白电泳应用电泳法鉴别患者血液中的类型及含量,对于贫血类型的临床诊断及治疗具有重大意义。电泳结果应根据不同年龄人群进行分析。血红蛋白电泳图谱第七节电泳仪的临床应用四免疫固定电泳可对各移而彼此分离,这就是等电聚焦分离过程。毛细管的等电聚焦是在毛细管内实现的等电聚焦过程,具有极高的分辨率,通常可以分离等电点差异小于单位的两种蛋白质,例如肽类蛋白质的分离。毛细管等电聚焦电泳仪第五第五节移速度就快,最终中性溶质将依其疏水性不同而得以分离。第五节毛细管电泳毛细管胶束电动色谱原理图第五节毛细管电泳四毛细管等电聚焦电泳不同等电点的分子分别聚集在不同的位置上,不作迁淌度和分配行为上的差异而实现分离。高效毛细管电泳仪第五节毛细管电泳毛细管电泳仪装置示意图第五节毛细管电泳三毛细管电泳的特点高灵敏度高速度高分辨率样品少自动化程度高应用范围广系统,是种较理想的电泳仪。全自动电泳仪第五节毛细管电泳毛细管电泳的基本工作原理溶液中的带电粒子以高压电场为驱动力,沿毛细管通道,以不同速度向与其所带电荷相反的电极方向迁移,并依据样品中各组分之间自动电泳分析系统全自动电泳分析系统,将上述仪器的优点集于身,仪器自动点样电泳呈色或染色脱色烘干,自动化程度非常高。可用各种电泳片,包括琼脂片醋酸片聚丙烯酰胺等,采用可见光及荧光呈色双糖凝胶电泳胶片。灵敏度高,可适用于低浓度蛋白检验,如尿蛋白脑脊液蛋白同工酶的分离。但其自动化程度较差。由于这类电泳仪所能做的项目较多,且灵敏度较高,仍为许多实验室所接受。第四节常用电泳仪简介五全片放好后,其最大优点是荧光系统全自动,只需要即可完成电泳分析,速度非常快。操作人员可离机完成实验并得到结果。第四节常用电泳仪简介四全自动琼脂糖电泳仪全自动琼脂糖电泳仪,有可见光单系统,使用琼脂,优点为自动化程度高。只需将样品试剂电泳片放好,人员可离机完成实验并得到结果。第四节常用电泳仪简介三全自动荧光可见光双系统电泳仪全自动荧光可见光双系统电泳仪只需将样品试剂和琼脂糖凝胶电泳胶电泳仪工作稳定性好调节范围宽,并设有完善的短路保护电路和过流保护电路。稳压稳流电泳仪第四节常用电泳仪简介二全自动醋纤膜电泳仪全自动醋纤膜电泳仪为全自动电泳仪,有可见光单系统,使用醋酸纤维薄膜电泳片稳定度定时方式电流稳定度第四节常用电泳仪简介稳压稳流电泳仪稳压稳流电泳仪是稳压稳流电泳仪是目前国内中低压电泳实验中应用最广泛的电泳仪之。其输出电压的调节范围为输出电流为。这种用电泳设备的基本结构电泳电源二电泳槽三附加装置平卧式电泳槽装置示意图第三节常用电泳仪的基本结构及技术指标二电泳仪的主要技术指标输出电压功率稳定度输出电流连续工作时间输出功率显示方式电压的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此分开,然后加入抗体做双相免疫扩散,把已分离的各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇,在二者比例适当的地方,形成肉眼可见的沉淀弧。第三节常用电泳仪的基本结构及技术指标常丙烯酰胺凝胶电泳分子量逐渐降低逐渐降低双向凝胶电泳示意图第二节常用电泳方法第二节常用电泳方法七免疫电泳免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩散两种方法的结合。将抗原样品在琼脂平板上先进行电泳,使其中中电加解入质了溶双液加上电场后建立稳定梯度蛋白质溶液加入,建立电场染色后,蛋白质因值不同,沿梯度分离开第向等电聚焦逐渐降低等电聚焦胶放在聚丙烯酰胺凝胶上第二向聚的不同,将蛋白质进行分离。第二向采用了十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。其结果不再是条带状,而是呈现为斑点状。双向凝胶电泳仪胶性间,在强电场的作用下,各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中移动,实现分离。等速电泳示意图第二节常用电泳方法六双向凝胶电泳二维电泳第向采用等电聚焦根据复杂的蛋白质成分中各个蛋白质的两种不同浓度的电解质,种为前导电解质,充满整个毛细管柱另种为尾随电解质,置于端的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何样品组分,尾随电解质则低于任何样品组分,被分离的组分按其不同的迁移率夹在中间两种不同浓度的电解质,种为前导电解质,充满整个毛细管柱另种为尾随电解质,置于端的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何样品组分,尾随电解质则低于任何样品组分,被分离的组分按其不同的迁移率夹在中间,在强电场的作用下,各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中移动,实现分离。等速电泳示意图第二节常用电泳方法六双向凝胶电泳二维电泳第向采用等电聚焦根据复杂的蛋白质成分中各个蛋白质的的不同,将蛋白质进行分离。第二向采用了十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。其结果不再是条带状,而是呈现为斑点状。双向凝胶电泳仪胶性中电加解入质了溶双液加上电场后建立稳定梯度蛋白质溶液加入,建立电场染色后,蛋白质因值不同,沿梯度分离开第向等电聚焦逐渐降低等电聚焦胶放在聚丙烯酰胺凝胶上第二向聚丙烯酰胺凝胶电泳分子量逐渐降低逐渐降低双向凝胶电泳示意图第二节常用电泳方法第二节常用电泳方法七免疫电泳免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩散两种方法的结合。将抗原样品在琼脂平板上先进行电泳,使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此分开,然后加入抗体做双相免疫扩散,把已分离的各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇,在二者比例适当的地方,形成肉眼可见的沉淀弧。第三节常用电泳仪的基本结构及技术指标常用电泳设备的基本结构电泳电源二电泳槽三附加装置平卧式电泳槽装置示意图第三节常用电泳仪的基本结构及技术指标二电泳仪的主要技术指标输出电压功率稳定度输出电流连续工作时间输出功率显示方式电压稳定度定时方式电流稳定度第四节常用电泳仪简介稳压稳流电泳仪稳压稳流电泳仪是稳压稳流电泳仪是目前国内中低压电泳实验中应用最广泛的电泳仪之。其输出电压的调节范围为输出电流为。这种电泳仪工作稳定性好调节范围宽,并设有完善的短路保护电路和过流保护电路。稳压稳流电泳仪第四节常用电泳仪简介二全自动醋纤膜电泳仪全自动醋纤膜电泳仪为全自动电泳仪,有可见光单系统,使用醋酸纤维薄膜电泳片,优点为自动化程度高。只需将样品试剂电泳片放好,人员可离机完成实验并得到结果。第四节常用电泳仪简介三全自动荧光可见光双系统电泳仪全自动荧光可见光双系统电泳仪只需将样品试剂和琼脂糖凝胶电泳胶片放好后,其最大优点是荧光系统全自动,只需要即可完成电泳分析,速度非常快。操作人员可离机完成实验并得到结果。第四节常用电泳仪简介四全自动琼脂糖电泳仪全自动琼脂糖电泳仪,有可见光单系统,使用琼脂糖凝胶电泳胶片。灵敏度高,可适用于低浓度蛋白检验,如尿蛋白脑脊液蛋白同工酶的分离。但其自动化程度较差。由于这类电泳仪所能做的项目较多,且灵敏度较高,仍为许多实验室所接受。第四节常用电泳仪简介五全自动电泳分析系统全自动电泳分析系统,将上述仪器的优点集于身,仪器自动点样电泳呈色或染色脱色烘干,自动化程度非常高。可用各种电泳片,包括琼脂片醋酸片聚丙烯酰胺等,采用可见光及荧光呈色双系统,是种较理想的电泳仪。全自动电泳仪第五节毛细管电泳毛细管电泳的基本工作原理溶液中的带电粒子以高压电场为驱动力,沿毛细管通道,以不同速度向与其所带电荷相反的电极方向迁移,并依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离。高效毛细管电泳仪第五节毛细管电泳毛细管电泳仪装置示意图第五节毛细管电泳三毛细管电泳的特点高灵敏度高速度高分辨率样品少自动化程度高应用范围广第五节移速度就快,最终中性溶质将依其疏水性不同而得以分离。第五节毛细管电泳毛细管胶束电动色谱原理图第五节毛细管电泳四毛细管等电聚焦电泳不同等电点的分子分别聚集在不同的位置上,不作迁移而彼此分离,这就是等电聚焦分离过程。毛细管的等电聚焦是在毛细管内实现的等电聚焦过程,具有极高的分辨率,通常可以分离等电点差异小于单位的两种蛋白质,例如肽类蛋白质的分离。毛细管等电聚焦电泳仪第五节毛细管电泳五毛细管等速电泳毛细管内首先导入具有比被分离各组分高电泳淌度的前导电解质,然后进样,随后再导入比各分离组份低电泳淌度的尾随电解质,在强电场的作用下,各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之间的空隙中发生分离。第五节毛细管电泳六毛细管电色谱它包含了电泳和色谱两种机制,是在毛细管中填充或在毛细管壁上键合或涂壁固定相,从而构成毛细管色谱柱,依靠电渗流推动流动相,携带样品迁移,根据样品分子的质荷比分子尺寸及分配系数的差别而分离。加压毛细管电色谱仪第五节毛细管电泳七毛细管电泳芯片毛细管电泳芯片是在常规毛细管电泳的原理和技术基础上,利用微加工技术在平方厘米级大小的芯片上加工出各种微细结构,如通道和其它功能单元,通过不同的通道反应器检测单元等的设计和布局,实现样品的进样反应分离和检测,是种多功能化的快速高效和低耗的微型实验装置。第五节毛细管电泳四毛细管电泳仪的基本结构毛细管电泳仪的结构并不复杂,主要有高压毛细管柱检测器,以及两个供毛细管两端插入而又可和电源相连的缓冲液槽。毛细管柱二检测器三毛细管电泳法的进样技术毛细管电泳仪第六节电泳仪的维护保养及故障排除电泳仪的维护保养每日维护二每周维护三每月维护四按需进行的维护毛细管电泳仪第六节电泳仪的维护保养及故障排除二电泳仪的故障排除电泳仪是精密仪器,在操作过程中要严格遵守操作规程,但不可避免会出现各种各样的故障,当仪器提示有故障时,应立即处理。毛细管电泳仪第六节电泳仪的维护保养及故障排除故障信息引起故障可能原因解决方法故障信息引起故障可能原因解决方法转盘识别错误细微灰尘吸附在灯上仪器关机,用洁净棉签轻轻拭去灯上面的灰尘。仪器开机后再进行的测定。样品识别错误血清分离不好或者有灰尘吸附关机状态,拆开仪器内透明有机玻璃,用无水乙醇擦拭加样针外壁,然后安装好,再用仪器内程序进行加样针清洗,洗完次后,进行加样针加样感应定位。仪器报警出现缺少稀释杯或稀释杯感应错误仪器稀释杯位置错误观察稀释杯位置,如果没有处于正常位置,可手动将其移动到其原来位置,然后进行稀释杯感应定标。曲线不理想,显示不稳定毛细管的长期使用出现不清洁毛细管清洗程序进行清洗,然后按激活程序进行激活既可电泳时出现峰丢失未接入检测器,或检测器不起作用进样温度太低柱箱温度太低无载气流检查设定值。检查温度,并根据需要调整。检查温度,并根据需要调整。检查压力调节器,并检查泄漏,验证柱进品流速。仪器运行过程中突然断电电流量不稳定或仪器内有短路现象采用稳压措施,咨询工程师更换保险毛细管电泳仪常见故障及故障排除方法第七节电泳仪的临床应用血清蛋白电泳新鲜血清经醋酸纤维薄膜或琼脂糖电泳染色后,通常可见条带,即清蛋白和球蛋白。许多疾病总血清蛋白浓度和各蛋白组分的比例有所改变,通过血清蛋白电泳图谱能帮助我们对些疾病进行诊断及鉴别诊断。血清蛋白电泳图谱第七节电泳
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