放学院江苏省应用酶工程技术研究开发中心提供。实验仪器设备洁净工作台上海博迅实业有限公司医疗设备厂仪器电子天平上海良平仪器有限公司电子天平上海舜宇恒平科学仪器有限公司恒温气浴摇床常州市博宏高科试验设备有限公司手提式不锈钢压力蒸汽灭菌器上海申安医疗器械厂隔水式恒温培养箱上海博迅实业有限公司医疗设备厂数显恒温水浴锅国华电器有限公司基因扩增热循环仪西安天隆科技有限公司电泳仪北京市六仪器厂多功能水平电泳槽北京市六仪器厂漩涡混合器上海琪特分析仪器有限公司热磁力搅拌器台式高速离心机无锡市瑞江分析仪器有限公司冰箱青岛海尔股份有限公司可见紫外检测仪上海市顾村电光仪器厂实验步骤菌种培养配制培养基培养基在锥形瓶中配制完成并溶解。液体培养基胰蛋白胨，酵母粉。固体培养基液体培养基添加的琼脂。灭菌将平板块与装有培养基的锥形瓶分别包扎，移液枪枪头与的离心管置于密封容器中，用高压蒸汽灭菌锅灭菌。倒平板待培养基冷却至左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是在酒精灯火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰，目的是消灭瓶口的杂菌，防止杂菌感染培养基左手将培养皿打开条缝隙，右手将培养基倒入培养皿后，立刻盖上皿盖。菌种活化待平板冷却凝固后，划平板，接柠檬酸杆菌和柠檬酸杆菌的菌种，放置片刻，将平板倒置，防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。最后放入恒温培养箱，过夜培养，第二天，观察菌种活化情况，情况较好可放入冰箱保存。扩大培养将培养好的培养皿不要打开皿盖用的酒精擦拭，放进无菌超净台中，用酒精灯灼烧接种环，待接种环冷却，用接种环挑取培养皿上的菌落，将接种环伸入经过灭菌的液体培养基，摇晃接种环，使菌种均匀分散到培养液中，然后包扎封口锥形瓶，将接种后的锥形瓶放入摇床过夜培养。培养时间不能太长，否则细菌老化，代谢产物太多。影响质粒质量。培养皿继续放入冰箱保存。法制备细菌基因组菌体收集取已经培养过夜的弗氏柠檬酸杆菌菌悬液或于离心管中，离心，弃上清，收集菌体注意吸干多余的水分。辅助裂解阳性菌破壁裂解比较困难，可以先用溶菌酶处理。加入溶菌酶，处理。裂解向每管加入裂解缓冲液，乙酸钠，用枪头反复吹打以悬浮和裂解细菌细胞。接着向每管加入，充分混匀后，离心，除去蛋白质复合物及细胞壁等残渣。将上清液转移到新离心管中，加入等体积的用饱和的苯酚，充分混匀后，离心，进步沉淀蛋白质。取离心后的水层，加等体积的氯仿，充分混匀后，组弗氏柠檬酸杆菌基因组弗氏柠檬酸杆菌基因组分析讨论及注意事项当太多，胶染色过深,带看不清时，可将胶放入蒸馏水冲泡，分钟后再观察。吸取苯酚时应注意安全。苯酚腐蚀性很强。吸取氯仿异戊醇时要在通风橱中进行，氯仿可引起神经系统功能紊乱要引起肝脏损害。异戊醇其蒸气或雾对眼睛皮肤粘膜和呼吸道有刺激作用实验中，试剂的配制是重要的，如果试剂出现，下面的操作就没有意义了。在配制试剂时，所有的称量要准确。电子天平都要预热后才可以进行使用。配制试剂时，不可照书加试剂，例如在配制缓冲液的需要严格控制的试剂时，定要用试纸进行测试。在做电泳操作时，为致癌物质，所以使用时要格外小心，同时也不可将其他区域污染。抽提转化及制备感受态细胞时，温度要控制的很好，同时动作要轻，不能剧烈。预混和分装试剂反应液应预先配制好，然后小量分装。节省时间并保证各管成分平行。最好在加样时都在冰上低温进行，以防止加入酶后反应立即开始。培养细菌的容器用过后都要及时进行灭菌，细菌培养基上清不要随便丢弃，应存放在起进行灭菌处理，以免污染环境。防止核酸污染反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生。吸样枪吸样枪污染值得注意操作时应避免将样品或模板核酸吸入枪内或粘上枪头。开关盖时注意不要接触到内壁，并且不要开盖时间太长，以免污染。结论技术具有适用面广的特点,自发明以来,已在病毒感染的临床检测,癌症的临床诊断,遗传病的早期诊断中得以应用应用技术可使单个未形成病毒颗粒的分子迅速扩增至诊断量可从细胞中检出个癌变细胞可快速简便且较为安全地进行遗传性疾病的胎儿期诊断从而使临床分析上升到了分子生物学检测水平致谢由衷的感谢韦老师，老师们渊博学识和严谨学风将使我受益终生，激励我在未来的学习和工作中不断奋进。在生活上，给予了很大的关怀，在学业上，给予了耐心的指导，使我顺利地完成了学业。衷心的感谢邱老师平时对我们孜孜不倦的教诲和对实验的关心与指导，老师治学严谨，为人热诚大方，工作丝不苟，使我受益颇多。在读期间，得到了常州工程职业技术学院制药系候老师彭老师等老师和同学的无私帮助和大力支持，在此并表示深切的感谢,最后，感谢曾经给予我鼓励支持和帮助的朋友们同学们,参考文献韦平和，彭加平，营佳酪氨酸酚裂解酶及其在酪氨酸酶法合成中的应用中国生化药物杂志李华钟,孙伟,刘吉泉,陈坚弗氏柠檬酸细菌酪氨酸酚解酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达工业微生物李伟平，王树英，严群，李华钟构建高表达酪氨酸酚裂解酶重组大肠杆菌合成左旋多巴中国医药工业杂志刘志国，屈伸基因克隆的分子基础与工程原理北京化学工业出版社，赵亚力，马学斌，韩为东聚合酶链反应分子生物学基本实验技术年月第版页。离心，去除苯酚。小心取出上清液，用预冷的二倍体积的无水乙醇沉淀，室温放置以上，离心,弃上清液。沉淀质粒用乙醇洗涤沉淀次，离心，弃上清液。沉淀在室温下倒置干燥或真空干燥。不要太干，否则不易溶解加入含的缓冲液或无菌双蒸水，使溶解，置水浴，除去。冷却至室温后，将样品储存在冰箱中使用。电泳检测制备琼脂糖凝胶按照被分离的大小，决定凝胶中琼脂糖的百分含量。可参照下表琼脂糖凝胶浓度线状的有效分离范围本实验选择的琼脂糖凝胶液称取琼脂糖，放入锥形瓶中，加入缓冲液，至微波炉加热至完全溶化，取出摇匀。胶板的制备取有机玻璃内槽，洗净，晾干平衡凝胶槽，放好胶板，调节好梳子与底板的距离将加入冷却至左右的琼脂糖凝胶液中，轻轻混匀，缓缓倒入有机玻璃内槽，直至有机玻璃板上形成层均匀的胶面注意不要形成气泡。④待胶彻底凝固后，轻轻拔出梳子将内槽入电阀来确定的,旦二者出现故障,如压力调节器操作失误或其中的卸荷阀管道等零部件出现故障安全阀失灵,风包内气体压力急剧上升,超过风包的强度极限时就会发生爆炸。结束语除以上总结外，为使压缩机正常运行，延长其使用寿命，应定期维护严格按随机说明书制定检修制度，压缩机的维修应该是按计划，有步骤进行，并加以不断的总结。掌握空气压缩机常见故障和事故产生的原因,并在实际生产中严格按照设备的操作规程进行操作,按照设备的维护规程进行维护,就可以减少压缩机的故障现象,大大提高设备运转率,为提高生产率和生产效益提供可靠的保障。参考文献刘志勇编电化学设备检修北京中国电力出版社，郑祖斌编通用机械设备北京机械工业出版社，李纪池凤山著机电事故分析与预防北京煤炭工业出版社,通用机械月刊年第十期朱圣东邓建吴家声编无油润滑压缩机北京机械工业出版社，刘全乐赵德平活塞式空压机常见故障与处理年第期王银学李孝军空压机产生故障的原因与排除方法压缩技术年期孙宁空压机运行的设备故障控制与排除中国职业安全健康协会年学术年会论文集孟庆春钟圣俊等空压机爆炸事故分析与对策中国金属学会中国钢铁年会论文集盛强往复式活塞空压机的故障分析中国设备工程年期致谢封结合面不平研磨结合面进气不清洁，积尘结垢清洗并研磨阀片支撑面密封垫损坏更换四压力分配失调级吸气阀或排气阀漏气检修二级吸排气阀漏气检修五空压机不打气故障现象空压机无压力空气排出。故障原因空压机松压阀卡滞。阀片变形或断裂。进排气口积碳过多。故障的判断与排除方法检查松压阀组件，清洗更换失效件。拆检缸盖，检查阀片，更换变形断裂的阀片。拆检缸盖，清理阀座板阀片。第四章异常声响运动部件异常声响活塞或汽缸磨损修配活塞或活塞杆的禁固螺母松动紧固活塞杆与十字头的紧固螺母松动紧固连接销与销孔配合不当调整间隙曲轴连杆或活塞组件机械损伤修配，更换带轮飞轮不平衡调整气缸内有异物判断位置停车检修气缸进水判断位置停车检修气缸内有响声气缸内掉入异物或破碎阀片，清除异物或破碎阀片活塞环过分磨损，工作时在环槽内发生冲击，更换活塞环连杆大头瓦小头衬套及活塞横孔磨损过度，应更换之活塞顶部与气缸盖发生顶碰，应调整间隙阀内有响声进排气阀组未压紧，应拧紧阀室方盖紧固螺母气阀结合螺栓螺母松动，拧紧螺母阀片弹簧损坏，及时更换阀片与阀盖之间间隙过大，调整间隙，必要时更换阀片曲轴箱内有响声飞轮未装紧或键配合过松，应装紧连杆螺栓未拧紧，紧固之连杆瓦磨损过度，换新瓦主轴承损坏，更换轴承曲轴上之挡油圈松脱，换新挡油圈。气缸发出撞击声活塞或活塞环磨损严重解体检查，更换活塞环活塞和气缸间隙过小更换缸套或活塞气缸余隙过小适当加大余隙曲轴连杆机构与气缸中心不致解体检查，找好同心度活塞杆弯曲或连接螺栓松动调直或更换活塞杆并拧紧连接螺栓吸排气阀断裂或阀盖松动顶丝松动更换阀片，拧紧盖顶丝吸排气阀产生撞击声阀片断裂更换阀片弹簧松软或折断更换弹簧阀座伸入气缸，与活塞相撞吸排气阀顶丝松动检查拧紧顶死吸排气阀紧固螺丝松动检查拧紧紧固件螺栓吸排气阀放学院江苏省应用酶工程技术研究开发中心提供。实验仪器设备洁净工作台上海博迅实业有限公司医疗设备厂仪器电子天平上海良平仪器有限公司电子天平上海舜宇恒平科学仪器有限公司恒温气浴摇床常州市博宏高科试验设备有限公司手提式不锈钢压力蒸汽灭菌器上海申安医疗器械厂隔水式恒温培养箱上海博迅实业有限公司医疗设备厂数显恒温水浴锅国华电器有限公司基因扩增热循环仪西安天隆科技有限公司电泳仪北京市六仪器厂多功能水平电泳槽北京市六仪器厂漩涡混合器上海琪特分析仪器有限公司热磁力搅拌器台式高速离心机无锡市瑞江分析仪器有限公司冰箱青岛海尔股份有限公司可见紫外检测仪上海市顾村电光仪器厂实验步骤菌种培养配制培养基培养基在锥形瓶中配制完成并溶解。液体培养基胰蛋白胨，酵母粉。固体培养基液体培养基添加的琼脂。灭菌将平板块与装有培养基的锥形瓶分别包扎，移液枪枪头与的离心管置于密封容器中，用高压蒸汽灭菌锅灭菌。倒平板待培养基冷却至左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是在酒精灯火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰，目的是消灭瓶口的杂菌，防止杂菌感染培养基左手将培养皿打开条缝隙，右手将培养基倒入培养皿后，立刻盖上皿盖。菌种活化待平板冷却凝固后，划平板，接柠檬酸杆菌和柠檬酸杆菌的菌种，放置片刻，将平板倒置，防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。最后放入恒温培养箱，过夜培养，第二天，观察菌种活化情况，情况较好可放入冰箱保存。扩大培养将培养好的培养皿不要打开皿盖用的酒精擦拭，放进无菌超净台中，用酒精灯灼烧接种环，待接种环冷却，用接种环挑取培养皿上的菌落，将接种环伸入经过灭菌的液体培养基，摇晃接种环，使菌种均匀分散到培养液中，然后包扎封口锥形瓶，将接种后的锥形瓶放入摇床过夜培养。培养时间不能太长，否则细菌老化，代谢产物太多。影响质粒质量。培养皿继续放入冰箱保存。法制备细菌基因组菌体收集取已经培养过夜的弗氏柠檬酸杆菌菌悬液或于离心管中，离心，弃上清，收集菌体注意吸干多余的水分。辅助裂解阳性菌破壁裂解比较困难，可以先用溶菌酶处理。加入溶菌酶，处理。裂解向每管加入裂解缓冲液，乙酸钠，用枪头反复吹打以悬浮和裂解细菌细胞。接着向每管加入，充分混匀后，离心，除去蛋白质复合物及细胞壁等残渣。将上清液转移到新离心管中，加入等体积的用饱和的苯酚，充分混匀后，离心，进步沉淀蛋白质。取离心后的水层，加等体积的氯仿，充分混匀后，组弗氏柠檬酸杆菌基因组弗氏柠檬酸杆菌基因组分析讨论及注意事项当太多，胶染色过深,带看不清时，可将胶放入蒸馏水冲泡，分钟后再观察。吸取苯酚时应注意安全。苯酚腐蚀性很强。吸取氯仿异戊醇时要在通风橱中进行，氯仿可引起神经系统功能紊乱要引起肝脏损害。异戊醇其蒸气或雾对眼睛皮肤粘膜和呼吸道有刺激作用实验中，试剂的配制是重要的，如果试剂出现，下面的操作就没有意义了。在配制试剂时，所有的称量要准确。电子天平都要预热后才可以进行使用。配制试剂时，不可照书加试剂，例如在配制缓冲液的需要严格控制的试剂