1、体乳腺癌细胞购于中山大学细胞库。在接种后大约天后，癌细胞基本长至成熟，这时需要对癌细胞进行药物亚甲基蓝的注射和冷冻处理。步骤需要对接种过肿瘤细胞的老鼠进行麻醉所用麻醉药为自配几分钟过后对肿瘤的部位进行脱毛处理，完毕后用的无菌医用注射器对肿瘤组织进行静脉注射药物约.，然后等约分钟取下肿瘤细胞，将其冷冻到双步激光质谱法对动物组织中药物分子的原位检测的冰箱里小时。步骤小时后取出肿瘤组织将其固定在冷冻切片机上切片机在的环境下工作，般需要提前开机.小时对承载基底石墨进行超声处理溶液为乙醇约.小时在冷冻切片机上对组织进行切片处理，厚度大约为放入质谱仪进行检测。该实验系统的原理图如图所示为本实验装置的结构示意图图实验装置示意。

2、国优质地热带，拥有充足的地热资源。 温泉水质清澈透明，属弱碱性软水含硫温泉，交点。 以生态游为主题的享受国家政策支持，特别是诺恩公司作为农 业产业化龙头企业，水产养殖享受国家全额贴息政策，水产养殖享 受国家免税政策支持作为国家重点支持的水产品科研基地，享受 天津科研策环境 公司所在区域为生态养殖区生态居住区。地处未来滨海新区 增长的中心，紧邻星级旅游景区海滨浴场。同时也是临港 工业区临港产业区，南港港区，滨海生态居住区和生态养殖区的 黄金交策环境 公司所在区域为生态养殖区生态居住区。地处未来滨海新区 增长的中心，紧邻星级旅游景区海滨浴场。同时也是临港 工业区临港产业区，南港港区，滨海生态。

3、物分子的原位检测图注有的肿瘤组织图谱下图是我们对未给药肿瘤组织以及预先注射了药物的肿瘤组织进行对比的实验图谱。图纯肿瘤组织与给药肿瘤组织的对比双步激光质谱法对动物组织中药物分子的原位检测从上述图谱中我们可以看出在组织部分，未给药的肿瘤组织与预先注射过药物的组织在组织信号的部分完全的重合，但注射过药物的组织在远离组织背景信号的区域有明显的药物分子信号。并且以上图谱均是在分的扩散，然后将其取下并冰冻在的冰箱里冰冻小时，然后放在冷冻切片机进行切片，最后在飞行时间质谱仪中进行检测。其具体步骤如下在广东省实验动物监测所购买了实验用的老鼠，在华南师范大学生物光子学研究院的动物房进行饲养天后对其进行表皮接种，所用的癌细胞为人。

4、条高速公路。其中沿海高速近在咫 尺，最远的也不超过公里。未来还将建有津石高速和南港高速。 加上临近的省级公通畅，心旷神怡。 第页共页 最佳赶海拾贝风景区这里滩涂广阔而平缓，待退潮时可乘坐 三轮机动车或者直接趟水去赶海拾贝，捕鱼摸虾，捉蟹踩蛤，海上 看日出，海上垂钓，还有海上鱼礁。 交通优势富含硫锂锌偏 硅酸等保健矿物质。 海水资源坐落于塘沽海滨浴场南侧，东临大海，是天津最佳 海洋风景区，距离海边近在咫尺。 气候环境资源是天津负氧离子含量最高地方，在此地就会感 觉呼吸项目政策支持，享受政府研发资金支持。作为国家珍品保 种基地，享受国家政策补贴。 资源优势 充足的地热资源地处中。

5、所用的小鼠级，雌性三周龄购于广东省实验动物监测所。将药物亚甲基蓝通过表皮注射的方法将其注射在老鼠的肿瘤部位经过定的时间使其在肿瘤部位有较为充分的扩散，然后将其冰冻在的冰箱里冰冻小时，然后放在冷冻切片机进行包埋切片，组织切边的厚度大约在之间，最后在飞行时间质谱仪中进行检测。实验中所得到的图谱如图所示，在图中我们可以看到，在没有激光的情况下，看不到任何的质谱信号，进而可以断定此谱图是在的电离下得到。由谱图我们可以得出在激光的电离作用下得到的组织信号完整并且探测到药物分子亚甲基蓝的信号，亚甲基蓝的信号所在区域远离组织信号区域，这样可以较好的避免组织背景信号的影响，提高检测的信噪比和灵敏度。双步激光质谱法对动物组织中药。

6、图本装置包括激发光源组件信号采集组件，进样系统，光路转换系统。数字触发器控制所有工作组件实现如下工作流程触发激光组件输出激光脉冲的双步激光质谱法对动物组织中药物分子的原位检测同时同步输出触发信号触发示波器采集质谱信号，进样系统中的平移装置在电机的带动下进行水平移动，采集到的离子信号传输至外界储存装置被记录，记录完成之后通过平移台平移定角度，进行下次采集。其中激发光源组件中激光器发出的脉冲激光束，由光分束镜分为两束，透射光束在全反射棱镜组反射后，再经扩束镜，聚焦镜，其中扩束镜和聚焦镜固定在气体池的前端。气体池中产生的真空紫外激光经聚焦汇聚到电离区，另外束解析激光经过系列组全反射棱镜后经聚焦投射到安装在步进电机推进。

7、居住区和生态养殖区的 黄金交点。 以生态游为主题的享受国家政策支持，特别是诺恩公司作为农 业产业化龙头企业，水产养殖享受国家全额贴息政策，水产养殖享 受国家免税政策支持作为国家重点支持的水产品科研基地，享受 天津科研项目政策支持，享受政府研发资金支持。作为国家珍品保 种基地，享受国家政策补贴。 资源优势 充足的地热资源地处中国优质地热带，拥有充足的地热资源。 温泉水质清澈透明，属弱碱性软水含硫温泉，富含硫锂锌偏 硅酸等保健矿物质。 海水资源坐落于塘沽海滨浴场南侧，东临大海，是增强并且达到最佳。本实验中，我们选取延迟时间.做为实验条件。纯生物组织的质谱探测本实验的关键是对生物组织样本进行。

8、聚焦点产生。据此可以断定，本实验装置中的确产生了激光且整套质谱系统运行正常。.实验结果及讨论纯亚甲基蓝样品分析图为纯的亚甲基蓝粉末涂布在石墨或刚玉的基底上，然后安装在进样杆的前端，送进质谱仪中进行检测所得到的图谱。在实验中，解析激光的为脉宽经聚焦镜聚焦到电离区的中央形成个面积约为.的聚焦点，对样品进行解析，能量约为。经过大约.的延迟后，开启电离激光，对解析的气团进行电离，然后通过离子透镜将电离的离子引出，并用离子检测器进行收集。图不同条件下乙醇的光电离质谱.双步激光质谱法对动物组织中药物分子的原位检测图纯亚甲基蓝的双步激光质谱图图谱中我们发现，气化后的对于激光的吸收截面很好，得到很好的图谱。同时在挡住电离激光后。

9、探测研究，因为其厚度以及光强都无任何参考可循，经过大量的实验探究，我们发现厚度在的时候得到的质谱信号最好。并且其解析激光的能量对比纯的而言会有稍微的增强，大约为.，这可能是由于组织本身的特征所决定的。实验结果如图所示，由实验图谱可知，在的激光解析和激光的电离下组织中的大部分物质都被激光电离成了碎片。碎片的分子量基本都在以下。在挡住电离激光只有解析激光的情况下，我们并未发现任何信号出现。由此可以判断质谱信号是单光子电离的结果。在上述谱图中出现的信号分布情况可以推断这些碎片主要来源是组织内部的氨基酸或者短肽的碎片。双步激光质谱法对动物组织中药物分子的原位检测图纯肿瘤组织的双步激光质谱图预先给药生物组织的质谱探测实验。

10、率计,读出。利用数字示波器记录质谱信号次平均。图分别是乙醇和的混合气体得到的质谱图。其中图为正常实验条件，倍频气体池中充入和的混合气体，压力是，同时通入样品乙醇和的混合气体。的实验条件是倍频气体池正常冲入气体，但是样品不含乙醇，仅有。的实验条件是正常通乙醇和的样品气体，但是把倍频气体池中的和的混合气体抽掉。图中给出了乙醇的母体和碎片离子，其中的为乙醇的母体，。而和分别表示和。对比两组数据，发现当载气中不混有乙醇的时候，仅有的的峰出现。通过组数据，发现随着和的混合气体的逐渐抽走，信号强度随之下降，最后消失。在本实验中，光必须由光经过混合双步激光质谱法对动物组织中药物分子的原位检测和的气体池时，通过三倍频作用，在光。

11、，我们看到质谱信号消失，从而进步判定，此信号为激光单光子电离形成的。图谱中的主峰为的母体离子质量数为。峰值，为结合个水分后形成的离子峰，峰值为主峰脱掉个甲基后形成的离子碎片。在实验中我们选取母体峰做为标志信号峰。对两束光之间延迟的优化双步激光质谱法最大的优点是解析激光和电离激光在时间和空间上是分开的，因此可以根据实际的需要很方便的单独优化两束激光的能量和波长以及他们之间的延迟。在本实验中我们以纯的亚甲基蓝为例，对两束光之间的延迟条件进行优化，得到图谱双步激光质谱法对动物组织中药物分子的原位检测图双步激光延迟与信号强度的分布图从图谱中我们发现，两束光之间延迟的范围是。当两束光之间的延迟达到.的时候，信号得到急速的。

12、的进样杆前端的样品承载体上，解析样品，产生气团，经过定时间的延迟后，由经气体池产生的真空紫外激光对其进行电离，产生的离子经离子透镜引出后在飞行管中自由飞行，到达离子检测系统，最后由示波器完成采集接收并存储到外接的高速采集优盘，完成记录。使用软件编写的程序做后续图像处理。本文通过双步激光实验系统，对种作为光动力治疗药物亚甲基蓝在癌症组织进行原位检测。并对实验的结果进行讨论。实验条件的验证本实验首先选用乙醇分子作为试验样品来确认激光的产生和对实验条件及整套的质谱系统进行优化。在实验过程中，使用乙醇和的混合气体作为样品气体，其中乙醇为饱和蒸气压.，混合气体压强为.个大气压压强值由负压表读出。激光能量为，此能量由激光功。

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