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配置显色液无水溶于超纯水中,因此可以在定程度上弥补在抽提过程中的丢失。
而对于海洋生物发育早期来说,大多个体组织较小,需要显微观察才能分辨其形态结构,如果采用传统的“酚氯仿抽提法”,由于大量的损失很难获得足够量的用于后续分子生物学研究。
本实验参照前人在扇贝担轮幼虫中的研究报道,摸索出了适用于海胆稚胆阶段的裂解方法,并将裂解液直接用于扩增模板,进行了微卫星标记的扩增分析,得到了清晰的微卫星扩增带谱。
微卫星扩增结果说明该方法可以得到较好的幼虫模板,可以用于后续的分子标记分析。
该方法不需抽提可直接用于扩增,不但防止了抽提步骤引起的损失,而且简化了实验过程。
另外,该方法不但可以将微小的幼虫阶段纳入到分子标记的研究中来,便于更全面的掌握海胆整个生命周期内的遗传结构变化动态,扩大了海胆遗传育种学的研究范围和研究内容,也为海胆标记辅助育种等遗传学研究工作提供了早期取样研究的实例,大大简化该方向的研究步骤,且节约了人力物力及宝贵的时间。
亲本数目对海洋生物遗传结构的影响杂合度作为反映群体遗传变异的重要参数,其大小可反映群体遗传变异程度的高低。
通常,杂合度高的生物群体更容易适应环境变化,忍受自然选择压力并可能具有更多的优良经济性状。
般认为,用于检测遗传变化的标记在群体中的平均杂合度的范围应该在之间才有实际意义。
战爱斌等检测了仿刺参个微卫星位点的平均观测杂合度和平均期望杂合度。
丁君等研究结果显示,个虾夷马粪海胆养殖群体的平均观测杂合度为,期望杂合度为,杂合度的平均观察值都低于杂合度的平均期望值,结果显示个虾夷马粪海胆养殖群体的遗传多样性较低,这可能与海胆养殖群体育苗时所取父母本海胆较少,且进行累代繁殖有关,海胆育苗养殖过程中的这些问题将导致海胆子代群体中亲缘关系较近,些杂和位点丢失,建议海胆育苗养殖单位在较大范围内,选择数量较多的亲本海胆繁育后代,以保证养殖群体的杂和度保持在个较高水平。
本实验所用海胆稚胆群体杂合度水平处于中等,但是用于产生这些个体的亲本数均较少,推测将会存在不同程度的等位基因丢失杂合度下降等的情况。
万俊芬等利用标记技术探讨了不同的交配亲本数对鲍养殖群体遗传结构的影响,结果表明,亲本数少的群体的总位点数少于亲本数多的群体,后者的些低频位点在前者中丢失,同时群体的位点频率发生漂移,的低频位点数目减少而高频位点略有增加。
另外统计了各群体的相似指数和杂合度,发现群体的相似指数低于,而杂合度高于群体。
总之,群体的亲本大连海洋大学本科毕业论文讨论数减少会引起些低频位点丢失及位点频率发生漂移,同时亲本数过少会导致群体的杂合度暂时升高。
等研究报道了海湾扇贝不同数目亲本所产生的后代的遗传结构变化,发现随着亲本数目的减少,出现了越来越严重的低频位点丢失和杂合度下降的现象。
本研究也发现亲本数目较少的群体虽然等位基因数量与群体相同,但基因型数量少于群体。
两组之间杂合度尚未出现显著差异,但群体杂合度略高于群体,推测也出现了杂合度暂时升高的情况,这些研究结果与以上报道相似。
随着海胆人工育苗广泛开展,累代养殖和亲本数目较少的情况时常出现,该研究对中间球海胆不同亲本数目所产生的群体进行了直接裂解和微卫星扩增分析,比较了两个群体的基因频率和各遗传学指标,为评价中间球海胆养殖现状以及遗传育种工作提供了基础资料。
大连海洋大学本科毕业论文参考文献致谢本论文从选题的确定,论文的写作修改到最后定稿都是在指导老师秦副教授悉心指导下完成的。
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实验所用的两个海胆群体分别来源于个命名为和个亲本命名为,群体取只个体,群体取样只。
所有海胆稚胆期采用直接裂解法提取基因组,裂解液直接进行微卫星扩增。
结果表明群体扩增出个等位基因,平均有效等位基因数为,平均香浓氏指数为,平均奈氏杂合度为,群体扩增出个等位基因,平均有效等位基因数为,平均香浓氏指数为,平均奈氏杂合度为所有遗传学指标在两个爱尔兰智利,及美国东北部加拿大的沿海各省以及从北美西海岸的加利福尼亚州到英国的哥伦比亚都进行了过量捕捞,从而,人们对海胆养殖的兴趣不断增加,海胆的人工养殖和苗种生产的研究逐渐开展起来,
