不生长或均生长抗小。六药物敏感性试验•将纯培养物菌悬液，接种含各种浓度药物的固体培养基上，同时做不含药物的对照组。•经过培养，含有药物的培养基上菌落数目是对照组的以上，则认为该菌对该药物浓度为完全耐药，如无菌落和培养滤液蛋白特异抗原刺激细胞检测。•近来融合蛋白用于诊断活动性结核病，准确灵敏特异快速。•结果与结核菌素试验相当，干扰因素和蛋白质抗原，其灵敏度和特异性均有所提高。全血干扰素测定法•原理当全血与和对照抗原植物血凝素共同孵育后，致敏的淋巴细胞可分泌，通过检测的含量来鉴定菌种。•年，快速诊断方法之•比传统的痰涂片抗酸染色培养等方法简便快速敏感性高，但存在定的假阳性。•近年，胶体金蛋白芯片检查结核杆菌抗体抗体，特别是后者，针对三种抗原脂阿拉伯甘露糖分泌特异性抗原浓度。•任何体液如血液痰液脊髓液尿液和各式组织萃取液等体液可用于检测特异蛋白抗原。结核抗体•作为活动性感染的染结核杆菌，则结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，在局部释放淋巴因子，形成迟发性超敏反应性炎症，若受试者未感染则无反应。结核分枝杆菌抗原检测•用方法在血清中检测结核分枝杆菌抗原结核菌外免疫学诊断结核菌素试验结核分枝杆菌抗原检测结核分枝杆菌抗体检测全血干扰素测定法结核菌素试验•针对旧结核菌素与结核菌素纯蛋白衍生物两种菌体蛋白•原理当将蛋白注入皮内后，如受试者已感•核酸探针•核酸序列分析•多重高效液相色谱•检测分枝菌酸由于不同种的分枝杆菌细胞壁中的分枝菌酸不同，所以利用检测分枝菌酸可鉴定菌种。三微生物学检验五殖,并将菌体裂解,释放出的子代噬菌体可感染随后加入的指示细胞,并将其裂解,在琼脂平板上出现透亮的噬菌斑。分子生物法菌种鉴定•限制性片段长度多态性分析•单链构象多态性分析•等于年建立的快速检测新技术•原理是分枝杆菌噬菌体能感染活的分枝杆菌,未进入感染菌体内的噬菌体被随后加入的杀毒剂灭活,已进入菌体内的噬菌体不受影响。噬菌体在感染菌体内大量增因素多•结核分枝杆菌不发酵糖类•能产生触酶•人型能合成烟酸，还原硝酸盐，耐受噻吩羧酸酰肼，而牛型则不能•人型和牛型的毒株中性红试验均阳性，无毒株则为阴性，并失去索状生长现象噬菌体鉴定法快速培养系统型三微生物学检验四分离培养与鉴定菌种鉴定生化反应噬菌体鉴定法分子生物法菌种鉴定高效液相色谱检测分枝菌酸生化反应烦琐费时周,影响不透明，乳白色或淡黄色，如菜花样分离培养•标本接种于选择性培养基中常用罗氏，所含的孔雀绿或青霉素可抑制杂菌生长•，培养周•结核杆菌出现干燥呈颗粒状灰白色菌落•涂片染色为抗酸阳性卵黄马铃薯甘油以及含些无机盐类的特殊培养基上才能生长良好。常用罗氏培养基最适生长温度为，最适分裂次，在固体培养基上周才出现肉眼可见的菌落典型菌落为粗糙型，表面干燥呈颗粒状，检测特异性更强，敏感性更高•须按法规要求规范操作，应防止标本污染出现假性结果核酸检测三微生物学检验四分离培养与鉴定培养特性专性需氧能促进其生长营养要求高须在含血清荧光染色抗酸杆菌未找到抗酸菌可疑抗酸杆菌再送标本检测视野视野视野视野视野视野视野视野视野视野•用法快速诊断感染•法是常用的抗酸染色法，染色后结核分枝杆菌呈红色，背景呈蓝色形态学检查•用荧光染料金胺染色，在荧光显微镜下菌体呈橘黄色涂片镜检的报告方式半定量报告石炭酸复红染色抗酸杆菌是常用的抗酸染色法，染色后结核分枝杆菌呈红色，背景呈蓝色形态学检查•用荧光染料金胺染色，在荧光显微镜下菌体呈橘黄色涂片镜检的报告方式半定量报告石炭酸复红染色抗酸杆菌荧光染色抗酸杆菌未找到抗酸菌可疑抗酸杆菌再送标本检测视野视野视野视野视野视野视野视野视野视野•用法快速诊断感染•法检测特异性更强，敏感性更高•须按法规要求规范操作，应防止标本污染出现假性结果核酸检测三微生物学检验四分离培养与鉴定培养特性专性需氧能促进其生长营养要求高须在含血清卵黄马铃薯甘油以及含些无机盐类的特殊培养基上才能生长良好。常用罗氏培养基最适生长温度为，最适分裂次，在固体培养基上周才出现肉眼可见的菌落典型菌落为粗糙型，表面干燥呈颗粒状，不透明，乳白色或淡黄色，如菜花样分离培养•标本接种于选择性培养基中常用罗氏，所含的孔雀绿或青霉素可抑制杂菌生长•，培养周•结核杆菌出现干燥呈颗粒状灰白色菌落•涂片染色为抗酸阳性快速培养系统型三微生物学检验四分离培养与鉴定菌种鉴定生化反应噬菌体鉴定法分子生物法菌种鉴定高效液相色谱检测分枝菌酸生化反应烦琐费时周,影响因素多•结核分枝杆菌不发酵糖类•能产生触酶•人型能合成烟酸，还原硝酸盐，耐受噻吩羧酸酰肼，而牛型则不能•人型和牛型的毒株中性红试验均阳性，无毒株则为阴性，并失去索状生长现象噬菌体鉴定法•等于年建立的快速检测新技术•原理是分枝杆菌噬菌体能感染活的分枝杆菌,未进入感染菌体内的噬菌体被随后加入的杀毒剂灭活,已进入菌体内的噬菌体不受影响。噬菌体在感染菌体内大量增殖,并将菌体裂解,释放出的子代噬菌体可感染随后加入的指示细胞,并将其裂解,在琼脂平板上出现透亮的噬菌斑。分子生物法菌种鉴定•限制性片段长度多态性分析•单链构象多态性分析•核酸探针•核酸序列分析•多重高效液相色谱•检测分枝菌酸由于不同种的分枝杆菌细胞壁中的分枝菌酸不同，所以利用检测分枝菌酸可鉴定菌种。三微生物学检验五免疫学诊断结核菌素试验结核分枝杆菌抗原检测结核分枝杆菌抗体检测全血干扰素测定法结核菌素试验•针对旧结核菌素与结核菌素纯蛋白衍生物两种菌体蛋白•原理当将蛋白注入皮内后，如受试者已感染结核杆菌，则结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，在局部释放淋巴因子，形成迟发性超敏反应性炎症，若受试者未感染则无反应。结核分枝杆菌抗原检测•用方法在血清中检测结核分枝杆菌抗原结核菌外分泌特异性抗原浓度。•任何体液如血液痰液脊髓液尿液和各式组织萃取液等体液可用于检测特异蛋白抗原。结核抗体•作为活动性感染的快速诊断方法之•比传统的痰涂片抗酸染色培养等方法简便快速敏感性高，但存在定的假阳性。•近年，胶体金蛋白芯片检查结核杆菌抗体抗体，特别是后者，针对三种抗原脂阿拉伯甘露糖和蛋白质抗原，其灵敏度和特异性均有所提高。全血干扰素测定法•原理当全血与和对照抗原植物血凝素共同孵育后，致敏的淋巴细胞可分泌，通过检测的含量来鉴定菌种。•年，和培养滤液蛋白特异抗原刺激细胞检测。•近来融合蛋白用于诊断活动性结核病，准确灵敏特异快速。•结果与结核菌素试验相当，干扰因素小。六药物敏感性试验•将纯培养物菌悬液，接种含各种浓度药物的固体培养基上，同时做不含药物的对照组。•经过培养，含有药物的培养基上菌落数目是对照组的以上，则认为该菌对该药物浓度为完全耐药，如无菌落生长则为敏感。三微生物检验第二节非结核分枝杆菌概述与分类二临床意义三微生物学检验概述与分类非结核分枝杆菌，指结核分枝杆菌复合群结核分枝杆菌牛分枝杆菌非洲分枝杆菌坎纳分枝杆菌和田鼠分枝杆菌和麻风分枝杆菌以外的其他分枝杆菌。•种类众多，现已被鉴定的有余种,包括专性寄生菌腐生菌和中间型。•国际分枝杆菌分类研究组分为三类，即缓慢生长菌快速生长菌和不能培养菌三种类型。•按细菌产色素和生长速度将临床重要分枝杆菌分为ⅠⅡⅢⅣ群概述分类法Ⅰ群光产色菌,如猿猴分枝杆菌堪萨斯分枝杆菌海分枝杆菌Ⅱ群暗产色菌,如苏加分枝杆菌蟾蜍分枝杆菌瘰疬分枝杆菌戈登分枝杆菌Ⅲ群不产色菌,如鸟分枝杆菌复合群,玛尔摩分枝杆菌土地分枝杆菌溃疡分枝杆菌嗜血分枝杆菌Ⅳ群快生长菌,如偶发分枝杆菌龟分枝杆菌脓肿分枝杆菌。二临床意义•迄今为止已发现有余种，其中约与人类疾病有关。条件致病菌毒力低于结核分枝杆菌自然界中广泛存在可以在人体些部位定植•结核病和感染的治疗不同为何要关注自然界中广泛存在，如水土壤和气溶胶，可导致免疫力低下的患者感染。近年来，因手术器械注射器具及医疗用水等灭菌不合格使用不规范造成患者手术切口注射部位感染暴发事件。如广东省中心卫生院剖宫产患者手术切口感染事件。该事件是由于手术器械灭菌不合格导致的手术切口感染，病原菌为快速生长型分枝杆菌。警钟长鸣潜在杀手卫生部关于严重医院感染事件通报关于深圳市医院发生严重医院感染事件的通报卫生部关于安徽省立医院恶性医疗损害事件的通报关于西安交通大学医学院医院发生严重医院感染事件的通报关于山西省太原中心医院血液透析感染事件的通报关于天津市蓟县院新生儿医院感染事件的通报卫生部关于安徽省县医院血液透析患者感染丙肝事件的通报关于广东省汕头市潮阳区中心卫生院剖宫产患者手术切口感染事件的通报摘自江苏省卫生厅严重医院感染事件通报与处罚规定选编年月光产色分枝杆菌Ⅰ群•堪萨斯分枝杆菌能引起肺内和肺外类似结核样的病变•海分枝杆菌存在于淡水或海水。除可引起冷血动物如鱼感染外，亦能引起人的感染。通过皮肤微小创口侵入皮肤而引起所谓的“游泳池肉芽肿”。渔业工人可经受损皮肤遭受感染•猿分枝杆菌首先从猿分离到此菌，形态同结核分枝杆菌，可感染人类暗产色分枝杆菌Ⅱ群•瘰疬分枝杆菌可引起人的淋巴结炎或肺部感染。•斯氏分枝杆菌可引起肺部的慢性感染。不产色分枝杆菌Ⅲ群•鸟胞内分枝杆菌复合体,鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌有许多相似之处，故合起来称之为。近年来发现感染和患者易感染。•溃疡分枝杆菌对人可通过创伤局部感染，常在四肢伸侧形成无痛性溃疡，叫做溃疡，缓慢愈合或出现继发感染。•蟾蜍分枝杆菌是蟾蜍肉芽肿的病原菌，对人则多引起老年男性的慢性肺部感染。快速生长分枝杆菌Ⅳ群•偶发分枝杆菌可引起人的局部感染或肺部感染，对现有的抗结核药物均耐药。•龟分枝杆菌该菌在引起免疫力低下患者感染的快速生长非结核分枝杆菌中最常见，外伤引起的软组织病变及手术后继发感染，亦可引起肺部感染。•脓肿分枝杆菌以前曾作为龟分枝杆菌脓肿亚种。常存在于自来水中，引起注射后医院感染的暴发。该菌也可散发引起丰胸术后中心静脉插管动脉插管以及透析导管所致的菌血症。另外，该菌可导致近由快速生长分枝杆菌引起的肺部感染，外伤后感染以及超过鼓膜切开管植入术后耳炎。与龟分枝杆菌相似，该菌引起免疫力缺陷患者播散性皮下感染。脓肿分枝杆菌引起的注射后感染脓肿分枝杆菌引起的注射后感染脓肿分枝杆菌引起的注射后感染难于愈合的伤口第章分枝杆菌放线菌与诺卡菌河北医科大学赵建宏概述•分枝杆菌与放线菌属放线菌目•分枝杆菌属是类细长略带弯曲专性需氧性杆菌。该菌般认为革兰染色阳性。多数细菌在生长的定时期抵抗酸醇，故又称抗酸杆菌•放线菌是群在生物学特性上与细菌类同的原核细胞型微生物，与分枝杆菌棒状杆菌等有着亲缘关系•放线菌是多数不致病，对人致病的主要有放线菌属和诺卡菌属。•前者为厌氧或微需氧菌，细胞壁中不含分枝菌酸，多引起内源性感染。•后者为需氧菌，细胞壁中含有分枝菌酸，非人体正常菌群的成员，常引起外源性感染。概述放线菌与诺卡菌的区别特征