北京科学出版社孙韦强,伍登熙,尹光琳等利用微生物生产丙烯酰胺的研究生物工程学报,水和废水检测分析方法，中国环境科学出版社致谢在论文即将完成之际，我衷心感谢我的导师王老师。本实验是在王老师的悉心指导下完成的。在整个实验过程中，由于是自己第次独立完成个实验，遇到了各种问题，但是，在王老师的认真指导和帮助下，我逐渐把各个问题细小化或完全解决。导师渊博的专业知识，严谨的治学态度，精益求精的工作作风，诲人不倦的高尚师德，严以律己宽以待人的崇高风范，朴实无华平易近人的人格魅力对我影响深远，是我学习的模范。在此还要感谢和我在同个实验室的师姐和同学，在实验过程中他们给予热心帮助，在他们的帮助下，实验得以顺利完成。最后，我要感谢生命科学学院的全体老师以及生物工程班所有同学们，谢谢你们在四年中对我的关心和帮助,时间图降解率随时间的变化曲线接种量的影响将最优菌株向培养基中分别按不同的体积分数接种，在已优化的条件下培养天后测定丙烯酰胺的降解率。图降解率随接种量的变化曲线培养温度的影响分别设定了不同的生长温度，在同等条件下培养。测定不同温度下最优菌株对溶液的降解效果。对丙烯酰胺溶液的降解率进行了测定，从而确定了降解实验的最佳温度。图降解率随温度的变化曲线初始值的影响将优势菌株进行斜面培养天，再用无菌水洗，制成菌悬液，用已灭菌的移液管取等量分别倒入值为的液体培养基置于摇床培养进行，天后测其菌浓，从而确定最适。图降解率随值的变化曲线污水值测定具体操作如下取混合均匀的水样或适量水样稀释至置于磨口的回流锥形瓶中。于试料中加入重铬酸钾标准溶液和几颗防爆沸玻璃珠摇匀。将锥形瓶接到回流装置冷凝管下，接冷凝水。从冷凝管壁上端缓慢加入硫酸银硫酸试剂，以防止低沸点有机物逸出。自溶液开始沸腾起回流小时。注对于化学需氧量高的废水样，可先取上述操作所需提及的的废水样和试剂，于硬质玻璃试管中，摇匀，加热后观察是否变成绿色。如溶液显绿色，再适当减少废水取样量，直至溶液不变绿色为止，从而确定废水样分析时应取用的体积。稀释时，所取废水样量不得少于，如果化学需氧量很高，则水样应多次稀释。注废水中氯离子含量超过时，应先把硫酸汞加入回流锥形瓶中，再加废水或适量废水稀释至，摇匀。以下操作同上。冷却后，用水自上冲洗冷凝管，取下锥形瓶，用水稀释至左右。溶液冷却至室温，加入滴试亚铁灵指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液滴定，颜色由黄经蓝绿色变为红褐色为终点，记录硫酸亚铁铵标准溶液消耗毫升数。测定水样同时，以重蒸馏水，按同样操作步骤作空白试验。记录滴定空白时硫酸亚铁铵标准溶液的用量。计算标准溶液浓度，试料测定时标准溶液消耗的体积，空白实验标准溶液消耗的体积，试料体积，的摩尔质量，以为单位的换算值菌株对污水降解结果表两种菌株降解废水器送计数器初值，这个值是送到和中的。他是以加法记数的，并能从全到全时自动产生溢出中断请求。因此，我们可以把计数器记满为零所需的生沉淀，影响测定结果，故在回流前向水样中加入硫酸汞，使成为络合物以消除干扰。氯离子含量高于的样品应先做定量稀释，使含量降低至以下，再进行测定。方法的适用范围用浓度的重铬酸钾溶液可测定大于的值，未经稀释水样的测定上限是。丙烯酰胺降解率的测定取菌株接入含丙烯酰胺的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，培养，再将菌体接入含丙烯酰胺的无机盐培养基中，以丙烯酰胺为唯碳源，培养天，离心，取菌上清液于紫外分光度计测定紫外吸收值的变化，以的变化值代表丙烯酰胺的降解能力。降解率未添加降解菌的添加降解菌的未添加降解菌的丙烯酰胺含量的测定为了确定丙烯酰胺的吸收波长，配制不同浓度的丙烯酰胺标准溶液，在紫外分光光度计上进行扫描，最终确定丙烯酰胺的吸收波长为，以下研究实验中均采用的波长测定丙烯酰胺的含量。丙烯酰胺标准溶液准确称取丙烯酰胺含量，溶解在去离子水中，定量转移入容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液为标准贮备液。丙烯酰胺标准曲线在只具塞试管中，分别加入和标准溶液，各加水至，配成和标准系列。在紫外分光光度计上处测定不同浓度的丙烯酰胺溶液随吸光度变化的标准曲线。测量数值如表所示，标准曲线如图。相关系数，曲线方程为。表标准浓度溶液的吸光值浓度吸光值浓度吸光值图丙烯酰胺标准曲线结果与分析降解丙烯酰胺菌的分离经稀释平板涂布筛选了两种菌株菌株的形态特征圆形规则，菌落较大，湿润，乳白色，透明菌株的形态特征圆形规则，菌落小，干燥，白色，半透明优势菌的菌体染色及形态鉴定菌体染色由图中可以看出，菌株为革兰氏阳性杆菌，菌株为革兰氏阴性菌。图菌株简单染色图菌株简单染色丙烯酰胺标准曲线图菌株革兰氏染色图菌株革兰氏染色生理生化鉴定接触酶实验，菌株与菌株均没有气泡产生，阴性糖氧化发酵，菌株和菌株均变黄，没有气泡甲基红试验，菌株为红色，阳性，菌株为黄色，阴性实验，菌株与菌株均不变红，阴性。图甲基红试验右边为对照图试验右边为对照菌株生长条件优化丙烯酰胺是具有毒性的有机物，需向培养液中添加营养元素以促进微生物生长从而使丙烯酰胺降解。实验确定了外加碳源氮源磷源及其最佳浓度，优化了菌株在纯培养条件下降解丙烯酰胺的最佳生长条件。降解时间的影响将优势菌株进行斜面培养，再用无菌水洗，制成菌悬液，记录不同时间下菌株的生长情况，取六个时间点。降解率达到，丙烯酰胺除去率达到。参考文献张学佳,纪巍,王宝辉等丙烯酰胺生态毒理行为研究进展生态毒理学报,孔繁翔环境生物学北京高等教育出版社,,,,,,,,刘衍余,王苏平,杨菁化工百科全书第卷北京,化学工业出版陈庆国聚丙烯酰胺降解菌的筛选及降解含聚丙烯酰胺污水的室内研究孙韦强,伍登熙,尹光琳等利用微生物生产丙烯酰胺的研究生物工程学报,沈寅初，张国凡，韩建生微生物法生产丙烯酰胺工业微生物沈萍,范秀容,李广武等微生物学实验北京高等教育出版社,布坎南,吉本斯等伯杰细菌鉴定手册第八版北京科学出版社东秀珠,蔡妙英常见细菌系统鉴定手册计数值设定为和计数初值设定为可得到如下计算通式式中，为计数器摸值，该值和计数器工作方式有关。在方式时为在方式时的值为在方式和为计算公式计数或计数计数是单片机时钟周期的倍为定时初值如单片机的主脉冲频率为，经过分频方式微秒毫秒方式微秒毫秒显然秒钟已经超过了计数器的最大定时间，所以我们只有采用定时器和软件相结合的办法才能解决这个问题秒的方法我们采用在主程序中设定个初值为的软件计数器和使定时毫秒这样每当到毫秒时就响应它的溢出中断请求，进入他的中断服务子程序。在中断服务子程序中，先使软件计数器减，然后判断它是否为零。为零表示秒已到可以返回到输出时间显示程序。相应程序代码主程序定时器需定时毫秒，故工作于方式。初值计数令为定时器方式装入定时器初值开中断启动计数器软件计数器赋初值等待中断中断服务子程序跳转到时间及信号灯显示子程序恢复值重装入定时器初值软件延时的工作频率为，我们选用的单片机的工作频率为。机器周期与主频有关，机器周期是主频的倍，所以个机器周期的时间为。我们可以知道具体每条指令的周期数，这样我们就可以通过指令的执行条数来确定秒的时间。具体的延时程序分析延时秒子程序,延时子程序字节数数为机器周期数为所以此指令的执行时间为为个双重循坏循环次数为所以延时时间约为设置的初值为主延时程序循环次，所以秒由于单片机的运行速度很快其他的指令执行时间可以忽略不计。时间及信号灯的显示并行口的扩展虽然有个位端口,但真正能提供借用的只有口,因为和口通常用于传送外部传送地址和数据,口也有它的第二功能。因此，单片机通常需要扩展。由于我们用外部输入设定红绿灯倒计时初值数码管的输出显示红绿黄信号灯的显示都要用到个端口，显然的端口是不够，需要扩展。扩展的方法有两种借用外部地址来扩展端口采用接口新片来扩充。我们用并行接口信片来扩展端口。显示原理当定时器定时为秒，时程序跳转到时间显示及信号灯显示子程序，它将依次显示信号灯时间，同时直显示信号灯的颜色，这时在返回定时子程序定时秒，在显示黄灯的下个时间，这样依次把所有的灯色的时间显示完后在重新给时间计数器赋初值，重新进入循环。口输出信号接信号灯由于发光二极管为共阳极接法，输出端口为低电平，对应的二极管发光，所以可以用置位方法点亮红，绿，黄发光二极管。输出信号与数码管的连接灯的显示原理通过同名管脚上所加电平的高低来控制发光二极管是否点量而显示不同的字形如,管角上加上所以上为伏，不亮其余为高电平，全亮则显示为采用共阴级连接其中等。看门狗电路可以分为内看门狗和外看门狗。看门狗电路是指看门狗的硬件电路包含在单片机内部，如的系列，的系列，内核中比较典型的有公司的，公司的，公司的以及公司系列的多种型号的单片机等。对于没有看门狗定时器的单片机或是认为内部看门狗不可靠时，可以采用外部看门狗定时器。外部看门狗电路既可以用专用看门狗芯片，也可由普通芯片实现。这里，以专用芯片作为外部看门狗的北京科学出版社孙韦强,伍登熙,尹光琳等利用微生物生产丙烯酰胺的研究生物工程学报,水和废水检测分析方法，中国环境科学出版社致谢在论文即将完成之际，我衷心感谢我的导师王老师。本实验是在王老师的悉心指导下完成的。在整个实验过程中，由于是自己第次独立完成个实验，遇到了各种问题，但是，在王老师的认真指导和帮助下，我逐渐把各个问题细小化或完全解决。导师渊博的专业知识，严谨的治学态度，精益求精的工作作风，诲人不倦的高尚师德，严以律己宽以待人的崇高风范，朴实无华平易近人的人格魅力对我影响深远，是我学习的模范。在此还要感谢和我在同个实验室的师姐和同学，在实验过程中他们给予热心帮助，在他们的帮助下，实验得以顺利完成。最后，我要感谢生命科学学院的全体老师以及生物工程班所有同学们，谢谢你们在四年中对我的关心和帮助,时间图降解率随时间的变化曲线接种量的影响将最优菌株向培养基中分别按不同的体积分数接种，在已优化的条件下培养天后测定丙烯酰胺的降解率。图降解率随接种量的变化曲线培养温度的影响分别设定了不同的生长温度，在同等条件下培养。测定不同温度下最优菌株对溶液的降解效果。对丙烯酰胺溶液的降解率进行了测定，从而确定了降解实验的最佳温度。图降解率随温度的变化曲线初始值的影响将优势菌株进行斜面培养天，再用无菌水洗，制成菌悬液，用已灭菌的移液管取等量分别倒入值为的液体培养基置于摇床培养进行，天后测其菌浓，从而确定最适。图降解率随值的变化曲线污水值测定具体操作如下取混合均匀的水样或适量水样稀释至置于磨口的回流锥形瓶中。于试料中加入重铬酸钾标准溶液和几颗防爆沸玻璃珠摇匀。将锥形瓶接到回流装置冷凝管下，接冷凝水。从冷凝管壁上端缓慢加入硫酸银硫酸试剂，以防止低沸点有机物逸出。自溶液开始沸腾起回流小时。注对于化学需氧量高的废水样，可先取上述操作所需提及的的废水样和试剂，于硬质玻璃试管中，摇匀，加热后观察是否变成绿色。如溶液显绿色，再适当减少废水取样量，直至溶液不变绿色为止，从而确定废水样分析时应取用的体积。稀释时，所取废水样量不得少于，如果化学需氧量很高，则水样应多次稀释。注废水中氯离子含量超过时，应先把硫酸汞加入回流锥形瓶中，再加废水或适量废水稀释至，摇匀。以下操作同上。冷却后，用水自上冲洗冷凝管，取下锥形瓶，用水稀释至左右。溶液冷却至室温，加入滴试亚铁灵指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液滴定，颜色由黄经蓝绿色变为红褐色为终点，记录硫酸亚铁铵标准溶液消耗毫升数。测定水样同时，以重蒸馏水，按同样操作步骤作空白试验。记录滴定空白时硫酸亚铁铵标准溶液的用量。计算标准溶液浓度，试料测定时标准溶液消耗的体积，空白实验标准溶液消耗的体积，试料体积，的摩尔质量，以为单位的换算值菌株对污水降解结果表两种菌株降解废水器送计数器初值，这个值是送到和中的。他是以加法记数的，并能从全到全时自动产生溢出中断请求。因此，我们可以把计数器记满为零所需的