1、原沉积导致心脏重塑，产生恶性循环，促进心力衰竭的发生发展。慢性心力衰竭患者高浓度的血管紧张素水平预示着不良预后。相反，临床上慢性心力衰竭患者应用受体阻断剂可改善预后。硫化氢是近年来新发现的第三种气体信号分子，在心血管系统具有扩张血管降低血压抑制心肌纤维化改善内皮功能改善心肌缺血再灌注损伤缩小动脉粥样硬化斑块等生理效应。那么既然硫化氢可抑制心肌纤维化逆转心肌重构，而且血管加压素可促进心脏成纤维细胞增殖，那么是否硫化氢可直接抑制血管加压素的该效应呢本研究结果发现，处理的大鼠心脏成纤维细胞加入干预后其细胞吸光度值明显降低，提示硫化氢在定浓度范围内表现出浓度依耐性抑制血管加压素诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖。与先前研究提示硫化氢的心脏保护作用具有浓度依赖性的结果不约而同。吸光度值大致反。

2、酶联免疫吸附试验，检测培养液中的浓度采用酶联免疫吸附试验测定的浓度，单位为，严格按照试剂盒说明书的进行检测，具体如下样本处理及要求细胞培养上清样本收集空白对照不同万方数据处理组的细胞上清，保存。取出试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。标准品稀释原则使用前离心。每瓶临用前用样品稀释液稀释至，盖好后静置，然后反复摇动以助溶解，准备个管，向个管中各加标准品稀释液。在第管中加标准品，混匀然后从第管中取加到第二管中，混匀，依次类推对标准品做系列倍比稀释。步骤加样分别设标准孔空白孔待测孔。空白孔加样品稀释液，其余孔分别加标准品或待测样品。将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动，封板后置温育。抗体孵育弃去液体，甩干，不用洗涤，每孔。

3、组比较万方数据四讨论慢性心力衰竭是临床上的常见病多发病，其致死率致残率极高，给人们生活质量带来严重威胁。近年来，对于慢性心力衰竭的诊断和治疗虽然有了显著的提高，尤其在药物治疗和介入干预方面，但是均不能从根本上防治其发生发展。国内外学者对慢性心力衰竭的发病机制进行了大量研究，发现神经内分泌因素是其发生发展的项重要影响因素。已经证实血管加压素具有分裂原作用，能够促进心脏成纤维细胞增殖和心肌细胞肥大，在慢性心力衰竭的发生发展中起重要作用。本研究通过细胞体外培养发现干预可使大鼠心脏成纤维细胞吸光度值及合成期期比例明显升高，提示血管加压素可促进大鼠心脏成纤维细胞的增殖，与先前相关研究结论致。血管加压素通过兴奋受体，促进血管平滑肌收缩及抗利尿作用而增加心脏前后负荷刺激心肌成纤维细胞增殖和。

4、浓度较组明显降低而且组孔浓度显著低于对照组。结论血管加压素能诱导大鼠心脏成纤维细胞的增殖硫化氢能抑制血管加压素所致的心脏成纤维细胞的增殖硫化氢对血管加压素所致的大鼠心脏成纤维细胞增殖的影响可能与其抑制钙调神经磷酸酶活性有关。关键词硫化氢血管加压素慢性心力衰竭心脏成纤维细胞钙调神经磷酸酶万方数据四，万方数据，验利用实验初步观察细胞增殖趋势。具体步骤如下细胞准备培养细胞至满瓶，收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度取块孔板，每孔加入细胞悬液，铺板使待测细胞为孔边缘孔用无菌填充以消除边缘效应，每组设置个复孔，孵箱内培养后，分别加入培养液和上述浓度的药物处理，培养箱继续培养每孔加入溶液，继续细胞培养箱培养小心吸去孔内培养液每孔加入，使结晶物充分溶解加后分钟内，用酶标仪检测各孔波长的吸光值。。

5、照组明显增高组中各孔中的吸光度比较孔吸光度值分别为，呈浓度依赖性降低，其中孔吸光度值最低均但是组的吸光度值较组明显降低均组孔吸光度值分别为，均较对照组低均见图图各组大鼠心脏成纤维细胞吸光度值比较，与对照组比较万方数据均，与组比较及组间比较，与对照组比较图组与对照组细胞吸光度值比较图组中各孔细胞吸光度值比较均各组合成期期细胞比例比较组组细胞中期细胞比例显著万方数据高于对照组均但是组较组期细胞比例明显降低，而且组细胞中期细胞比例低于对照组。见图图流式细胞图万方数据图各组合成期细胞比例比较，与对照组比较，与组比较与组比较各组细胞上清液中水平的比较组组上清液水平较对照组明显增高均但是组孔浓度较组明显降低而且组孔浓度显著低于其他各组。见图图各组细胞上清液水平比较，与对照组比较，与组比较。

6、应活细胞数量，而细胞周期中期比例更能准确反应细胞增殖的状态。本研究结果发现处理后期细胞比例增高，而加入干预后明显下降，提示可能通过抑制大鼠心脏成纤维细胞进入期，阻止细胞增殖，逆转心脏重构。硫化氢的心脏保护作用机制复杂，可能与阻止白细胞滚动粘附及渗出，抑制核因子κκ的活化，抑制线粒体细胞色素氧化酶的产生，万方数据硕士学位论文硫化氢对血管加压素介导大鼠心脏成纤维细胞增殖的影响及机制探讨研究生姓名赵正春指导教师姓名职称邓平教授学科专业名称内科学心血管专业研究方向心血管临床年月分类号密级编号万方数据南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研。

7、生物素标记抗体工作液取生物素标记抗体加生物素标记抗体稀释液的比例配置，轻轻混匀，在使用前内配置，温育。洗涤小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置后弃去，如此重复次，拍干。加酶每孔加入辣根过氧化物酶标记亲和素工作液同生物素标记抗体工作液，温育。洗涤操作同，重复次。显色每孔加底物溶液，避光显色。终止每孔加终止液，终止反应此时蓝色立转黄色。测定以空白空调零，波长依序测量各孔的吸光度值。测定应在加终止液后以内进行。计算各标准品及样品值减去空白孔值后作图，用标准品的浓度作为纵坐标，值为横坐标，绘出标准曲线，从而计算各样品孔中的浓度。流式细胞术，检测细胞周期万方数据细胞预处理培养大鼠心肌成纤维细胞至满瓶，以个的细胞密度接种孔细胞培养板，细胞培养箱培养小时换液，待细胞汇合度时。

8、子内皮源性氧化氮合成酶心脏成纤维细胞万方数据二硫化氢对血管加压素介导的大鼠心脏成纤维细胞增殖的影响及机制探讨硕士研究生赵正春导师邓平教授目的通过观察硫化氢对血管加压素，诱导大鼠的心脏成纤维细胞，增殖的影响及其与钙调神经磷酸酶，水平的关系，探讨硫化氢对大鼠心脏成纤维细胞增殖的影响及其可能机制。方法细胞培养和处理复苏传代培养细胞干预将大鼠心脏成纤维细胞分为孔进行培养，每孔含细胞数个，共分成四组组组即硫化氢组组及对照组。其中，组共孔，予以处理组包括孔，分别予以浓度的硫氢化钠处理组包括孔，均予处理，同时分别予以浓度的硫氢化钠处理对照组孔，无干预。各组细胞培养干预小时后留取上清液，收集细胞。采用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐法检测各组大鼠心脏成纤维细胞的增殖水平采用流式细胞分析仪技术检测各组。

9、始进行以上浓度的加药处理。分别消化收集各组已预处理的大鼠心肌成纤维细胞，用无血清培养基重悬细胞，调整细胞密度为，收样进行流式检测。步骤分别用胰酶消化液消化并制成细胞悬液，吸细胞悬液离心。弃上清。用缓冲液洗次，离心，弃上清。加入预冷乙醇，吹打均匀，固定过夜。洗涤去乙醇，洗两遍。加入，避光孵育。用流式细胞仪检测期细胞比例。实验分组本实验分大组对照组组包括孔，浓度依次为组组包括孔，浓度依次为，均以处理。共孔，干预小时后分别收集细胞上清液，检测其吸光度值。其后取组组对照组及组，共孔，行检测上清液中浓度检测期细胞比例。统计学方法应用软件计量资料以均数标准差表示，对计量资料进行正态分布及方差齐性检验，两两比较采用检验。以为差别有统计学意义。万方数据三结果各组细胞吸光度值比较组的吸光度值较。

10、关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到中国学位论文全文数据库，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。作者签名导师签名年月日年月日万方数据目录英文缩略词表二中文摘要三英文摘要四论文正文引言二材料和方法实验仪器与试剂研究方法大鼠心脏成纤维细胞体外培养试剂制备实验酶联免疫吸附试验流式细胞术研究分组统计学方法三结果四讨论五结论五参考文献六综述七已发表文章万方数据八致谢万方数据英文缩略词表缩写词英文全称中文全称硫化氢血管加压素慢性心力衰竭心肌纤维化心肌细胞外基质基质金属蛋白酶蛋白激酶κ核因子κ半胱氨酸转移酶丙酮酸巯基转硫酶钙调神经磷酸酶硫氢化钠酶联免疫吸附试验流式细胞术胱硫醚合成酶胱硫醚裂解酶二甲基噻唑二苯基四唑溴盐法金属蛋白组织抑制。

11、脏成纤维细胞中合成期期细胞的百分比采用酶联免疫吸附试验测定各组细胞培养上清液中浓度。结果组的吸光度值较对照组明显增高组中孔吸光度值分别为，呈浓度依赖性降低，其中孔吸光度值最低均但是组的吸光度值较组明显降低均组孔吸光度值分别为，均万方数据较对照组低均。组组细胞中期细胞比例显著高于对照组均但是组较组期细胞比例明显降低，而且组细胞中期细胞比例低于对照组。组组上清液水平较对照组明显增高均但是组孔浓度较组明显降低而且组孔浓度显著低于对照组。结论血管加压素能诱导大鼠心脏成纤维细胞的增殖硫化氢能抑制血管加压素所致的心脏成纤维细胞的增殖硫化氢对血管加压素所致的大鼠心脏成纤维细胞增殖的影响可能与其抑制钙调神经磷酸酶活性有关。关键词硫化氢血管加压素慢性心力衰竭心脏成纤维细胞钙调神经磷酸酶万方数据。

12、成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名年月日南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读硕博硕士学位期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得以其它单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留使用学位论文的规定，即学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印缩印或其它手段保留学位论文学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入中国优秀博硕士学位论文全文数据库，并按中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程规定享受。

参考资料：

[1]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18060（第21页，发表于2022-06-24）

[2]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18060（第21页，发表于2022-06-24）

[3]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18060（第21页，发表于2022-06-24）

[4]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）

[5]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）

[6]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18078（第26页，发表于2022-06-24）

[7]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）

[8]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）

[9]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号250（第26页，发表于2022-06-24）

[10]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）

[11]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号176（第26页，发表于2022-06-24）

[12]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）

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[14]绘本故事：我的幸运一天（优） 编号18060（第19页，发表于2022-06-24）

[15]绘本故事：我的幸运一天（优） 编号18060（第19页，发表于2022-06-24）

[16]绘本故事：我的幸运一天（优） 编号18060（第19页，发表于2022-06-24）

[17]绘本故事：我的幸运一天（优） 编号18060（第19页，发表于2022-06-24）

[18]绘本故事：我的幸运一天（优） 编号18060（第19页，发表于2022-06-24）

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[20]绘本故事：我的幸运一天（优） 编号18060（第19页，发表于2022-06-24）