第管，第管混匀后吸出混合液弃去。再分别向管中加入测试菌液，第管中加入测试菌液作阳性对照，第管中加入浓度为溶菌酶样品液后混匀，吸出混合液弃去，不加菌液作生长对照。将支试管置于恒温培养箱中培养，取出，观察结果，以无菌生长管所含最小稀释度的溶菌酶浓度作为。最低杀菌浓度的测定从无细细菌生长的各管取少量菌液划线接种于固体营养琼脂培养基上，于培养，观察结果，以营养琼脂培养基上菌落数少于个的平板所含最小稀释度的溶菌酶浓度作为。结果与讨论蛋清溶菌酶具有胞壁质酶活性，能够通过其活性中心和作用于乙酰胞壁酸和乙酰葡萄糖胺之间的,糖苷键，从而破坏革兰氏阳性细菌表面的肽聚糖层，导致细菌瓦解。但是革兰氏阴性细菌的肽聚糖位于细胞壁结构的内层，其外侧受到外层脂多糖层的保护，溶菌酶很难直接作用于肽聚糖，但是它对于些革兰氏阴性细菌同样具有杀菌作用。因此最近的研究提出溶菌酶也存在着独立于水解酶活性的抗菌活性。此种抗菌活性是基于溶菌酶被水解酶消化水解后形成的更小分子的多肽段，此时的水解活性几近消失，但是却仍然具有抗菌活性，通过观察多肽段的结构电荷分布等研究提出，溶菌酶具有部分阳离子抗菌肽活性。不同浓度的蛋清溶菌酶对大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌的抗菌活性。结果溶菌酶对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的抗菌活性不同浓度溶菌酶对大肠杆菌及金黄色葡萄球的抑菌效果见图由图可以看出，溶菌酶对两种常见致病菌均有不同程度的抑制作用，并且随溶菌酶浓度增加，抑菌圈明显增大，抑菌效果增强。其中溶菌酶对大肠杆菌较为敏感，抑菌圈明显大于金黄色葡萄球菌。在较低浓度下，溶菌酶即可对大肠杆菌产牛抑制作用。图蛋清溶菌酶对大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的抑制表为溶菌酶对不同菌株的抑菌圈结果汇总表。由表可知，溶菌酶对两种菌株的抑菌圈直径与溶菌酶浓度呈正相关。其中，大肠杆菌对溶菌酶最为敏感，当溶菌酶浓度为时对大肠杆菌产生的抑菌圈仍很大。溶菌酶对金黄色葡萄球菌的抑制效果很微弱，浓度为时抑菌圈不明显，浓度为时抑菌圈直径约为另外两种菌的半。由此可得出，溶菌酶对大肠杆菌有良好的抑制效果，在浓度稍高时，对金黄色葡萄球菌也起定抑制作用。表溶菌酶对不同菌株抑菌结果表菌株不同浓度对致病菌抑菌圈大小,刘素英，日本食品业开发的新型防腐剂，食品科技动态，刘军，顾国维，溶菌酶在环境工程中的应用，环境保护，,,,魏祖怡，潘晓勤，母乳中溶菌酶浓度的测定，南京医学院学报，陈慧英，吴晓英，林作用选择孔口尺寸和闸墩型式及尺寸基本公式溢总总总下泄流量溢溢流孔口的下泄流量通过电站和泄水孔等下泄流量，取系数，校核情况是取校核洪水位时溢溢流坝净宽为溢单宽流量，本次设计取故溢本次设计选用平板闸门，闸门厚度最小为，取。因为本次设计属于大中型坝，故孔口宽度取为，孔口宽高比本次取，所以孔高。则孔口数为取所以溢流坝前沿总长为本次设计选用上游段为椭圆形，下游段为方形的闸墩。确定消能方式水工建筑物及混凝土重力坝设计规范可知消能的设计原则是尽量使下泄水流的大部分动能消耗在水流内部的紊动中，以及水流与空气的摩擦上不产生危及坝体安全的河床或岸坡的局部冲刷下泄水流平稳，不影响枢纽中其它建筑物的正常运转结构简单，工作可靠，工程量小。分析比较各种消能工的优缺点，考虑到本次设计的重力坝属于高坝，下游地质条件比较好的情况，决定选用挑流消能。挑流鼻坎设计挑流鼻坎有连续式和差动式，该设计选用连续式鼻坎鼻坎高程反弧半径根据实际工程情况，该设计挑射角取水舌挑距的估算根据规范，水舌挑距可按下式计算式中水舌抛距如有水流向心集中影响者，则抛距还应乘以的折减系数坎顶水面流速按鼻坎处平均流速的倍计，即为水库水位至坎顶的落差鼻坎的挑角坎顶垂直方向水深为坎顶平均水深坎顶至河床面高差如冲坑已经形成，可算至坑底堰面流速系数。可按下式计算按校核洪水位计算最大冲坑水垫厚度的计算根据规范，最大冲坑水垫厚度可按下式计算式中水垫厚度，自水面算至坑底单宽流量，上下游水位差冲刷系数，其数值见下表基岩冲刷系数值由下表可查本次设计取，则可计算得则，般要求，满足要求。五细部构造设计坝基的连接灌浆和排水天然地基，由于经受长期的地质作用，般都有风化节理裂隙等缺陷，有时还有断层破碎带和软弱夹层，所有这些都需要采取适当的处理措施，地基处理的主要任务是防渗提高基岩的强度和整体性。基岩开挖后，在浇灌混凝土前，需要进行彻底的清理和冲洗，包括清除松动的岩块，打掉突出的尖角。基坑中原有的勘探钻孔井洞等均应回填封堵。固结灌浆孔般布置在应力较大的坝踵和坝趾附近，以及节理裂隙发育和破碎带范围内。采用浅孔低压灌注法灌入水泥浆，以提高基岩的弹性模量抗渗性和强度等。在坝踵坝址附近灌注孔相对较密，呈梅花形布置，其他部位疏些。孔距排距由灌浆试验确定，般从开始，采用内插逐步加密的方法，最终约为，本设计取。孔深，必要时还可适当加深，帷幕上游区的孔深般为。钻孔方向垂直于基岩面。当存在裂隙时，为了提高灌浆效果，钻孔方向尽可能正交于主要裂隙面，但倾角不能太大。防渗帷幕布置于靠近上游面坝轴线附近，自河床向两岸延伸，钻孔和灌浆常在坝体内特设的廊道内进行，靠近岸坡处也可在坝顶岸坡或平洞内进行。平洞还可以起排水作用，有利于岸坡的稳定。钻孔方向般为铅直，必要时也可有定斜度，以便穿过主节理裂隙，但角度不宜太大，般在影溶菌酶分离纯化方法的研究新进展广东药学院学报祈静溶菌酶的紫外分光光度法检测仪器仪表与分析监测常凯,邸海洋,何昭阳溶菌酶的提取及其在焙烤食品中的应用食品科技石军英,郭雄军,陈劲春鸡蛋溶菌酶生产过程活力动态监控食品科技致谢时光荏苒，如白驹过隙，转眼之间，大学生活已经步入尾声。在这四年多的日子里，收获的不仅仅是专业知识和实验技能，还有在实验进行中所培养的思维方式和广阔视野。很庆幸这些年来我遇到了许多良师诤友，无论在学习上还是生活上都给予了我无私的帮助和热心的照顾，让我在诸多方面都得以成长。在本文完成之际，特别感谢指导老师梁保红工程师从论文的立题构思实验到撰写，都倾注了老师的智慧和才能。梁老师丝不苟的指导勤奋刻苦的工作作风和积极乐观的人生态度已经并将继续对我今后的工作和生活产生深刻的影响，谨此致以诚挚的敬意和由衷的感谢。感谢赵润柱老师在实验室中给与的帮助，给我们提供了优越的硬件条件而且在他的领导下，实验室成员之间始终维持着兄弟姐妹般的融洽关系，让大家在个如家般的环境中工作学习。在实验进行期间，同实验室中的诸多同学给了我许多帮助，在此表示深深的谢意同时其他实验室的师兄弟姐妹和我起度过了人生中令人难忘的段时光，衷心感谢他们的关心和帮助。最后，感谢直以来给我无限关爱和支持的家人及亲朋好友们。董磊年月日星期六大肠杆菌金黄色葡萄球菌溶菌酶的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度液体倍比稀释法测得溶菌酶对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度，结果见表。可知，溶菌酶对两种供试菌株的和分别是大肠杆菌为和，金黄色葡萄球菌为和。表溶菌酶对不同供试菌株的和菌株溶菌酶对不同供试菌株的和大肠杆菌金黄色葡萄球菌讨论革兰氏阴性菌的细胞壁外层覆盖着大量的脂多糖，细胞表面结构的复杂性决定了细胞表面特性的差异性，如表面电荷表面疏水性以及外膜通透性等，同时也决定了细菌对抑菌剂的敏感程度。溶菌酶主要作用于细菌的肽聚糖层，由于革兰氏阴性菌的外膜脂多糖的阻碍，溶菌酶较难与肽聚糖相结合，从而使得溶菌酶的抑菌效果不明显。但是仍然有些革兰氏阴性菌对溶菌酶敏感，说明溶菌酶对革兰氏阴性菌的作用效果受到细胞的些其他特性的影响，这反映出溶菌酶抑菌机制的复杂性。存在问题由于各类溶菌酶的作用特性强，只对特定的微生物有充份的溶解作用，因此需要充分掌握溶菌酶的酶学特性在最大程度发挥溶菌酶的活力。目前溶菌酶的产量普遍较低，成本较高，导致溶菌酶的价格比较高，难以得到普遍的推广与应用，下步应着重研究摸索出利用国产廉价原料分离纯化工艺并获得廉价纯化的溶菌酶。国内企业生产的溶菌酶主要是蛋清溶菌酶，然而从生物材料提取溶菌酶有其固有缺陷受生物材料来源限制，生物材料由于取自不同生物体，保险程度不，难以保证不受病毒和其他有害物质污染，这会造成产品质量不稳定。由于革兰氏阳性菌的肽聚糖层位于细胞壁外层，因此溶菌酶对大多数革兰氏阳性菌都有较好的抑菌效果而革兰氏阴性菌的肽聚糖层位于细胞膜的中间层，其外部还有细胞外膜物质脂多糖的阻挡，使得溶菌酶难以