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然后冷却至时倒平板制成固体培养基。
在洁净工作台中,移取菌液逐级稀释至,分别涂于固体培养基上,然后放入盒中置于恒温培养箱中培养。
天后,培养基上会出现粘稠状白色菌落,然后挑取单菌落接种于液体培养基中,再次进行富集培养。
通过这样反复多次的培养,即可分离出较纯的假单胞菌。
腐蚀样品挂样用的量筒量取的陈海水,倒入三口烧瓶中,用橡皮塞子封口。
重复此操作,配置成瓶海水培养基。
将配置的海水培养基用牛皮纸包好瓶口,放入的高温灭菌锅中灭菌,再用紫外灯灭菌,然后放入无菌室中冷却至室温。
在超净工作台中,移取假单胞菌液注入烧瓶中,并将工作电极从侧口插入烧瓶,用石蜡封口,然后用牛皮纸将烧瓶瓶口封好。
此步操作均在酒精灯附近进行,避免杂菌对样品的污染。
挂样完成后的实验样品从无菌室中移出,放入个大的塑料箱中,以备电化学测试之用。
注上述第三第四步的操作需要手带次性手套完成,并用灭菌液进行灭菌,方可进行操作,以避免杂菌对样品的污染。
测试及分析方法假单胞菌生长曲线测定将假单胞菌接种到海水中,经过短暂的休整之后,开始以二分裂法繁殖,分裂后的子细胞都具有生活能力,在不补充营养物质,保持整个海水毕业论文培养基体积不变的情况下,采用法计算不同培养时间假单胞菌的数量,以时间为横坐标,以菌数为纵坐标,根据不同培养时间里假单胞菌数量的变化,可以做出条反映假单胞菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线,这种曲线就是假单胞菌的生长曲线。
具体操作方法如下样品稀释。
在超净工作台上,用灭菌注射器吸取的无菌海水注入塑料试管中,换用支灭菌吸管,吸取的假单胞菌液注入装有无菌海水的塑料试管中,振摇试管混合均匀,制成的稀释液。
换用支灭菌吸管吸取稀释液,沿管壁徐徐注入含有无菌水稀释液的试管内,振摇试管混合均匀,制成的稀释液。
按上述操作顺序,制成的倍递增稀释液,如此每递增稀释次即要换用支灭菌吸管。
倾注平皿。
将凉至的广谱琼脂培养基注入平皿约个制成平板,以灭菌注射器吸取的稀释液注入培养基中,并转动平皿,使混合均匀。
以此方法进行倍递增稀释液的培养。
培养小时。
待琼脂凝固后,翻转平板,置于恒温箱内培养。
计数。
培养到时间后,取出平板对其内菌落数目进行计数,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏记下各平板的菌落总数后乘以稀释倍数,即得每克每毫升样品所含菌落总数。
电化学测试电化学测试仪器为电化学工作站,采用三电极电解池体系,工作电极为制备的钢电极,辅助电极为光亮铂电极,实验前用蒸馏水冲洗,无水乙醇擦洗,滤纸吸干,参比电极为饱和甘汞电极,使用时从饱和溶液中取出,蒸馏水冲洗,无水乙醇擦洗,电解液为海水,测试软件为。
开路电位测量。
以为时间间隔,测量,得到试样开路电位随时间的变化曲线。
交流阻抗试验。
测定在腐蚀电位下的电化学阻抗谱。
激励信毕业论文号选择幅值为的交流正弦波,频率范围为,数据利用软件进行拟合。
极化试验。
动电位极化曲线的扫描速度为,扫描电位范围从到后回扫,利用软件进行分析拟合。
电化学阻抗谱测量时在试样表面施加的信号,扫描频率范围为。
电化学腐蚀测试中,和以天天天天天天天为周期,定期取样,作检测分析以天天天天天天天天天天天天为周期,定期取样,作检测分析。
扫描电子显微镜测试对腐蚀样品的表面以及去除腐蚀产物的样品表面分别作测试,根据得到的样品表面照片分析腐蚀产物的形貌和分布特征。
实验结果与分析海水中假单胞菌生长曲线经分离纯化和扩大繁殖后的假单胞菌在海水中的生长曲线如图所示。
从曲线可以明显地看到假单胞菌的生长分为四个阶段迟缓期指数生长期稳定生长期衰亡期。
第阶段为迟缓期,当假单胞菌接种到灭菌海水这个新的生长环境中时,由于暂时缺乏足够的能量和必需的生长因子,菌种未得到充分的活化,因此,假单胞菌在段时间里并不立即分裂,菌种的数量维持在,生长处于迟缓期。
第二阶段为指数生长期,假单胞菌逐渐适应了新的环境,它开始以最大的速度生长和分裂,假单胞菌细胞由个分裂成两个,菌种数量开始成指数增加,进入指数生长期。
第三阶段为稳定生长期,随着培养时间的延长,由于间歇培养假单胞菌所需的碳源氮源等营养物质逐渐消耗,环境值逐渐变化,逐步不利于假单胞菌的生长,导致假单胞菌生长率降低直至零即细菌分裂的数量等于细菌死亡数量,进入稳定生长期,假单胞菌菌种数维持在。
第三阶段为衰亡期,当营养物质逐渐消耗待尽和有毒代谢产物的大量积累,假单胞菌死亡速率逐步增加,假单胞菌死亡速率大毕业论文于假单胞菌分裂速率,活菌种数逐步减少,进入衰亡期。
试验表明,在海水条件下假单胞菌可以在相对长的时间内稳定生长。
图假单胞菌在海水中的生长曲线腐蚀电位跟踪分析从自腐蚀电位随浸泡时间的变化关系图来看见图,钢电极在假单胞菌海水体系中的自腐蚀电位是先经历了从到的快速负移,后向正方向变化,开始下降后逐渐趋于稳定。
这是因为钢电极刚浸入假单胞菌海水中,假单胞菌就会附着在电极表面形成层微生物膜,由于假单胞菌的繁殖代谢活动使电极表面氧浓度降低,阻碍了其表面钝化膜的形成,同时假单胞菌新陈代谢产生了氨类侵蚀性物质,因而使自腐蚀电位快速负移。
假单胞菌在经过个短暂的延滞期后,菌种数量开始呈对数级增长,生长代谢加快,大量的代谢产物和胞外聚合物在表面沉积,使得电极表面的生物膜增厚,自腐蚀电位在出现了缓慢正移的现象。
持续生长后,电极表面由于假单胞菌生长代谢产生的碱性物质,以及腐蚀过程中浓度增高,致使这表面区域的产物膜不断被破坏减薄,自腐蚀电位又开始快速负移。
随着腐蚀的进行,在腐蚀电位出现毕业论文了缓慢正移现象,这主要是由于密封环境中氧气以及有机营养物质的消耗殆尽,致使假单胞菌活性下降数量减少。
图钢的自腐蚀电位随时间的变化曲线动电位极化曲线分析电极的极化曲线取决于阴极过程和阳极过程,电极表面微生物膜的附着会改变电极过程,因而会影响极化行为。
图为钢在接种假单胞菌海水中的动电位极化曲线。
从图中可以看出,段为阴极极化曲线,段为阳极极化曲线。
段被明显的分为两个阶段。
段属于活性区,此段是金属的阳极溶解过程。
在该区中,金属处于活性解状工序中用止口处的锥面和顶面上的中心孔定位,其余工序都采用止口和端面定位。
精镗销孔则由于精度要求很高,为避免产生基准不重合误差,而采用的是设计基准做为定位基准。
采用止口和端面或锥面和中心锥作为基面有下列优点用这种定位方法可以加工裙部头部顶面销孔等主要及其它次要表面,而且在这道工序中,次安装就可以车削外圆顶面环槽,实现了工序的集中。
既可提高生产率,又能保证这些表面的位置精度。
活塞裙部在半径方向的刚性差,利用止口和端面定位可以沿活塞轴向夹紧,就不至引起严重的变形,同时又可以进行多刀切削提高生产效率。
当然这些定位也有些缺点如果加工些本来不需要加工的表面,而且是些精度要求级高的要经过两次加工的。
止口对裙部外圆的同轴度误度将影响环槽的位置精度。
但总的说来,采用止口端面作为统基准虽然增加了加工工时和设备,但它更有利于保证加工质量,故而采用它来定位是可行的。
制定工艺路线关于工艺路线的拟订,目前还没有套精确的计算方法,而是采用经过生产实践总结出来的些带有经验和综合性的原则。
制订工艺路线的出发点是使零件的几何形状尺寸精度及位置精度等技术要求能得到合理的保证,在生产纲领已确定为大量生产和条件,故可以适当地采用专用机床配以专用夹具。
除此还应考虑经济效果,使生产成本尽量下降。
它是制定工艺规程的关键阶段。
此次设计拟订了几套工艺路线方案工艺路线方案此处省略字操作时,先将活塞工件竖直放在形块上,让形块卡住活塞的销孔外壁,然后转动支竿,将两个压块压在活塞顶面上,保持到中间位置,平衡杠杆压竿以让其受力均匀调节左侧的微调螺钉,对好销孔与镗刀的位置,接通液压开关,使压块压紧,这样定位安装就限制了活塞的六个自由度,夹紧完成,可以开机加工。
加工完毕,松开液压开关,将镗刀退出,并让支竿转动定角度便于取下活塞部件,取下活塞部件按上述操作往复加工下批。
切削力和夹紧力的计算和校核切削力粗镗销孔时,在卧式金刚镗床型上加工,主轴转轴转速,每转进给量由于切削变形与摩擦,镗刀受到切削力,为了实际应用,现问题就要和其他同学互相研究,互相帮助,这样才能很顺利的解决问题。
总之,通过毕业设计,锻炼了自己的综合能力,同时发现了自己的不足,自己在专业知识方面还有很多不足,还要继续学习,认识到了基础知识的重要性,所以端正了自己的学习态度,虽然即将毕业,走向工作岗位,但是学习是不会停止的,要把正确的学习态度带入到工作中,认真学习,不断提高自己的理论知识,并通过实践,让理论知识与实际相结合。
致谢此次毕业设计是在尊敬的王伟老师的悉心指导下完成的。
从论文的选题设计到答辩,都渗透了王老师大量的心血。
在王老师指导的几个月中,他渊博的知识,丰富的科研经验,严谨的工作态度使我受益匪浅,特别是他的平易近人和慈善的面孔给我留下了最深刻的印象。
在他的指导下使我对专业知识有了更深的认识,明确了自己在今后工作的努力方向和态度,为我以后的工作打下了最坚实的基础。
在此特向王老师致以最崇高的敬意和衷心的感谢,同时也要感谢所有老师和同学的关心和帮助,以及图溶加热使其完全溶解至透明,并将其倒入预先准备的试管中,用牛皮纸封口,放入的高温菌锅中灭菌。
然后冷却至时倒平板制成固体培养基。
在洁净工作台中,移取菌液逐级稀释至,分别涂于固体培养基上,然后放入盒中置于恒温培养箱中培养。
天后,培养基上会出现粘稠状白色菌落,然后挑取单菌落接种于液体培养基中,再次进行富集培养。
通过这样反复多次的培养,即可分离出较纯的假单胞菌。
腐蚀样品挂样用的量筒量取的陈海水,倒入三口烧瓶中,用橡皮塞子封口。
重复此操作,配置成瓶海水培养基。
将配置的海水培养基用牛皮纸包好瓶口,放入的高温灭菌锅中灭菌,再用紫外灯灭菌,然后放入无菌室中冷却至室温。
在超净工作台中,移取假单胞菌液注入烧瓶中,并将工作电极从侧口插入烧瓶,用石蜡封口,然后用牛皮纸将烧瓶瓶口封好。
此步操作均在酒精灯附近进行,避免杂菌对样品的污染。
挂样完成后的实验样品从无菌室中移出,放入个大的塑料箱中,以备电化学测试之用。
注上述第三第四步的操作需要手带次性手套完成,并用灭菌液进行灭菌,方可进行操作,以避免杂菌对样品的污染。
测试及分析方法假单胞菌生长曲线测定将假单胞菌接种到海水中,经过短暂的休整之后,开始以二分裂法繁殖,分裂后的子细胞都具有生活能力,在不补充营养物质,保持整个海水毕业论文培养基体积不变的情况下,采用法计算不同培养时间假单胞菌的数量,以时间为横坐标,以菌数为纵坐标,根据不同培养时间里假单胞菌数量的变化,可以做出条反映假单胞菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线,这种曲线就是假单胞菌的生长曲线。
具体操作方法如下样品稀释。
在超净工作台上,用灭菌注射器吸取的无菌海水注入塑料试管中,换用支灭菌吸管,吸取的假单胞菌液注入装有无菌海水的塑料试管中,振摇试管混合均匀,制成的稀释液。
换用支灭菌吸管吸取稀释液,沿管壁徐徐注入含有无菌水稀释液的试管内,振摇试管混合均匀,制成的稀释液。
按上述操作顺序,制成的倍递增稀释液,如此每递增稀释次即要换用支灭菌吸管。
倾注平皿。
将凉至的广谱琼脂培养基注入平皿约个制成平板,以灭菌注射器吸取的稀释液注入培养基中,并转动平皿,使混合均匀。
以此方法进行倍递增稀释液的培养。
培养小时。
待琼脂凝固后,翻转平板,置于恒温箱内培养。
计数。
培养到时间后,取出平板对其内菌落数目进行计数,可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏记下各平板的菌落总数后乘以稀释倍数,即得每克每毫升样品所含菌落总数。
电化学测试电化学测试仪器为电化学工作站,采用三电极电解池体系,工作电极为制备的钢电极,辅助电极为光亮铂电极,实验前用蒸馏水冲洗,无水乙醇擦洗,滤纸吸干,参比电极为饱和甘汞电极,使用时从饱和溶液中取出,蒸馏水冲洗,无水乙醇擦洗,电解液为海水,测试软件为。
开路电位测量。
以为时间间隔,测量,得到试样开路电位随时间的变化曲线。
交流阻抗试验。
测定在腐蚀电位下的电化学阻抗谱。
激励信毕业论文号选择幅值为的交流正弦波,频率范围为,数据利用软件进行拟合。
极化试验。
动电位极化曲线的扫描速度为,扫描电位范围从到后回扫,利用软
