流式细胞(FCM)术在血小板临床检测中的应用-深圳市血液中心

•该技术适用于血小板相容性检测的确认试验。

方法介绍受者血清与供者血小板供者血清与受者血小板进行致敏反应，同时设致空白阴阳自身对照。

标记相应的羊抗人，以流式细胞仪检测个血小板表面抗原抗体反应结果。

比较受检样本与已知阴性对照的平均荧光强度。

结果分析与判断受检样品的平均值阴性对照平均值。

受检样品的倍，相容性反应判为阳性，受者血清和供者血小板在本实验中不相容。

受检样品的倍，相容性反应判为阴性，受者血清和供者血小板相容。

•结果分析流式图阴性对照检测图•结果分析流式图阳性对照检测图•结果分析流式图供者与受者相容性检测图结果相容结果分析流式图供者与受者相容性检测图结果不相容•固相凝集法初筛试验可快速筛选到阴性或弱阳性供者•术确认试验对阴性或Ⅰ抗体阳性值自身抗体阳性值，术血小板相容性试验结果例供者中弱阳性例值，弱相合率，其它为强阳性。

弱阳性供者血小板输注效果良好。

当患者血浆中存在未能确认的其它特异性抗体的配型策略以固相凝集法交叉配血做为初筛选择阴性或弱反应性样本以法检测或直接以术交叉配血，选择相容性或弱反应性供者。

案例分析患者男，岁，免疫史输红细胞血小板多次。

临床诊断骨髓增生异常综合症，抗体检测显示同种抗体阴性，自身抗体弱阳性值淋巴细胞毒试验血小板相容性试验全阴性，但临床输注时而有效，时而无效怀疑患者血浆中存在未能确认的特异性抗体，经术试验结果例供者中例阴性值﹤，人份弱阳性值，其余为阳性。

术试验结果阴性供者血小板输注效果良好。

•血小板相容性试验例受者例供者•相容性阴性结果例•相容性弱阳性结果例•相容性阳性结果例•为临床提供相容性血小板个治疗单位。

优点敏感性强特异性好可客观提供反应强度的数据法的可重复性强，重复试验结果差异小可检出大多数血小板特异性抗体和类抗体包括非补体结合的体。

进步提高血小板输注疗效。

缺点费用昂贵实验时间比固相凝集法稍长。

适用范围相关抗体等血小板同种抗体药物依赖性抗体等的检测。

基本原理待检患者的血清与血小板谱细胞或健康人血小板型进行间接免疫荧光标记实验，用流式细胞仪判读反应结果。

通过比较患者血清与阴性对照血清的反应，判断是否存在血小板抗体。

优点敏感性高精确性强所用标本量少多项目同时检测分析。

缺点费用昂贵血小板严重减少时细胞碎片对试验有干扰。

在血液学免疫学肿瘤学器官移植等领域中为临床提供重要的诊断治疗预后判断的依据。

深圳市血液中心梁延连•血小板抗体检测技术血清学技术酶联免疫吸附试验淋巴细胞毒试验放射免疫性分析技术免疫印迹技术微柱凝胶技术固相微板技术淋巴细胞毒试验流式细胞术等。

分子生物学技术等。

•血小板相容性检测技术酶联免疫吸附试验淋巴细胞毒试验简易致敏红细胞血小板血清学试验法固相凝集法术等。

图来自流式说明书•白血病的诊断与治疗•血小板缺陷性疾病的诊断•血栓性疾病的诊断•血小板减少性疾病血小板相关抗体检测“网织”血小板的绝对指标储存血小板的质控指标血小板的相容性试验。

•原理供者的血小板与受者的血清或受者的血小板与供者的血清进行间接免疫荧光标记，用流式细胞仪判读反应结果。

如反应为阴性，供受者间血清和血小板在本实验中相容如反应为阳性，供受者间血清和血小板不相容。

•该技术适用于血小板相容性检测的确认试验。

方法介绍受者血清与供者血小板供者血清与受者血小板进行致敏反应，同时设致空白阴阳自身对照。

标记相应的羊抗人，以流式细胞仪检测个血小板表面抗原抗体反应结果。

比较受检样本与已知阴性对照的平均荧光强度。

结果分析与判断受检样品的平均值阴性对照平均值。

受检样品的倍，相容性反应判为阳性，受者血清和供者血小板在本实验中不相容。

受检样品的倍，相容性反应判为阴性，受者血清和供者血小板相容。

•结果分析流式图阴性对照检测图•结果分析流式图阳性对照检测图•结果分析流式图供者与受者相容性检测图结果相容结果分析流式图供者与受者相容性检测图结果不相容•固相凝集法初筛试验可快速筛选到阴性或弱阳性供者•术确