体培养基中表现为絮状和颗粒沉淀•肺炎链球菌因荚膜多糖使菌落呈黏液状，因产生自溶酶，在平板上培养小时后出现中心凹陷的“脐窝状”菌落。抵抗力•本菌属大多数细菌对干燥和消毒剂敏感，除肺炎链球菌外，本菌属细菌较少引起细菌耐药性，但近年对青霉素耐药甚至多重耐药的肺炎链球菌的出现并在全球播散，引起高度关注。二链球菌的临床检验程序•标本采集•咽拭子痰液脓汁和血液等标本采集后在内运送到实验室，立即进行检查和接种。对群溶血链球菌的检查，用无菌棉签采集第周周妊娠妇女的阴道分泌物，置于含多粘菌素和萘啶酸选择性培养肉汤中孵育，再作分离培养。标本直接检查•显微镜检查标本涂片革兰染色显微镜检查见链状排列革兰阳性球菌有助于无正常菌群污染标本的诊断。•抗原检测咽拭标本的群链球菌和女性生殖道标本的群链球菌可用抗原检测荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌。分离培养与鉴定•分离培养采用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进步鉴定。•初代分离需用环境，孵育，观察菌落性状菌落周围呈现透明溶血环的为溶血性链球菌，菌落直径大于或小于。草绿色溶血环的为要是由几种及群链球菌引起，现已发现其荚膜抗原血清型有种以上。大多数致病性血清型在血清型。血清型为最常见和毒力最强的血清型。人主要通过接触病死猪感染。三微生物学检验•链球菌的基本特性•形度黏性的，使脓汁稀薄易球基底膜发生反应，属第型变态反应由链球菌的蛋白所产生的相应抗体形成的免疫复合物沉积于肾小球基底膜，造成基底膜损伤，属于第型变态反应。猪链球菌病•猪链球菌病主壁中的表面蛋白质，具有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用。蛋白有抗原性，能刺激机体产生型特异性抗体与心肌肾小球基底膜有共同抗原成分。侵袭性酶•链道酶也称链球菌酶，能分解黏稠脓液中具有高。•四不溶血群链球菌牛链球菌二临床意义•致病因素•菌体细胞壁成分•脂磷壁酸位于细胞壁中并伸展至菌体表面，与黏附宿主细胞有关。•蛋白是链球菌细胞有溶血和不溶血的细菌。•二群溶血性链球菌又称无乳链球菌。•三溶血性链球菌包括肺炎链球菌和草绿色链球菌群和似马链球菌菌落直径小于•具群抗原，统称米勒链球菌，主要分为种咽喉炎链球菌中间型链球菌和星座链球菌。除此之外，米勒链球菌还主的呼吸道消化道泌尿生殖道，还有些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌分类•群溶血性链球菌菌落直径大于•群的化脓性链球菌群群的马链球菌性引物，应用技术可直接进行分型测定。第二节链球菌属•链球菌属细菌种类多，分布广，是人和些动物的寄生菌。其中些菌种为毒力强的致病菌，另些则是作为正常菌群栖居于宿或死亡等现象者，提示金黄色葡萄球菌肠毒素存在。•琼脂扩散试验或法测定用琼脂扩散试验法或放射免疫分析法检测样本中的肠毒素。•肠毒素基因测定针对肠毒素基因设计毒素的通用引物及特异羟基丁酮酸试验新生霉素敏感试验多粘菌素耐药试验糖产酸试验是常用的葡萄球菌属种间细菌的鉴定生化试验。肠毒素检测•生物学试验采用幼猫腹腔注射肉汤培养物或呕吐物，内发生呕吐腹泻和体温升高中间葡萄球菌猪葡萄球菌能产生耐热核酸酶。此外表皮葡萄球菌模仿葡萄球菌肉葡萄球菌含微弱耐热核酸酶。其他鉴定试验•磷酸酶试验吡咯烷酮芳基酰胺酶试验鸟氨酸脱羧酶试验脲酶试验半乳糖苷酶凝固酶。金黄色葡萄球菌中间型葡萄球菌呈现阳性反应。路邓葡萄球菌产生结合型凝固酶而不分泌游离型凝固酶,因而玻片凝固酶试验阳性试管凝固酶试验阴性。•耐热核酸酶试验大多数金黄色葡萄球菌施氏葡萄球菌和呋喃唑酮敏感，氧化酶试验阴性可以与其他革兰阳性球菌区别。•红霉素耐药和甘油需氧产酸可以与微球菌区别。种的鉴定•凝固酶试验玻片法测定结合型凝固酶试管法测定分泌型醇高盐平板哥伦比亚多粘菌素奈啶酸平板•血液标本则用肉汤增菌培养基增菌后。初步鉴定•菌落性状平板培养基上孵育后，菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实。•鉴别试验•触酶试验阳性溶葡萄球菌素检测针对耐热核酸酶可鉴定葡萄球菌，测定可以快速检出。分离培养与鉴定•分离培养•脓液分泌物等临床标本可接种血琼脂平板•有污染的标本如粪便等应接种在选择平板上，如甘露菌，则具有重要临床价值其他体液标本查见细菌的同时伴有炎性细胞则也具有参考价值。可初步报告“查见类似葡萄球菌属革兰阳性球菌”，并进步进行分离和鉴定。•抗原检测乳胶凝集试验测定及荚膜抗原。•核酸，采集不同的标本。该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏膜，采取时避免病灶周围正常菌群污染。标本直接检查•显微镜检查无菌体液如脑脊液和关节穿刺液等可直接涂片革兰染色后，显微镜检查见类似葡萄球菌的革兰阳性球菌，采集不同的标本。该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏膜，采取时避免病灶周围正常菌群污染。标本直接检查•显微镜检查无菌体液如脑脊液和关节穿刺液等可直接涂片革兰染色后，显微镜检查见类似葡萄球菌的革兰阳性球菌，则具有重要临床价值其他体液标本查见细菌的同时伴有炎性细胞则也具有参考价值。可初步报告“查见类似葡萄球菌属革兰阳性球菌”，并进步进行分离和鉴定。•抗原检测乳胶凝集试验测定及荚膜抗原。•核酸检测针对耐热核酸酶可鉴定葡萄球菌，测定可以快速检出。分离培养与鉴定•分离培养•脓液分泌物等临床标本可接种血琼脂平板•有污染的标本如粪便等应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板哥伦比亚多粘菌素奈啶酸平板•血液标本则用肉汤增菌培养基增菌后。初步鉴定•菌落性状平板培养基上孵育后，菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实。•鉴别试验•触酶试验阳性溶葡萄球菌素和呋喃唑酮敏感，氧化酶试验阴性可以与其他革兰阳性球菌区别。•红霉素耐药和甘油需氧产酸可以与微球菌区别。种的鉴定•凝固酶试验玻片法测定结合型凝固酶试管法测定分泌型凝固酶。金黄色葡萄球菌中间型葡萄球菌呈现阳性反应。路邓葡萄球菌产生结合型凝固酶而不分泌游离型凝固酶,因而玻片凝固酶试验阳性试管凝固酶试验阴性。•耐热核酸酶试验大多数金黄色葡萄球菌施氏葡萄球菌中间葡萄球菌猪葡萄球菌能产生耐热核酸酶。此外表皮葡萄球菌模仿葡萄球菌肉葡萄球菌含微弱耐热核酸酶。其他鉴定试验•磷酸酶试验吡咯烷酮芳基酰胺酶试验鸟氨酸脱羧酶试验脲酶试验半乳糖苷酶羟基丁酮酸试验新生霉素敏感试验多粘菌素耐药试验糖产酸试验是常用的葡萄球菌属种间细菌的鉴定生化试验。肠毒素检测•生物学试验采用幼猫腹腔注射肉汤培养物或呕吐物，内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提示金黄色葡萄球菌肠毒素存在。•琼脂扩散试验或法测定用琼脂扩散试验法或放射免疫分析法检测样本中的肠毒素。•肠毒素基因测定针对肠毒素基因设计毒素的通用引物及特异性引物，应用技术可直接进行分型测定。第二节链球菌属•链球菌属细菌种类多，分布广，是人和些动物的寄生菌。其中些菌种为毒力强的致病菌，另些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道消化道泌尿生殖道，还有些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌分类•群溶血性链球菌菌落直径大于•群的化脓性链球菌群群的马链球菌和似马链球菌菌落直径小于•具群抗原，统称米勒链球菌，主要分为种咽喉炎链球菌中间型链球菌和星座链球菌。除此之外，米勒链球菌还有溶血和不溶血的细菌。•二群溶血性链球菌又称无乳链球菌。•三溶血性链球菌包括肺炎链球菌和草绿色链球菌群。•四不溶血群链球菌牛链球菌二临床意义•致病因素•菌体细胞壁成分•脂磷壁酸位于细胞壁中并伸展至菌体表面，与黏附宿主细胞有关。•蛋白是链球菌细胞壁中的表面蛋白质，具有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用。蛋白有抗原性，能刺激机体产生型特异性抗体与心肌肾小球基底膜有共同抗原成分。侵袭性酶•链道酶也称链球菌酶，能分解黏稠脓液中具有高度黏性的，使脓汁稀薄易球基底膜发生反应，属第型变态反应由链球菌的蛋白所产生的相应抗体形成的免疫复合物沉积于肾小球基底膜，造成基底膜损伤，属于第型变态反应。猪链球菌病•猪链球菌病主要是由几种及群链球菌引起，现已发现其荚膜抗原血清型有种以上。大多数致病性血清型在血清型。血清型为最常见和毒力最强的血清型。人主要通过接触病死猪感染。三微生物学检验•链球菌的基本特性•形态结构链球菌是直径小于的球形或卵圆形革兰阳性球菌，呈链状排列，链的长短和细菌的种类及生长环境有关。肺炎链球菌呈矛尖状，宽端相对尖端向外，成双排列，无芽胞无动力，但能形成荚膜和黏液层。抗原结构•抗原结构复杂，主要有多糖抗原和蛋白抗原，前者位于细胞壁以此可将链球菌分类为等群，后者主要有蛋白蛋白和蛋白等。变异性•肺炎淋球菌的和的单个突变或多个同时突变，导致对青霉素或头孢菌素的耐药。培养特性•兼性厌氧菌，肺炎链球菌和草绿色链球菌些种需要促进其生长•营养要求高，须在培养基中加入血液血清。最适生长温度，•血平板上形成灰白色，透明或半透明，表面光滑的小菌落不同菌种的菌落可分别形成三种溶血现象培养特性•群链球菌菌落较大，溶血环较群模糊，些群链球菌无溶血环。•牛型链球菌则为无溶血环呈灰色菌落•液体培养基中表现为絮状和颗粒沉淀•肺炎链球菌因荚膜多糖使菌落呈黏液状，因产生自溶酶，在平板上培养小时后出现中心凹陷的“脐窝状”菌落。抵抗力•本菌属大多数细菌对干燥和消毒剂敏感，除肺炎链球菌外，本菌属细菌较少引起细菌耐药性，但近年对青霉素耐药甚至多重耐药的肺炎链球菌的出现并在全球播散，引起高度关注。二链球菌的临床检验程序•标本采集•咽拭子痰液脓汁和血液等标本采集后在内运送到实验室，立即进行检查和接种。对群溶血链球菌的检查，用无菌棉签采集第周周妊娠妇女的阴道分泌物，置于含多粘菌素和萘啶酸选择性培养肉汤中孵育，再作分离培养。标本直接检查•显微镜检查标本涂片革兰染色显微镜检查见链状排列革兰阳性球菌有助于无正常菌群污染标本的诊断。•抗原检测咽拭标本的群链球菌和女性生殖道标本的群链球菌可用抗原检测荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌。分离培养与鉴定•分离培养采用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进步鉴定。•初代分离需用环境，孵育，观察菌落性状菌落周围呈现透明溶血环的为溶血性链球菌，菌落直径大于或小于。草绿色溶血环的为溶血性链球菌有些菌落灰白色不出现溶血环。初步鉴定•取分离平板上生长的菌落周围呈现溶血或不溶血的单个菌落作涂片，革兰染色镜检革兰阳性球菌，链状或短链状排列触酶试验阴性，不生长者•可确定为链球菌属细菌溶血性链球菌鉴定•群特异性抗原鉴定•根据分群的要求提取各菌落的抗原，与相应的分群血清进行凝集试验。•与群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链菌•与群抗血清凝集并且菌落直径可确定为米勒链球菌•与群抗血清凝集的菌株不能确定种类，还需根据菌落大小和生化反应进步鉴定。抗原群菌落大小菌种名化脓性链球菌米勒链球菌无乳链球菌马链球菌米勒链球菌米勒链球菌似马链球菌米勒链球菌未分群米