不同,使荧光屏上的电子强度也相应不同。电镜制样技术由于电子束的穿透能力有限,为了获得较高分辨率,需要使用超薄切片机制成厚度般仅为的超薄切片。这就需要样品有定的刚性和韧性,为此,样品需要包埋在而不是光学透镜,电子透镜不是肉眼可见的物质透镜,它是由磁或电所形成的磁场或电场的局部空间来起到透镜的作用。•第三个区别是成像原理不同。其成像是由于标本中不同结构中原子与电子发生碰撞后,造成电子散射角度些结构,就必须选择波长更短的光源,以提高显微镜的分辨率。电子显微镜与光学显微镜的结构,从原理上来说是相似的,但也有不同之处。•首先不同的是用电子束电子流代替照明光源。•其次,电镜使用的是电子透镜,微结构,我们把这些细微结构称为亚显微结构或超微结构。要看清这其中瓶损伤恢复活率中午每组传细胞入孔培养板孔晚上孔正常孔损伤次日损伤孔中,其中孔损伤恢复分离每组传代细胞传培养瓶瓶细胞电子显微镜检测细胞电镜标本制备原理光学显微镜无法看清小于的细恢复•用不同的实验方法检测验证实验结果实验内容•细胞电子显微镜检测•细胞活率测定•亚细胞结构的分离与鉴定实验设计昨天细胞传代电镜中午每班传细胞入含小盖片培养瓶瓶晚上瓶正常瓶损伤次日损伤瓶中,用显微镜•使用液临用前稀释原液告知实验三凋亡相关基因在不同细胞中表达差异检测免疫组化法时间月日细胞损伤与保护实验二•设组不同的细胞组正常损伤损伤定液涂片酒精灯烤干甲醇固定染色自来水冲洗吸水纸吸干玻片反面显微镜倍或倍下观察鉴定结果•细胞核染成深兰色注意事项•注意正确使用离心机平衡对称•正确使染液操作收集细胞消化法离心沉淀加,冲打,静置离心取沉淀加蔗糖溶液,打匀离心取沉淀加少量固,常用差速离心法密度梯度离心法来分离各种细胞器。分离的各种细胞器可以用组化等方法加以鉴定。器材与试剂•培养细胞•离心机天平离心管显微镜滴管等染色缸•消化液蔗糖溶液甲醇固定液,避免影响实验的区分度•高浓度血清会导致实验本底增高,比色前尽量使血清浓度不超过。亚细胞结构的分离与鉴定细胞核的提取原理细胞内各种细胞器质量不同,在同离心场内的沉降速度也不相同。根据这原理孔吸弃培养液,加溶液,振荡分钟酶标仪波长处比色。结果•活细胞被染成紫色,而死细胞不被染色•记录酶标仪上光吸收值,记录结果•分析每组细胞生长情况注意事项•每孔的细胞密度不能超出每孔加培养液孔正常高糖孔损伤无糖孔损伤恢复无糖有糖,饱和湿度下培养测定前,每孔吸弃原培养液,加高糖培养液再加溶液,继续培养到测定时,每品制备的第步就是固定,其后依次是包埋切片和染色。超薄切片的制备固定四氧化锇和戊二醛等,四氧化锇进行后固定溶液培养液高糖无糖实验步骤接种细胞于孔板每组孔束的穿透能力有限,为了获得较高分辨率,需要使用超薄切片机制成厚度般仅为的超薄切片。这就需要样品有定的刚性和韧性,为此,样品需要包埋在特殊的介质中。但包埋的过程会破坏样品的结构,因此超薄切片样电所形成的磁场或电场的局部空间来起到透镜的作用。•第三个区别是成像原理不同。其成像是由于标本中不同结构中原子与电子发生碰撞后,造成电子散射角度不同,使荧光屏上的电子强度也相应不同。电镜制样技术由于电子显微镜与光学显微镜的结构,从原理上来说是相似的,但也有不同之处。•首先不同的是用电子束电子流代替照明光源。•其次,电镜使用的是电子透镜,而不是光学透镜,电子透镜不是肉眼可见的物质透镜,它是由磁或电显微镜与光学显微镜的结构,从原理上来说是相似的,但也有不同之处。•首先不同的是用电子束电子流代替照明光源。•其次,电镜使用的是电子透镜,而不是光学透镜,电子透镜不是肉眼可见的物质透镜,它是由磁或电所形成的磁场或电场的局部空间来起到透镜的作用。•第三个区别是成像原理不同。其成像是由于标本中不同结构中原子与电子发生碰撞后,造成电子散射角度不同,使荧光屏上的电子强度也相应不同。电镜制样技术由于电子束的穿透能力有限,为了获得较高分辨率,需要使用超薄切片机制成厚度般仅为的超薄切片。这就需要样品有定的刚性和韧性,为此,样品需要包埋在特殊的介质中。但包埋的过程会破坏样品的结构,因此超薄切片样品制备的第步就是固定,其后依次是包埋切片和染色。超薄切片的制备固定四氧化锇和戊二醛等,四氧化锇进行后固定溶液培养液高糖无糖实验步骤接种细胞于孔板每组孔每孔加培养液孔正常高糖孔损伤无糖孔损伤恢复无糖有糖,饱和湿度下培养测定前,每孔吸弃原培养液,加高糖培养液再加溶液,继续培养到测定时,每孔吸弃培养液,加溶液,振荡分钟酶标仪波长处比色。结果•活细胞被染成紫色,而死细胞不被染色•记录酶标仪上光吸收值,记录结果•分析每组细胞生长情况注意事项•每孔的细胞密度不能超出,避免影响实验的区分度•高浓度血清会导致实验本底增高,比色前尽量使血清浓度不超过。亚细胞结构的分离与鉴定细胞核的提取原理细胞内各种细胞器质量不同,在同离心场内的沉降速度也不相同。根据这原理,常用差速离心法密度梯度离心法来分离各种细胞器。分离的各种细胞器可以用组化等方法加以鉴定。器材与试剂•培养细胞•离心机天平离心管显微镜滴管等染色缸•消化液蔗糖溶液甲醇固定液染液操作收集细胞消化法离心沉淀加,冲打,静置离心取沉淀加蔗糖溶液,打匀离心取沉淀加少量固定液涂片酒精灯烤干甲醇固定染色自来水冲洗吸水纸吸干玻片反面显微镜倍或倍下观察鉴定结果•细胞核染成深兰色注意事项•注意正确使用离心机平衡对称•正确使用显微镜•使用液临用前稀释原液告知实验三凋亡相关基因在不同细胞中表达差异检测免疫组化法时间月日细胞损伤与保护实验二•设组不同的细胞组正常损伤损伤恢复•用不同的实验方法检测验证实验结果实验内容•细胞电子显微镜检测•细胞活率测定•亚细胞结构的分离与鉴定实验设计昨天细胞传代电镜中午每班传细胞入含小盖片培养瓶瓶晚上瓶正常瓶损伤次日损伤瓶中,其中瓶损伤恢复活率中午每组传细胞入孔培养板孔晚上孔正常孔损伤次日损伤孔中,其中孔损伤恢复分离每组传代细胞传培养瓶瓶细胞电子显微镜检测细胞电镜标本制备原理光学显微镜无法看清小于的细微结构,我们把这些细微结构称为亚显微结构或超微结构。要看清这些结构,就必须选择波长更短的光源,以提高显微镜的分辨率。电子显微镜与光学显微镜的结构,从原理上来说是相似的,但也有不同之处。•首先不同的是用电子束电子流代替照明光源。•其次,电镜使用的是电子透镜,而不是光学透镜,电子透镜不是肉眼可见的物质透镜,它是由磁或电所形成的磁场或电场的局部空间来起到透镜的作用。•第三个区别是成像原理不同。其成像是由于标本中不同结构中原子与电子发生碰撞后,造成电子散射角度不同,使荧光屏上的电子强度也相应不同。电镜制样技术由于电子束的穿透能力有限,为了获得较高分辨率,需要使用超薄切片机制成厚度般仅为的超薄切片。这就需要样品有定的刚性和韧性,为此,样品需要包埋在特殊的介质中。但包埋的过程会破坏样品的结构,因此超薄切片样品制备的第步就是固定,其后依次是包埋切片和染色。超薄切片的制备固定四氧化锇和戊二醛等,电所形成的磁场或电场的局部空间来起到透镜的作用。•第三个区别是成像原理不同。其成像是由于标本中不同结构中原子与电子发生碰撞后,造成电子散射角度不同,使荧光屏上的电子强度也相应不同。电镜制样技术由于电子品制备的第步就是固定,其后依次是包埋切片和染色。超薄切片的制备固定四氧化锇和戊二醛等,四氧化锇进行后固定溶液培养液高糖无糖实验步骤接种细胞于孔板每组孔孔吸弃培养液,加溶液,振荡分钟酶标仪波长处比色。结果•活细胞被染成紫色,而死细胞不被染色•记录酶标仪上光吸收值,记录结果•分析每组细胞生长情况注意事项•每孔的细胞密度不能超出,常用差速离心法密度梯度离心法来分离各种细胞器。分离的各种细胞器可以用组化等方法加以鉴定。器材与试剂•培养细胞•离心机天平离心管显微镜滴管等染色缸•消化液蔗糖溶液甲醇固定液定液涂片酒精灯烤干甲醇固定染色自来水冲洗吸水纸吸干玻片反面显微镜倍或倍下观察鉴定结果•细胞核染成深兰色注意事项•注意正确使用离心机平衡对称•正确使恢复•用不同的实验方法检测验证实验结果实验内容•细胞电子显微镜检测•细胞活率测定•亚细胞结构的分离与鉴定实验设计昨天细胞传代电镜中午每班传细胞入含小盖片培养瓶瓶晚上瓶正常瓶损伤次日损伤瓶中,微结构,我们把这些细微结构称为亚显微结构或超微结构。要看清这而不是光学透镜,电子透镜不是肉眼可见的物质透镜,它是由磁或电所形成的磁场或电场的局部空间来起到透镜的作用。•第三个区别是成像原理不同。其成像是由于标本中不同结构中原子与电子发生碰撞后,造成电子散射角度
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