培养和快速繁殖均有定创新价值，故研究三叶青生态栽培和快速繁殖等方面技术研究有重大经济和科研价值。二国内外研究现状和发展趋势目前国内外对三叶青研究主要集中在化学成分药理以及生药鉴定等方面，钟晓明等通过研究三叶青提取物包括总黄酮总氨基酸及多糖成分对致急性肝损伤小鼠保护作用，发现其能够明显降低肝损伤小鼠谷丙转氨酶谷草转氨酶增高，减轻肝细胞变性，炎症浸润及坏死等病变降低肝中丙二醛生成量。伍昭龙等同时开展了三叶青水煎液对致大鼠急性肝损伤保护作用研究，研究结果表明，该中药除能降低肝损伤大鼠血清及水平外，还能降低碱性磷酸酶水平而水平明显升高。基于钟晓明等研究基础，黄真和毛庆秋深入研究了三叶青总氨基酸对诱导小鼠急性肝损伤保护作用，研究结果显示，其能够明显降低急性肝损伤小鼠和活性升高，同时还能降低肝脏指数及肝中生成量，提高肝中活性，减轻肝细胞变性炎症浸润及坏死等病变。杨雄志采用小鼠尾静脉注射和方法成功造出免疫性肝损伤模型，该模型小鼠血清转氨酶和乳酸脱氢酶显著升高，肝匀浆含量也显著升高，但水平明显降低对照病理模型组，杨雄志发现不同剂量三叶青提取液给药组小鼠血清水平降低肝损伤不同程度减轻，研究结果表明，三叶青提取液对和诱导小鼠免疫性肝损伤具有良好防护作用。恶性肿瘤治疗目前在医学界尚无理想药物和方法，且此类疾病药物耐受性明显增高，但同时中医中药及有关营养支持疗法为治疗恶性肿瘤开辟了新途径。据年报道三叶青乙酸乙酯溶部分主要成分为苯甲酰基胡萝卜甙具有定肿瘤抑制和抗病毒作用丁钢强等年研究发现，三叶青提取物中乙酸乙酯溶部分对人肝癌细胞活性具有较强抑制作用正丁醇部分也有定作用，有力支持和验证了以上研究结果。研究同时发现，三叶青提取物对正常原代培养大鼠肝细胞活性没有明显影响，对活力影响也较对要小，提示三叶青各部分提取物对正常细胞影响较肿瘤细胞要小，在此基础上魏克民等年深入进行了三叶青抗恶性肿瘤机制实验研究，结果表明，三叶青提取物对人肝癌细胞活性具有较强抑制作用，研究结果再次证实三叶青提取物中乙酸乙酯溶部分确具有很好肿瘤细胞毒作用魏克民等还发现，三叶青提取物对小鼠细胞端粒酶基因表达有抑制作用，并有增强小鼠细胞免疫和体液免疫功能作用，而对正常原代培养大鼠肝细胞活性没有明显影响。临床上令人振奋是魏克民等用三叶青黄芪人参皂苷配制而成金芪片治疗恶性肿瘤例，完全缓解例，部分缓解例稳定例进展例，缓解及部分缓解共例，总有效率姜初明和龚黎燕采用清热解毒为主，健脾行气活血为辅中肝合剂，含三叶青配合西药治疗Ⅲ期原发性肝癌，提高了Ⅲ期原发性肝癌患培养土配比适应有机肥料和病虫害防治研究。利用优质三叶青质控指标，于花前花期和花后等分别测定质量变化，使采收更合理。三叶青生态栽培光温湿度控制研究，确保三叶青最适生长环境。喷滴灌系统设施安装，保证供水及时安全节能。测土配方施肥。通过设计理想配方肥包括专用复合肥系列专用复合肥，实现养分平衡。进行重金属农药残留量与微生物检测。三叶青优质品系栽培生理与光合生理研究，三叶青高产优质栽培技术体系研究。项目验收，课题总结。七项目预算包括经费来源及用途项目经费预算如下杭州市科技局经费万元，经费主要用于购买试验材料试验外协资料印刷会议调研人员劳务管理等。附表市级科技计划项目经费概算表项目名称金额单位万元序号概算科目名称合计市财政拨款经费地方部门配套经费自筹经费经费支出合计设备费购置设备费试制设备费设备租赁费材料费测试化验加工费燃料动力费差旅费会议费合作协作研究与交流费出版文献信息传播知识产权事务费人员劳务费专家咨询费管理费其他开支二经费来源合计申请市财政经费地方部门配套拨款自筹经费单位自有货币资金其他资金八申请单位概况项目主持单位是家集科研生产销售技术服务于体规模化专业型农业科技企业。公司组建有批技术力量雄厚，管理科学，人才精锐活力团队，公司把握现代农业产业发展方向，加快科技成果产业化进程，努力使产品技术处于同行前列。近年来公司直致力于药赏兼用植物资源及其系列产品研制与开发工作，并应用现代生物工程技术对三叶青白背三七等植物进行驯化和培植，逐步形成产业化规模。公司已建立了药赏兼用植物标准化种植基地，全面开展从育种人工繁育仿野生有机栽培肥料比对现代炮制工艺等系列研究，在种子收集精心育种克隆组培，到生态有机栽培性状鉴定显微鉴定，再到产品研发质量控制有效成分检测等各个方面都取得了突破性成果，实现公司产品培育种植科学化标准化产业化，年销售额在万以上。项目合作单位之是全国优秀高等职业技术学院，是集产学研体化，为地方经济社会发展提供科技支撑和人才场所。近几年来,该学院积极承担地方多家企业科研所等技术服务技术指导工作。拥有实验实训室个，实训中心个，校内生产性实训基地校外实训基地多个，教学仪器设备多万元实验室拥有完成本项目研究所需大型仪器，如高效液相色谱仪气相色谱仪原子吸收分光光度计荧光分光光度计冷冻高速离心机等批先进检测设备设施。项目合作单位之二是本省所省部共建综合性大学，其与本课题相关条件基础包括建有浙江省新药创制科技服务平台浙江省制药科技创新基地即浙江省重中之重学科总建设经费万国家中药现代化科技产业浙江基地现代中药制剂研究中心拥有浙江省制药工程重点实验室制药工程省部共建教育部重点实验室国家绿色化学重点实验室培育基地药物绿色合成方向等良好学科及科研平台。拥有“制药工程”“生物化工”和“环境工程”等个浙江省“重中之重”学科，拥有“生物化工”“药物化学”等个博士点。目前已投入建设经费万元，现有实验用房多平方。拥有系列先进仪器设备，如傅立叶变换红外光谱仪液质联用仪兆核磁共振仪高效液相色谱仪气相色谱仪旋光光度仪紫外分光光度计数字式熔点仪等拥有较完备用于中药分离制备和衍生化研究各种仪器材料，并拥有了各型常规制备色谱中压制备色谱各型葡聚糖凝胶色谱反相制备色谱，高效液相色谱逆流色谱和组合快速制备色谱制剂实验室拥有仪器设备如智能溶出试验仪片剂硬度计粉碎机片剂脆碎检查仪湿法混合制粒机微型颗粒机单冲压片机无级变速包衣机等，药理实验室拥有仪器设备如荧光酶标仪分光光度计高速离心机超速离心机培养箱超净工作台等。九项目负责人及主要参加人员简历课题组成员为老中青年学者，年龄结构合理。其中高级职称人，中级人，有丰富研究经历，对野生资源调查与收集引种栽培种源对比试验，有效成分分析及推广等均能自行完成。项目负责人，高级工程师。从事中药化学研究与生物制药工作。主要从事药用植物中生物活性成分提取分离等基础研究工作。主持参加省部市厅级等科研项目项，发表论文余篇，其中在国外杂志上发表论文三篇，被收录五篇收录篇级期刊二篇。项目主要参加人员之已经从事余年色谱分离研究工作，已经发表相关论文百五十多篇，其中五十余篇被收录余篇论文影响因子大于，大部分是第作者或通讯作者，研究成果曾获得日本化学会离子色谱成就奖，化工部科技进步三等奖，浙江省科技进步三等奖和浙江省青年科技奖，年入选“浙江省新世纪人才工程”第二层次，现为中国分析仪器学会常务理事，离子色谱专业委员会副主任委员浙江省微量元素与健康研究会副理事长，色谱生命科学仪器杂志编委，也是国际知名分析化学刊物等审稿人。项目主要参加人员之二农艺师，从事作物栽培科研工作三十余年，先后主持和参加了全年三熟高产综合配套技术研究黑麦草引种及推广等项目，获省市地科研成果推广成果星火奖等项，在省级以上专业刊物发表论文多篇，近年来，开展中药材三叶青引种试验及推广工作。承诺书申报单位承诺本项目申请书中所填写各栏目内容真实准确。提供技术文件和资料真实可靠，未侵犯他人知识产权。若发生与上述承诺相违背事实，由本项目申报单位及申报人承担全部法律责任。项目负责人签字申报单位盖印年月日抗炎镇痛与解热保肝等作用，且毒副作用小是西药无法代替“植物抗生素”，临床上已广泛用于抗癌抗肿瘤及抗艾滋病毒等疾病。三叶青因其药效显著，开发潜力巨大。霍昕在三叶青块根乙醚提取物中共分离出个化合物，检测出个组分，其中含量较高是亚油酸棕榈酸油酸二苯胺亚麻酸甲酯和硬脂酸。李瑛琦从块根乙酸乙酯萃取物中分离到个化合物。毛亮分离到个化合物，鉴定为谷甾醇山柰酚槲皮素和山柰酚新橙皮糖苷。报道从三叶青中得到种新黄酮碳苷。刘东从其地上部分石油醚萃取物中分离到个化合物蒲公英萜酮蒲公英萜醇谷甾醇和麦角甾醇。槲皮素可诱导肿瘤细胞凋亡，又可阻止非肿瘤细胞凋亡其提取物能通过增强单核巨噬细胞吞噬功能而发挥抗肿瘤功能。以三叶青为主要成分金丝地甲胶囊，可明显抑制肺肿瘤细胞有力支持和验证了以上研究结果。研究同时发现，三叶青提取物对正常原代培养大鼠肝细胞活性没有明显影响，对活力影响也较对要小，提示三叶青各部分提取物对正常细胞影响较肿瘤细胞要小，在此基础上魏