1、“.....艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易发生恶性肿瘤。逆转录酶或抗体抗原抗体特异性结合或淋巴监控和清除解析属于逆转录病毒，用基因工程制备的蛋白时，可先提取它的，再在逆转录酶的作用下合成，再构成基因表达载体并导入受体细胞。目的蛋白进入机体后，作为抗原刺激机体产生相应的分泌蛋白即抗体。由于抗原抗体的结合具有特异性，故该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的。进入机体后，主要攻击机体的淋巴细胞，从而降低患者的免疫力。免疫系统可监控并清除体内已经衰老或被损坏的细胞以及癌变的细胞。福建高考是种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含基因的表达载体如图所示，并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是。构建含基因的表达载体时，需选择图中的限制酶进行酶切。经酶切后的载体和基因进行连接......”。

2、“.....为鉴定这种连接方式，选择Ⅰ酶和Ⅰ酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的片段进行电泳分析，结果如图所示。图中第泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测基因是否成功表达，可用相应的与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到定密度时，需进行培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。使细胞分散开Ⅰ抗体传代解析本题考查动物细胞培养和基因工程的相关知识，考查学生推理能力，运用所学知识分析问题和解决问题的能力，难度适中。动物细胞培养时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶作用，使细胞分散开。质粒上有Ⅰ识别位点，而且在启动子之后，所以选用Ⅰ限制酶进行酶切。泳道仅有种条带，属于载体自连泳道有两种条带，且长度分别与质粒和基因长度相同，为正向连接泳道有两种条带，长度与Ⅰ酶切后结果相同，为反向连接。检测基因是否表达采用抗原抗体杂交法。培养动物细胞采用动物细胞培养法......”。

3、“.....需要进行分瓶，进行传代培养。课标全国卷Ⅰ研究者用抗原分别免疫只同种小鼠和，每只小鼠免疫次，每次免疫周后测定各小鼠血清抗体的效价能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数，结果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的淋巴细胞染色体数目条，并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞染色体数目条按定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题制备融合所需的淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到以上，则小鼠最少需要经过次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的这只免疫小鼠中，最适合用于制备淋巴细胞的是小鼠，理由是。细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有，体系。杂交瘤细胞中有个细胞核，染色体数目最多是条。未融合的淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是。四小鼠的抗体效价最高淋巴细胞相互融合形成的细胞......”。

4、“.....且融合率达不到不能无限增殖解析据图分析，第四次注射后小鼠的血清抗体效价均达到以上，小鼠的淋巴细胞产生抗体效价最高，最适用于制备单克隆抗体。融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外，还有骨髓瘤细胞和淋巴细胞的自身融合产物，由于细胞膜具有流动性，且诱导之后的细胞融合不具有特异性，故体系中会出现多种类型的细胞。杂交瘤细胞形成后，小鼠的免疫淋巴细胞核与其骨髓瘤细胞核会融合形成个细胞核。小鼠的淋巴细胞染色体数目条和骨髓瘤细胞染色体数目条融合后，染色体可达条。未融合的淋巴细胞经多次传代培养后，仍然不是能恶性增殖的细胞，同时正常细胞的分裂次数是有限的。海南高考下图是将细菌的基因导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图。据图回答获得有两条途径是以的为模板，在酶的催化下，合成互补的单链，然后在的作用下合成双链，从而获得所需基因二是根据目标蛋白质的序列，推测出相应的序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其的序列......”。

5、“.....利用技术扩增时，需要在反应体系中添加的有机物质有种脱氧核糖核苷三磷酸和耐热性的聚合酶，扩增过程可以在扩增仪中完成。由和载体拼接形成的通常称为。在基因工程中，常用处理，其目的是。逆转录聚合酶氨基酸脱氧核苷酸引物模板基因基因表达载体使其成为感受态细胞，有利于其吸收重组分子解析在逆转录酶的催化下，以基因产生的为模板可以获得与互补的单链，以该单链为模板，在聚合酶的作用下可合成双链根据目标蛋白质的氨基酸序列，根据密码表可推测出相应的序列，然后根据碱基互补配对原则可推测出其中的脱氧核苷酸序列，再通过化学方法利用合成仪合成所需基因。利用扩增目的基因时，需要提供目的基因作为模板，添加引物用来引导子链的形成，添加四种脱氧核糖核苷三磷酸即作为原料，耐高温的聚合酶来催化子链的形成扩增过程可在扩增仪中完成。目的基因和运载体拼接形成的通常称为基因表达载体重组质粒。基因工程中，常用处理细菌细胞，使之成为感受态细胞，容易吸收周围环境中的分子......”。

6、“.....命题规律及预测本部分内容每年都有所涉及，基因工程部分主要考查基因工程的操作工具步骤及应用，考查基因工程时常和细胞工程胚胎工程蛋白质工程相联系，理综试卷中，本部分均以非选择题形式出现，以专门侧重考查个工程为主，相关到其他的生物工程。预测年高考仍然会沿用这个模式，也可能有两个空涉及到必修。考点聚焦升知能考点基因工程基因工程的操作步骤目的基因的获取从基因文库中获取利用技术扩增用化学方法人工合成基因表达载体的构建组成目的基因启动子终止子标记基因。构建过程将目的基因导入受体细胞植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术感受态细胞法用处理受体细胞受精卵体细胞受精卵原核细胞目的基因的检测与鉴定易错母题探究阅读如下资料资料甲科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠”科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。资料乙溶菌酶在温度较高时易失去活性......”。

7、“.....使其表达的溶菌酶的第位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第位的半胱氨酸之间形成了个二硫键，提高了溶菌酶的耐热性。回答下列问题资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用法。构建基因表达载体常用的工具酶有和。在培育转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是。显微注射限制性核酸内切酶连接酶感染植物将目的基因转移到受体细胞中第编专题整合突破专题九现代生物科技第讲基因工程和细胞工程高考调研明方向重庆高考下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞反转录获得表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原起点借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用解析人肝细胞中胰岛素基因不表达，通过人肝细胞反转录不能得到胰岛素基因，项错误基因表达载体的复制原点和启动子是不同的位点，基因表达载体的复制开始于复制原点......”。

8、“.....项错误抗生素抗性基因可作为基因工程中的标记基因，可将含有目的基因的受体细胞筛选出来，项正确启动子在基因表达的转录中起作用，终止密码子在基因表达的翻译中起作用，项错误。课标全国卷Ⅱ已知生物体内有种蛋白质，该蛋白质是种转运蛋白，由个氨基酸组成。如果将分子中位的丝氨酸变成亮氨酸，位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质不但保留的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列问题从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的进行改造。以基因序列为基础，获得基因的途径有修饰基因或合成基因。所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括的复制以及遗传信息在不同分子之间的流动，即。蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过和，进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物进行鉴定......”。

9、“.....难度较小。对蛋白质的氨基酸序列或结构进行改造，可达到改变蛋白质的功能的目的。以基因序列为基础，获得基因，可以对基因进行修饰改造，也可以用人工方法合成基因中心法则的全部内容包括的复制蛋白质或转录逆转录翻译。蛋白质工程的基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过设计蛋白质结构和推测氨基酸序列，推测相应的核苷酸序列，并获取基因。经表达的蛋白质，要对其进行生物功能鉴定。课标全国卷Ⅰ属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。回答下列问题用基因工程方法制备的蛋白目的蛋白时，可先提取中的，以其作为模板，在的作用下合成，获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。从受体细胞中分离纯化出目的蛋白，该蛋白作为抗原注入机体后，刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是，该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的，检测的原理是。已知种菌导致的肺炎在健康人群中罕见，但是在艾滋病患者中却多发......”。