在混合药物平板和单药平板上对喹诺酮类药物的值下降不明显。选取的这株喹诺酮类药物敏感性下降菌株染色体上的拓扑异构酶Ⅳ编码基因只有个突变位点，且全。在氟喹诺酮类药物敏感性下降的菌株中选取株菌其中包括携带基因菌株株进行外排泵筛选实验，其中有株在含有的喹诺酮类药物混合琼脂平板上的值比喹诺酮类单药琼脂平板左氧氟沙星莫西沙星的耐药率也均在以上。株氟喹诺酮类药物敏感性下降的金黄色葡萄球菌中含有基因的菌株有株含有基因的菌株有株，其中株同时携带这两种基因，未发现其他类型基因古霉素和利奈唑胺，敏感率均达到其次为呋喃妥因敏感率为，和复方新诺明敏感率为而耐药率最高的为青霉素敏感率仅有其次为红霉素敏感率为四环素利福平环丙沙星，伤口分泌物，脓液，尿液，导管流出液，引流液,腹水，以及敷料等其他标本,。株金黄色葡萄球菌对临床常见几类抗菌药物敏感性最好的是万及基因的流行性。温州医科大学硕士学位论文结果本次研究共收集年月年月三年间温州医科大学附属第医院临床送检标本中分离到的非重复金黄色葡萄球菌株，其中以痰液标本为主，占，其余依次为血液基因在金黄色葡萄球菌中的分子定位脉冲场凝胶电泳和多克隆位点序列分型方法，研究携带基因的金黄色葡萄球菌的同源性以设计引物，通过普通方法依次筛选氟喹诺酮类药物敏感性下降耐药菌中介菌菌株中的种基因和分子杂交技术研究评价细菌外排泵机制对氟喹诺酮类药物耐药的贡献通过基因序列分析，检测细菌喹诺酮类耐药决定区中基因编码合成拓扑异构酶Ⅳ亚单位以及基因编码合成促旋酶亚单位的突变位点径的检测，分析本院金黄色葡萄球菌的耐药特性在含有氟喹诺酮类药物的琼脂平板上添加定浓度的外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙，测定金黄色葡萄球菌在这种混合琼脂平板上新的值，从耐药表型上评径的检测，分析本院金黄色葡萄球菌的耐药特性在含有氟喹诺酮类药物的琼脂平板上添加定浓度的外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙，测定金黄色葡萄球菌在这种混合琼脂平板上新的值，从耐药表型上评价细菌外排泵机制对氟喹诺酮类药物耐药的贡献通过基因序列分析，检测细菌喹诺酮类耐药决定区中基因编码合成拓扑异构酶Ⅳ亚单位以及基因编码合成和分子杂交技术研究评价细菌外排泵机制对氟喹诺酮类药物耐药的贡献通过基因序列分析，检测细菌喹诺酮类耐药决定区中基因编码合成拓扑异构酶Ⅳ亚单位以及基因编码合成促旋酶亚单位的突变位点径的检测，分析本院金黄色葡萄球菌的耐药特性在含有氟喹诺酮类药物的琼脂平板上添加定浓度的外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙，测定金黄色葡萄球菌在这种混合琼脂平板上新的值，从耐药表型上评径的检测，分析本院金黄色葡萄球菌的耐药特性在含有氟喹诺酮类药物的琼脂平板上添加定浓度的外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙，测定金黄色葡萄球菌在这种混合琼脂平板上新的值，从耐药表型上评价细菌外排泵机制对氟喹诺酮类药物耐药的贡献通过基因序列分析，检测细菌喹诺酮类耐药决定区中基因编码合成拓扑异构酶Ⅳ亚单位以及基因编码合成促旋酶亚单位的突变位点设计引物，通过普通方法依次筛选氟喹诺酮类药物敏感性下降耐药菌中介菌菌株中的种基因和分子杂交技术研究基因在金黄色葡萄球菌中的分子定位脉冲场凝胶电泳和多克隆位点序列分型方法，研究携带基因的金黄色葡萄球菌的同源性以及基因的流行性。温州医科大学硕士学位论文结果本次研究共收集年月年月三年间温州医科大学附属第医院临床送检标本中分离到的非重复金黄色葡萄球菌株，其中以痰液标本为主，占，其余依次为血液，伤口分泌物，脓液，尿液，导管流出液，引流液,腹水，以及敷料等其他标本,。株金黄色葡萄球菌对临床常见几类抗菌药物敏感性最好的是万古霉素和利奈唑胺，敏感率均达到其次为呋喃妥因敏感率为，和复方新诺明敏感率为而耐药率最高的为青霉素敏感率仅有其次为红霉素敏感率为四环素利福平环丙沙星左氧氟沙星莫西沙星的耐药率也均在以上。株氟喹诺酮类药物敏感性下降的金黄色葡萄球菌中含有基因的菌株有株含有基因的菌株有株，其中株同时携带这两种基因，未发现其他类型基因。在氟喹诺酮类药物敏感性下降的菌株中选取株菌其中包括携带基因菌株株进行外排泵筛选实验，其中有株在含有的喹诺酮类药物混合琼脂平板上的值比喹诺酮类单药琼脂平板上的值下降超过倍包括倍。其余株菌在混合药物平板和单药平板上对喹诺酮类药物的值下降不明显。选取的这株喹诺酮类药物敏感性下降菌株染色体上的拓扑异构酶Ⅳ编码基因只有个突变位点，且全部为，引起的氨基酸改变为促旋酶编码基因在多个碱基位置发生突变，其中有株有株有株有株有株，引起的氨基酸改变依次是。分子杂交实验中，基因探针在质粒图谱膜上没有任何杂交信号，而在混合基因组电泳产物转移膜上出现杂交信号。脉冲场凝胶电泳发现这些基因具有较高同源性，株阳性金黄色葡萄球菌分为个克隆型，主要克隆有株，均为克隆克隆有株，全部为型克隆株，为型株阳性菌株均为同个克隆，且全部为克隆型。温州医科大学硕士学位论文结论临床分离的金黄色葡萄球菌对目前常见的几类抗菌药物不同程度耐药，但是对万古霉素利奈唑胺以及氟喹诺酮类环丙沙星左氧氟沙星抗菌药物具有良好的敏感性，仍然可以作为临床上治疗金黄色葡萄球菌感染的首选用药之。细菌外排泵机制在金黄色葡萄球菌对喹诺酮类药物的耐药产生过程中扮演了定作用。临床上分离的金黄色葡萄球菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药机制主要是细菌拓扑异构美国国家菌种保藏库氨苄青霉素基因序列相似性搜索工具碱基对羰基氰基氯苯腙环丙沙星临床和实验室标准化委员会双蒸水脱氧核糖核酸三磷酸脱氧核苷溴化乙锭乙二胺四乙酸红霉素头孢西丁庆大霉素Ⅳ拓扑异构酶亚单位促旋酶亚单位中介培养基左旋氧氟沙星利奈唑胺琼脂米勒辛顿酪蛋白琼脂温州医科大学硕士学位论文最低抑菌浓度预防突变浓度诺氟沙星呋喃妥因苯唑西林聚合酶链反应脉冲场凝胶电泳青霉素蛋白酶喹诺酮类药物耐药决定区域喹诺酮类药物耐药基因耐药利福平敏感复方新诺明十二烷基硫酸钠分子杂交转膜缓冲液三羟甲基氨基甲烷四环素酶嗜热菌聚合酶氨基丁三醇乙二胺四乙酸冰醋酸缓冲液氨基丁三醇乙二胺四乙酸硼酸缓冲液万古霉素温州医科大学硕士学位论文金黄色葡萄球菌耐药特性及对氟喹诺酮类药物耐药机制研究中文摘要目的分析温州医科大学第附属医院年三年间临床送检的各种标本中分离的金黄色葡萄球菌耐药特性，评价本院金黄色葡萄球菌的耐药形势，为临床用药提供理论依据研究年三年间分离的金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮类抗菌药物的耐药特性及金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制研究金黄色葡萄球菌中喹诺酮类耐药新基因在金黄色葡萄球菌中的分布特征以及分子定位研究基因阳性菌株的同源性，评价基因的爆发流行风险。方法回顾性调查年间温州医科大学附属第医院不同病区病人标本中分离的金黄色葡萄球菌的临床分布情况，通过对临床上几种抗菌药物的