学研究中国昆虫科学英乔海暄,段毅豪,马恩波蝗总科部分种类等位基因酶的比较研究英遗传学报马恩波,郑哲民五种稻蝗染色体核型和带带型的比较昆虫学报张大治，戴沛捷蜻蜓目昆虫的提取方法研究宁夏农学院学报张建珍，郭亚平，马恩波不同保存方式下蝗虫组织的提取及分析动物学杂志季维智,宿兵遗传多样性研究的原理与方法杭州浙江科学出版社,谭竹钧,韩雅莉,苏和风雏蝗属六种蝗虫基因组的比较研究内蒙古大学学报自然科学版张民照,康乐飞蝗总抽提及其分析条件的摸索动物学研究田英芳，黄刚，郑哲民，魏朝明种简易的昆虫基因组提取方法陕西师范大学学报自然科学版印红，刘晓丽,王彦芳,张道川,赵晓瑜种改进的昆虫基因组的提取方法河北大学学报自然科学版。液的液的蛋白酶操作方法取样将蝗虫干标本和无水乙醇浸制标本用无菌三蒸水冲洗次用无菌三蒸水浸泡以上,弃水弃去浸泡液,取蝗虫后足股节肌肉,剪碎材料于装有匀浆液液的管中。研磨与离心管相匹配的玻璃棒将样品研磨至匀浆状。加入的和的蛋白酶。水浴水浴，直至混合液消化得很清亮为止。酚抽提在混合液中加入等体积的平衡酚，上下缓慢颠倒十次，切勿剧烈振荡，在台式高速离心机上离心,取上清液。重复步骤直至水相与酚相的界面处看不到白色的蛋白质层为止，取上清液。氯仿∶异戊醇∶抽提上清液中加入等体积的氯仿∶异戊醇，上下缓慢颠倒十次，在台式高速离心机上离心,取上清液再次重复此步骤。沉淀在上清液中加入体积的冷无水乙醇预先置冰箱内沉淀冰箱内放置，离心,弃上清液。洗涤在留有沉淀的离心管中加入的冷乙醇洗涤，在台式高速离心机上离心,倾去上清液。保存自然干燥，加适量或无菌三蒸水溶解，于保存备用。饱和法,试剂及溶液浸泡液。消化液。蛋白酶饱和溶液异丙醇的乙醇。操作方法乙醇固定标本用无菌三蒸水浸泡以上,弃水对干标本,用浸泡液浸泡以上，弃去浸泡液,取蝗虫后足股节肌肉。剪碎材料,加消化液于消化以上，然后加蛋白酶，继续消化。加饱和,涡旋,离心。转移上清,等体积异丙醇沉淀,离心,弃上清。用的乙醇洗涤沉淀，自然干燥，溶解后,于保存备用。法,试剂及溶液缓冲液浸泡标本雌，雄。，图饱和法提取的琼脂糖凝胶电泳图月日标准分子量干制标本，为雌性，雄乙醇浸泡标本雌，雄。，。图法提取的琼脂糖凝胶电泳图月日标准分子量干制标本雌，雄乙醇浸泡标本雌,雄，。结果与分析般认为，电泳检测后，若样品条带整齐无拖尾，则说明较完整，也无杂质。反之，则认为样品有降解或混有杂质。通过检测发现本实验的的部分样品有明显的条带，但都有不同程度的降解。从图可以看出，用蛋白酶消化法提取的总部分在处有亮带，基本无拖尾，说明提取的大分子较为完整。饱和法提取的总从图可以看出，此方法提取的效果相对较差，弥散较大,未出现单条浓带，抹迹现象严重，以至用此方法提取的基因组都无法用以扩增。用法提取的从图可以看出，干标本只有个样品提出了明显的条带，无水乙醇浸泡的标本提取的总有亮带在处,但大部分都有拖尾,且拖尾现象比较严重，说明样品有降解或混有杂质。三种方法比较结果表明，蛋白酶消化法提取所得到的结果显示各有优缺点如下方法蛋白酶消化法，由于蛋白酶的加入，研磨省时省力，无须低温操作，提取的的浓度纯度较好，适用范围广。因此，该方法可以用于对模板质量要求较高的分子研究中，但该方法成本较高，耗时长，酚等药品价格高且对人体有害需要转移上清液多次,有机抽提多次,此过程中有较大损耗，且浪费材料，步骤繁琐。方法饱和法，操作简单，成本低廉，且不用接触酚氯仿等腐蚀性试剂，省时经济适合小型昆虫基因组的提取，但提出的含有的杂质也较多，因而该方法可以用于对模板质量要求不高的分子实验中。方法法，本方法有以下优点无需用酚抽提，省时，经济，又减少了有毒药品对实验人员的侵害适合小型昆虫基因组的提取，其间仅转移上清液两次，有机抽提次，得率高本方法不需要严格的低温操作，其步骤均可在室温进行适合不同处理材料以及其它昆虫的基因组提取，获得的可以满足蝗虫分子系统学研究的需要。不同的标本同标本的不同组织,或不同保存方法的材料,在提取时都会出现难以预料的问题。虽然目前已经发表了很多提取标本的方法,但是迄今为止还没有种通用的提取方法适用于所有的标本提取。因而，不同的标本应根据标本保存状态和不同的实验目的选取不同的提取方法,才能保证研究的顺利进行。实验结果不理想的原因分析因为气候原因未采到新鲜标本，干标本和乙醇固定的标本存放过久，严重降解的化学性质极不稳定,可以通过水解或氧化作用自发降解，提取效果没有新鲜标本好原料过少且研磨不够充分在加药品的混匀或吹吸过程中，动作剧烈或所用的枪头过小造成了片断的断裂在蛋白酶消化法中可能没有把蛋白质消化完全在蛋白酶消化法和法过程中酚的三次抽提和氯仿已戊醇抽提中可能离心转速不够或时间不足，使上清液中还含有较多的杂质，影响了的纯度。此外,在基因组的提取过程中，应尽量保证核酸级结构的完整性，并最大限度地减少污染。为此，在实验过程中注意要简化操作步骤，缩短提取过程，避免使核酸处于高温，过酸或过碱的环境，以减少核酸变性降解等机会，同时在提取过程中注意实验技巧尽量减少化学及机械因素胡婧，刘艳，黄原网翅蝗科部分种类全基因组提取及基因测序陕西师范大学学报自然科学版张建珍，马恩波，郭亚平，陈东华，王燕网翅蝗科四种蝗虫的多态性研究动物分类学报刘波，郑哲民，张迎春，刘缠民稻蝗属基因组提取方法陕西师范大学学报自然科学版庞峻峰，张亚平标本研究进展动物学研究影响。虽然本次提取的结果不是很理想，但是有些样品的主带明显，而扩增要求的模板的质量不是很高，所以这些主带明显样品可以用来做扩增，来进行更深步的研究。本文比较了三种不同提取方法的优缺点，因此可以根据不同的实验条件和目的选择使用。当然随着分子生物学的快速发展，各种不同的提取方法在不断的创新出现，相信这些方法在不断的优化后也可以提取到高质量的基因组来满足更深层次研究的需要。参考文献汪桂玲，郑哲民，黄原蝗总科科蝗虫间带型变异的比较研究陕西师范大学学报自然科学版郑哲民蝗虫分类学西安陕西师范大学出版社,马恩波,郭亚平,郑哲民中国稻蝗属细胞分类的效是企业员工的思想认识问题，特别是领导层对信息化建设的认识问题。企业把手的高度重视直接决策，对企业信息化的成功实施起着决定性的作用。例如公司组织形式的重组管理方式的变革业务流程的再造部门职能及利益的再分配等等，势必要与些习惯势力产生摩擦，如果没有领导坚定的支持，并身体力行，这些变革是很难推动的。同时，信息化在初始化阶段，要把许多基础数据录入电脑，并要随时应对运行中出现的各种问题，工作量是巨大的，过程是枯燥的，成绩却不是怎么明显，人们持观望的态度用疑惑的眼光审视着每个关系到自已的各个细节，这时领导的支持和鼓励显得尤为重要。所以，选择了信息化，就是选择了变革，各级领导应做好充分准备首先应从思想上认识到信息化是场革命，要做好与切旧的管理恶习作斗争的准备要加强对信息化知识的了解和学习，要从心灵深处认识到信息化是时代所需，是加强企业管理适应社会发展所需，不能盲从，同时也应看到实施信息化的困难和阻力直接参与关键环节和重大事项的讨论和计划制订工作，只是给予人力后企业管理转变的方向，并对预期的新的管理体系要有清晰的认识。在把握企业信息化整体思路之后，就可以按照效益与实务互利先局部后整体的原则，结合企业实际，走勤俭信息化之路。具体可分以下几步走第步，建立以财务为核心的财务信息化管理系统，把财务管理信息化作为公司信息化管理的切入点，步步地引导和推动其他管理环节逐步实现管理信息化。之所以把财务作为信息化的突破口，主要是因为财务是全公司的数据中心，公司生产经营情况最后各部门都需归集到财务先中心，后局部，有利于信息化建设的推进，不会因为个分支系统的失败而影响整个系统的推进和运行。只要第步走好了，以后各步就有经验和信心了。第二步，建立以存货管理为中心的供销存供应链管理系统，实现供应链的信息化管理。第三步，建立以生产控制为核心的生产成本管理系统。第四步，建立以工艺技术为中心的科研开发系统。第五步，建立电子商务网络系统，实现企业内外部信息资源的共享，全面实现企业管理信息化。选好软件，做好咨询。软件选择适当，不但可以节约大量资金，而且可以防止以后的各种后遗症同时软件的选择还要注意国家有关法律法规的规定以及各业务部门的专业需求。所以软件的选择定要慎重，要经过仔细的斟酌和考虑，它是信息化实施过程中的重中之重，许多企业信息化不成功，就是在软件的选择上走了许多弯路。软件选好后，另个因素也不能忽视，那就是软件实施的技术咨询服务队伍。因为个具有极强能力的技术咨询服务队伍，哪怕是实施个并不怎么好的软件，他们也能运用自己的知识和能力，让这个软件发挥到极致，并产生巨大的管理能量。所以，系统软件和技术服务队伍的选择都不能有半点马虎，否则会事倍功半，甚至会劳民伤财，无功而返。培养人才，持续发展。人才是企业管理信息化成功的关键，信息化方案的引进和启动只是信息化项目的开始，接下来的实施应用过程，才是信息化最难啃的硬骨头。外部软件咨询顾问是必需的，也是不可少的，但其不可能长期留在个企业，随时解决系统运行中出现的各学研究中国昆虫科学英乔海暄,段毅豪,马恩波蝗总科部分种类等位基因酶的比较研究英遗传学报马恩波,郑哲民五种稻蝗染色体核型和带带型的比较昆虫学报张大治，戴沛捷蜻蜓目昆虫的提取方法研究宁夏农学院学报张建珍，郭亚平，马恩波不同保存方式下蝗虫组织的提取及分析动物学杂志季维智,宿兵遗传多样性研究的原理与方法杭州浙江科学出版社,谭竹钧,韩雅莉,苏和风雏蝗属六种蝗虫基因组的比较研究内蒙古大学学报自然科学版张民照,康乐飞蝗总抽提及其分析条件的摸索动物学研究田英芳，黄刚，郑哲民，魏朝明种简易的昆虫基因组提取方法陕西师范大学学报自然科学版印红，刘晓丽,王彦芳,张道川,赵晓瑜种改进的昆虫基因组的提取方法河北大学学报自然科学版。液的液的蛋白酶操作方法取样将蝗虫干标本和无水乙醇浸制标本用无菌三蒸水冲洗次用无菌三蒸水浸泡以上,弃水弃去浸泡液,取蝗虫后足股节肌肉,剪碎材料于装有匀浆液液的管中。研磨与离心管相匹配的玻璃棒将样品研磨至匀浆状。加入的和的蛋白酶。水浴水浴，直至混合液消化得很清亮为止。酚抽提在混合液中加入等体积的平衡酚，上下缓慢颠倒十次，切勿剧烈振荡，在台式高速离心机上离心,取上清液。重复步骤直至水相与酚相的界面处看不到白色的蛋白质层为止，取上清液。氯仿∶异戊醇∶抽提上清液中加入等体积的氯仿∶异戊醇，上下缓慢颠倒十次，在台式高速离心机上离心,取上清液再次重复此步骤。沉淀在上清液中加入体积的冷无水乙醇预先置冰箱内沉淀冰箱内放置，离心,弃上清液。洗涤在留有沉淀的离心管中加入的冷乙醇洗涤，在台式高速离心机上离心,倾去上清液。保存自然干燥，加适量或无菌三蒸水溶解，于保存备用。饱和法,试剂及溶液浸泡液。消化液。蛋白酶饱和溶液异丙醇的乙醇。操作方法乙醇固定标本用无菌三蒸水浸泡以上,弃水对干标本,用浸泡液浸泡以上，弃去浸泡液,取蝗虫后足股节肌肉。剪碎材料,加消化液于消化以上，然后加蛋白酶，继续消化。加饱和,涡旋,离心。转移上清,等体积异丙醇沉淀,离心,弃上清。用的乙醇洗涤沉淀，自然干燥，溶解后,于保存备用。法,试剂及溶液缓冲液浸泡标本雌，雄。，图饱和法提取的琼脂糖凝胶电泳图月日标准分子量干制标本，为雌性，雄乙醇浸泡标本雌，雄。，。图法提取的琼脂糖凝胶电泳图月日标准分子量干制标本雌，雄乙醇浸泡标本雌,雄，。结果与分析般认为，电泳检测后，若样品条带整齐无拖尾，则说明较完整，也无杂质。反之，则认为样品有降解或混有杂质。通过检测发现本实验的的部分样品有明显的条带，但都有不同程度的降解。从图可以看出，用蛋白酶消化法提取的总部分在处有亮带，基本无拖尾，说明提取的大分子较为完整。饱和法提取的总从图可以看出，此方法提取的效果相对较差，弥散较大,未出现单条浓带，抹迹现象严重，以至用此方法提取的基因组都无法用以扩增。用法提取的从图可以看出，干标本只有个样品提出了明显的条带，无水乙醇浸泡的标本提取的总有亮带在处,但大部分都有拖尾,且拖尾现象比较严重，说明样品有降解或混有杂质。三种方法比较结果表明，蛋白酶消化法提取