分子导入受体细胞大肠杆菌细胞筛选含有目的基因的受体细胞目的基因的表达获得人胰岛素。探究点名师精讲获得目的基因目的基因是基因工程操作中需要的外源基因,即人们感兴趣的基因,如生物的抗逆性基因抗虫基因等。获得目的基因的方法目的基因的序列已知化学方法合成,如胰岛素基因。聚合酶链式反应技术扩增目的基因。是聚合酶链式反应的缩写,是项在生物体外复制特定片段的核酸合成技术。通过这技术,可以快速获取大量的目的基因。利用技术获取目的基因的前提是要有段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这序列合成引物。扩增是获取目的基因的种非常有用的方法,也是进行分子鉴定和检测的种很灵敏的方法。探究点目的基因序列未知从基因文库中提取目的基因。基因文库用多种限制性核酸内切酶,将种生物的细胞切割成不同片段,并把所有片段随机地分别连接到用相同的限制性核酸内切酶切过的基因载体上,然后分别转移到适当受体细胞如细菌中,通过细胞增殖而构成各个片段的无性繁殖系。如果所制备的基因克隆数目已多到可把种生物的全部基因都包含在内时,则这组克隆就成为该种生物的基因文库。从基因文库中找到所需要的目的基因依据基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色体上的位置基因的转录产物以及基因的翻译产物蛋白质等特性来获取目的基因。探究点二形成重组分子过程通常用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体质粒,这样会在目的基因和载体的两端形成相同的粘性末端,然后用连接酶将目的基因和载体连接在起,形成重组分子。图解过程目的基因与载体结合的过程,实质上是不同来源的重新组合的过程,是基因工程的核心,其基本过程如下以质粒作为载体探究点构建的具体步骤用定的限制性核酸内切酶切割质粒,使其出现个有粘性末端的切口。常用同种限制性核酸内切酶切割目的基因,产生相同的粘性末端。将切下的目的基因片段插入到质粒的切口处,再加入适量连接酶,使质粒与目的基因结合形成重组分子。该过程中用到的酶限制性核酸内切酶连接酶。该过程中对目的基因和载体质粒都要用限制性核酸内切酶进行切割,但是所用的限制性核酸内切酶并不定要相同,只要切出来的粘性末端相同即可。探究点注意用同达产生的蛋白质无生物活性。探究点例题在已知小片段基因碱基序列的情况下,获得该基因的最佳方法是以为模板逆转录合成以种脱氧核苷酸为原料人工合成将供体片段转入受体细胞中,再进步筛选由蛋白质的氨基酸序列推测解析如果已知基因的碱基序列,最直接的方法就是通过化学合成的途径以种脱氧核苷酸为原料合成基因片段。答案探究点例题质粒是基因工程常用的运载工具。如下图所示质粒上有两种抗药基因可作为标记基因,为三个可能出现的目的基因插入点。如果用种限制性核酸内切酶将目的基因和质粒处理后,合成重组质粒。将重组质粒导入高等植物受体细胞后,用含有药物的培养基筛选受体细胞,预计结果如下表。下列选项中正确的是含有氨苄青霉素的培养基含有四环素的培养基能生长能生长不能生长能生长能生长不能生长探究点如果出现结果,说明两个抗药基因都没有被破坏,转基因实验获得成功如果出现结果,说明限制性核酸内切酶的切点在点,目的基因在点的断口处如果出现或者结果,说明转基因实验失败转移到受体细胞中的基因的遗传遵循孟德尔的遗传规律解析当目的基因插入点时,既不破坏抗氨苄青霉素基因,也不破坏抗四环素基因,会出现结果,但目的基因导入受体细胞后并不定能准确表达如果出现结果,说明目的基因插入点如果出现结果,说明目的基因插入点只有整合到染色体上的外源基因才能符合孟德尔遗传规律。答案探究点变式训练下列关于基因工程的叙述,错误的是目的基因和受体细胞均可来自动植物或微生物限制性核酸内切酶和连接酶是两类常用的工具酶人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性载体上的抗性基因有利于筛选含重组的细胞和促进目的基因的表达解析大肠杆菌为原核生物,只有核糖体,没有内质网高尔基体等复杂细胞器,所以人胰岛素原基因在大肠杆菌中不能合成有活性的胰岛素。载体上的抗性基因主要起着标记基因的作用,有利于含重组的细胞的筛选,但并不能促进目的基因的表达。答案探究点判断正误正确的画,错误的画“”。目的基因的获取定要用限制性核酸内切酶处理。提示也可以用化学方法合成。重组分子是由目的基因和载体连接在起构成的。提示将目的基因和质粒连接在起的重组分子导入到大肠杆菌中,大肠杆菌定接纳了重组。提示并不是所有的细胞都接纳了重组,还需筛选。将重组分子导入到受体细胞中,并筛选出含有重组分子的受体细胞,基因工程就完成了。提示还需检测目的基因在宿主细胞中能否正常表达。在基因工程中不会出现连接酶是将粘性末端的碱基连接起来限制性核酸内切酶用于目的基因的获得目的基因需由载体导入受体细胞人工合成基因不需要用限制性核酸内切酶解析连接酶是将粘性末端间的磷酸和脱氧核糖连接起来,形成磷酸二酯键。答案基因工程是在分子水平上对进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是人工合成目的基因目的基因与载体结合将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和表达答案水母发光蛋白由个氨基酸构成,其中构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记,在转基因技术中,这种蛋白质的作用是促使目的基因导入宿主细胞中促使目的基因在宿主细胞中复制使目的基因容易被检测出来使目的基因容易成功表达解析该蛋白质能够发光,所以其基因与目的基因连接后,可以根据该性状检测目的基因。答案第二节基因工程的原理和技术情境导入课程目标胰岛素是治疗糖尿病的有效药物,传统的生产胰岛素的方法只能从猪和羊的胰腺中提取,获得胰岛素大约需要的猪胰脏,生产成本高,患者难以支付昂贵的药费。科学家通过转基因工程让大肠杆菌生产出人的胰岛素,大大提高了产量,降低了成本,为糖尿病患者带来了福音。那么如何让大肠杆菌生产出人的胰岛素呢简述基因工程的原理。说出基因工程的基本步骤。举例分析获得目的基因的方法。说出重组质粒的特性。说出将重组质粒导入受体细胞的方法。举例说出筛选含有目的基因的受体细胞的原理。二基因工程的原理让人们感兴趣的基因即目的基因在宿主细胞中稳定和高效地表达。二二基因工程的基本操作步骤获得目的基因如果目的基因的序列是已知的,可以用化学方法合成目的基因,或者用聚合酶链式反应扩增目的基因。如果目的基因的核苷酸序列是未知的,可以建立个包括目的基因在内的基因文库。形成重组分子通常是用相同的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体,以利于目的基因和载体的两端形成相同的粘性末端,然后用连接酶将目的基因和载体连接在起,形成重组分子。将重组分子导入受体细胞常用的受体细胞有大肠杆菌枯草杆菌酵母菌和动植物细胞等。将重组质粒导入大肠杆菌,用氯化钙处理大肠杆菌,增加其细胞壁的通透性,使含有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。二筛选含有目的基因的受体细胞筛选是指根据标记基因表达的产物把含目的基因的受体细胞和没有目的基因的受体细胞筛选出来。例如由于质粒上有抗生素如四环素的抗性基因,所以含有这种重组质粒的受体细胞就能够在有四环素的培养基中生长,而没有接纳重组分子的细胞则不能在这种培养基上生长。目的基因的表达目的基因的表达是指目的基因进入受体细胞后能准确地经过转录和翻译两个过程,产生人们需要的功能物质或表现出特定的遗传性状。自主思考在基因工程中,只要把目的基因导入受体细胞中,基因工程就算完成了吗为什么提示不是。不仅要将目的基因导入受体细胞中,还要让目的基因在受体细胞中得到表达并发挥作用。探究点探究点基因工程的基本步骤问题导引大肠杆菌和人是差异非常大的两种生物,但通过基因重组,大肠杆菌能够合体的胰岛素,具体操作过程是怎样的提示获得目的基因人的胰岛素基因形成重组分子将重组分子导入受体细胞大肠杆菌细胞筛选含有目的基因的受体细胞目的基因的表达获得人胰岛素。探究点名师精讲获得目的基因目的基因是基因工程操作中需要的外源基因,即人们感兴趣的基因,如生物的抗逆性基因抗虫基因等。获得目的基因的方法目的基因的序列已知化学方法合成,如胰岛素基因。聚合酶链式反应技术扩增目的基因。是聚合酶链式反应的缩写,是项在生物体外复制特定片段的核酸合成技术。通过这技术,可以快速获取大量的目的基因。利用技术获取目的基因的前提是要有段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这序列合成引物。扩增是获取目的基因的种非常有用的方法,也是进行分子鉴定和检测的种很灵敏的方法。探究点目的基因序列未知从基因文库中提取目的基因。基因文库用多种限制性核酸内切酶,将种生物的细胞切割成不同片段,并把所有片段随机地分别连接到用相同的限制性核酸内切酶切过的基因载体上,然后分别转移到适当受体细胞如细菌中,通过细胞增殖而构成各个片段的无性繁殖系。如果所制备的基因克隆数目已多到可把种生物的全部基因都包含在内时,则这