这片段﹥,应怀疑有血红蛋白或的异常。
血红蛋白与血红蛋白不同的是,在酸性凝胶电泳中不与分离。
血红蛋白在碱性缓冲条件下,血红蛋白和的条带重叠在起,但
在酸性凝胶电泳中不与分离。
操作性能灵敏度高特异性强操作简便,重复性好。
注意事项
试剂贮存于室温或冰箱内,不能冷冻。
不要应用溶血标本
若检测到异常血红蛋白,而又与常见的异常血红蛋白或不同,可使
用其他方法如球蛋白链电泳检测,或求助于有关专门实验室。
小于全部血红蛋白的时,扫描检测或其它些较少见的血
红蛋白只是半定量的,结果不十分准确。
对于中度或重,
个月
脐带血﹤
质量控制
建议测定每基质带浓度过淡,
说明溶血液的浓度太淡。正常时浓度大约为基质带浓度的倍。
半岁≧,﹤,﹤
个月,使片段的标记臵于扫描板的标志处。
结果判断与参考范围
扫描得到的只是每种血红蛋白条带的相对浓度值。取出胶片后,首先清洁胶片
的背面。判断溶血液的浓度是否合适,主要看基质带的浓度,如将凝胶支架放入染色池
取出凝胶支架,打开盖子,取出干燥的凝胶片。
在光密度仪的处或以黄色滤光片扫描测定。使用,或
光密度仪时,凝胶染色扫描
打开盖子
取出并丢弃加样器
升高两个支架,握住塑料端取出并丢弃缓冲条。
打开凝胶托架,平放,将干燥的凝胶片放入两层间,然后关上托架。
架,使缓冲条不接触到凝胶板。
从保温盒里取出加样器。取时拿保护框。折断加样器齿端保护框。将加样器放
在号位臵。
关上电泳仪盖子,按下键盘左侧的绿色箭头键,电泳开始。
立即丢弃滤纸。
在电泳仪温度控制板表面的边线内加蒸馏水或去离子水。凝胶面朝上,放臵
凝胶板,边缘对齐边线。略略将凝胶弯曲,然后放平,使水均匀分布在凝胶板下面
而不含气泡。
降低支位于链盘左
侧。
从包装袋内取出缓冲条,拿出末端的塑料片,将缓冲条两端塑料片固定在电极
支架背侧的钉上,塑料片应紧贴支架。
取出凝胶板。将薄的滤纸轻轻吸去凝胶板表面的多余液体,然后盒内,齿端向上转运时用塑料齿保护架。
等待分钟,使样品扩散至齿端。打开电泳仪盖,抬起电极和加样器支架。
使用时选择仪器的程序溶血液造成溶血。震荡混匀秒钟,室温下培育分钟待测。
启动电泳仪
将加样器放在平板上,有数字的端向上。各加样孔加入溶血的样品,
分钟内加样完毕。将加样器放入保湿
操作步骤
血红蛋白液制作抗凝血离心分钟,去掉血浆,用倍体积的
生理盐水洗涤红细胞次,若红细胞体积小于,需特别小心。取红细胞
加入存条件及有效期贮存于室温或冰箱,不能冷
冻。有效期两年。
仪器设备
仪器名称电泳仪
仪器厂家法国公司
仪器型号
试剂盒组成
琼脂糖凝胶块溶血素瓶
缓冲液条带包条薄滤纸张
氨基黑浓缩液瓶点样模具滤纸条盒
试剂储状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
标本拒收标准细菌污染溶血或脂血标本不能作测定。
试剂
试剂名称血红蛋白电泳检查试剂
试剂生产厂家法国公司
包装规格檬酸或肝素均可,避免碘乙酸。常规静脉采血
,加入含有枸橼酸钠溶液的干燥。清洁试管中,充分混匀。
标本储存储存于冰箱中,天。
标本运输储存于红蛋白病。血红蛋白
中的条链合成减少引起血红蛋白性质异常,称之为地中海贫血。
标本采集
标本采集前病人准备受检者应空腹。
标本种类抗凝血
标本要求抗凝剂选用,柠。多余的染色液用酸性液体洗去。待琼脂糖凝胶板干燥后,肉眼可直接判
别有无电泳条带异常。运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。血
红蛋白异常有二种类型血红蛋白性质或结构的异常称之为血红。多余的染色液用酸性液体洗去。待琼脂糖凝胶板干燥后,肉眼可直接判
别有无电泳条带异常。运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。血
红蛋白异常有二种类型血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。血红蛋白
中的条链合成减少引起血红蛋白性质异常,称之为地中海贫血。
标本采集
标本采集前病人准备受检者应空腹。
标本种类抗凝血
标本要求抗凝剂选用,柠檬酸或肝素均可,避免碘乙酸。常规静脉采血
,加入含有枸橼酸钠溶液的干燥。清洁试管中,充分混匀。
标本储存储存于冰箱中,天。
标本运输储存于状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
标本拒收标准细菌污染溶血或脂血标本不能作测定。
试剂
试剂名称血红蛋白电泳检查试剂
试剂生产厂家法国公司
包装规格
试剂盒组成
琼脂糖凝胶块溶血素瓶
缓冲液条带包条薄滤纸张
氨基黑浓缩液瓶点样模具滤纸条盒
试剂储存条件及有效期贮存于室温或冰箱,不能冷
冻。有效期两年。
仪器设备
仪器名称电泳仪
仪器厂家法国公司
仪器型号
操作步骤
血红蛋白液制作抗凝血离心分钟,去掉血浆,用倍体积的
生理盐水洗涤红细胞次,若红细胞体积小于,需特别小心。取红细胞
加入溶血液造成溶血。震荡混匀秒钟,室温下培育分钟待测。
启动电泳仪
将加样器放在平板上,有数字的端向上。各加样孔加入溶血的样品,
分钟内加样完毕。将加样器放入保湿盒内,齿端向上转运时用塑料齿保护架。
等待分钟,使样品扩散至齿端。打开电泳仪盖,抬起电极和加样器支架。
使用时选择仪器的程序位于链盘左
侧。
从包装袋内取出缓冲条,拿出末端的塑料片,将缓冲条两端塑料片固定在电极
支架背侧的钉上,塑料片应紧贴支架。
取出凝胶板。将薄的滤纸轻轻吸去凝胶板表面的多余液体,然后立即丢弃滤纸。
在电泳仪温度控制板表面的边线内加蒸馏水或去离子水。凝胶面朝上,放臵
凝胶板,边缘对齐边线。略略将凝胶弯曲,然后放平,使水均匀分布在凝胶板下面
而不含气泡。
降低支架,使缓冲条不接触到凝胶板。
从保温盒里取出加样器。取时拿保护框。折断加样器齿端保护框。将加样器放
在号位臵。
关上电泳仪盖子,按下键盘左侧的绿色箭头键,电泳开始。
凝胶染色扫描
打开盖子
取出并丢弃加样器
升高两个支架,握住塑料端取出并丢弃缓冲条。
打开凝胶托架,平放,将干燥的凝胶片放入两层间,然后关上托架。
将凝胶支架放入染色池
取出凝胶支架,打开盖子,取出干燥的凝胶片。
在光密度仪的处或以黄色滤光片扫描测定。使用,或
光密度仪时,使片段的标记臵于扫描板的标志处。
结果判断与参考范围
扫描得到的只是每种血红蛋白条带的相对浓度值。取出胶片后,首先清洁胶片
的背面。判断溶血液的浓度是否合适,主要看基质带的浓度,如基质带浓度过淡,
说明溶血液的浓度太淡。正常时浓度大约为基质带浓度的倍。
半岁≧,﹤,﹤
个月
个月
脐带血﹤
质量控制
建议测定每批样本时都附有控制品或含有血红蛋白和的血样本。
临床意义
检测地中海贫血
轻型轻度升高,大多在
中间型缺如,可达
重型,多低于或甚至
检测地中海贫血
标准型地中海贫血新生儿期可达,几个月后消失。
经煌焦油蓝温育后,少数红细胞内有包涵体。血红蛋白电泳无异常发现。
血红蛋白病在或电泳时,向阳极方向移动,泳速快于
在电泳时,仍向阳极方向移动。
血红蛋白少量。
及均缺如。
检测血红蛋白病引起临床注意的异常血红蛋白有四种和。
血红蛋白在碱性缓冲条件下血红蛋白的条带位于和片段之间
血红蛋白在碱性缓冲条件下血红蛋白,和的条带重叠在起。若
这片段﹥,应怀疑有血红蛋白或的异常。
血红蛋白与血红蛋白不同的是,在酸性凝胶电泳中不与分离。
血红蛋白在碱性缓冲条件下,血红蛋白和的条带重叠在起,但
在酸性凝胶电泳中不与分离。
操作性能灵敏度高特异性强操作简便,重复性好。
注意事项
试剂贮存于室温或冰箱内,不能冷冻。
不要应用溶血标本
若检测到异常血红蛋白,而又与常见的异常血红蛋白或不同,可使
用其他方法如球蛋白链电泳检测,或求助于有关专门实验室。
小于全部血红蛋白的时,扫描检测或其它些较少见的血
红蛋白只是半定量的,结果不十分准确。
对于中度或重度贫血的病例,点样量应增大为或,其结果不受影响。
电泳过程中不能打开盖子。在染色脱色以及干燥过程中,仪器的些程序处
于锁定状态。
最后染色后立即扫描测定。若欲保存,可用保护物覆盖后臵于干燥暗处,
避免受热,可保存约个月。
精液常规检查
实验原理
纪录精液量颜色透明度粘稠度和是否液化。显微镜检查包括精子计数
活动力活动率形态。
标本采集
标本采集前病人准备必须禁欲包括遗精和手淫天。这是因为少于
小时采取的精液,因相距时间太短,精液中精子的数量可能偏少,容易造成少
精症的假象。如果超过天,精子活率活力都有所下降,也可造成弱精子症的
假象。精液检查应间隔周或两周,要进行次检查。因为个人精子的产生
在年中,可因季节气候等,诸多因素的影响而有些变化。
标本种类精液
标本要求用清洁干燥小瓶收集,不应采用避孕套内精液。
标本储存立即送检。
标本运输室温运输,冬季需保温运输。
标本拒收标准久臵标本,污染标本,避孕套内标本。
操作步骤
纪录精液量颜色透明度粘稠度和液化时间。
精子活动率取新鲜标本混匀后,在温玻片上用高倍镜观察个精子,计
数活动精子与不活动精子的比例,计算精子活动的百分率。
精子活动率活动精子数活动精子数不活动精子数
取上述新鲜湿片标本,观察精子的活动力,可按下列五级报告
级精子完全不活动,加温后仍不活动
级精子运动不良,运动迟缓,原地打转或抖动,向前运动能力差
级精子活动较好,运动速度尚可,游动方向不定,呈直线或非直线运动,
带
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