的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的。优点与杂交育种相比克服了的障碍。与诱变育种相比改造生物的遗传性状。重组转基因生物类型和生物产品远缘杂交不亲和定向二基因工程的工具限制性核酸内切酶简称。来源主要从生物中分离纯化出来。特点双链分子的种特定核苷酸序列，并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开。结果产生或平末端。限制酶原核识别磷酸二酯键黏性末端连接酶类型根据酶的来源不同，可分为连接酶和。作用连接双链片段，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的。连接酶磷酸二酯键载体种类质粒噬菌体的衍生物等。质粒。化学本质小型双链环状分子。特点能有限制酶切割位点有特殊的动植物病毒自我复制异株细胞。由图乙知，获得基因需酶和酶对此基因所在的进行切割，同时对质粒也要用同种酶切割处理，以便构建重组质粒。由题意知四种酶同时切割时含对碱基的片段共有个。若用酶和酶同时切割时酶在它识别序列的中心轴进行光合作用。表达载体构建时需限制酶和连接酶等工具酶。由题干信息“构建该种生物缺失基因的变异株细胞”可知，构建重组质粒的目的在于破坏基因并筛选出变含有目的基因的除可用Ⅰ切割外，还可用另种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是。按其来源不同，基因工程中所使用的连接酶有两类，即连接酶和连接酶。解析当限制根据基因工程的有关知识，回答下列问题限制性内切酶切割分子后产生的片段，其末端类型有和。质粒载体用Ⅰ切割后产生的片段如下„„„„为使载体与目的基因相连，构，如图乙中限制酶Ⅰ会破坏标记基因如果所选酶的切割位点不是个，则切割重组后可能丢失些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。考题回访济南模拟也有这两种酶的切割位点。根据质粒的特点确定限制酶的种类。所选限制酶要与切割目的基因的限制酶致，以确保产生相同的黏性末端。质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结位点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择Ⅰ。为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用Ⅰ和Ⅰ两种限制酶但要确保质粒上用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。提分技法限制酶的选择技巧根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类。应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择Ⅰ。不能选择切割条件目的稳定并能复制目的基因稳定存在且数量可扩大有个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因便于重组的鉴定和选择作用。作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。利系限制酶和连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。限制酶不切割自身的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。连接酶起作用时，不需要模板。载体条件与目的识别序列的特点呈现碱基互补对称，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到条中心轴线，如，以中心线为轴，两侧碱基互补对称以为轴，两侧碱基互补对称。切割后末端的种类限制酶和连接酶的关聚合酶解旋酶作用底物分子分子片段脱氧核苷酸分子作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的氢键形成产物黏性末端或平末端形成重组分子新的分子形成单链限制酶获得扩增人工合成。四种检测方法分子杂交分子杂交抗原抗体杂交个体生物学水平的抗性检测。考点基因工程的工具与有关的四种酶比较项目限制酶连接酶标记基因对受体细胞无伤害。基因工程的基本操作程序的四个主要步骤目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定。目的基因的获取与检测三种获取方法基因文库直接程的基本工具两种工具酶限制酶连接酶。种运输工具载体。载体的种类和条件常见三种类型质粒噬菌体的衍生物动植物病毒。四条件能够自我复制有多个限制酶切割位点具有。结果改造了现有蛋白质或制造出。应用主要集中应用于对进行改造，改良生物性状。转录翻译分子设计多肽链预期功能新的蛋白质现有蛋白质速记卡片基因工抗逆能力农作物的品质生产药物生物反应器器官移植工程菌正常基因表达产物五蛋白质工程流程图写出流程图中字母代表的含义抗逆能力农作物的品质生产药物生物反应器器官移植工程菌正常基因表达产物五蛋白质工程流程图写出流程图中字母代表的含义。结果改造了现有蛋白质或制造出。应用主要集中应用于对进行改造，改良生物性状。转录翻译分子设计多肽链预期功能新的蛋白质现有蛋白质速记卡片基因工程的基本工具两种工具酶限制酶连接酶。种运输工具载体。载体的种类和条件常见三种类型质粒噬菌体的衍生物动植物病毒。四条件能够自我复制有多个限制酶切割位点具有标记基因对受体细胞无伤害。基因工程的基本操作程序的四个主要步骤目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定。目的基因的获取与检测三种获取方法基因文库直接获得扩增人工合成。四种检测方法分子杂交分子杂交抗原抗体杂交个体生物学水平的抗性检测。考点基因工程的工具与有关的四种酶比较项目限制酶连接酶聚合酶解旋酶作用底物分子分子片段脱氧核苷酸分子作用部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的氢键形成产物黏性末端或平末端形成重组分子新的分子形成单链限制酶识别序列的特点呈现碱基互补对称，无论是奇数个碱基还是偶数个碱基，都可以找到条中心轴线，如，以中心线为轴，两侧碱基互补对称以为轴，两侧碱基互补对称。切割后末端的种类限制酶和连接酶的关系限制酶和连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。限制酶不切割自身的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。连接酶起作用时，不需要模板。载体条件与目的条件目的稳定并能复制目的基因稳定存在且数量可扩大有个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因便于重组的鉴定和选择作用。作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。提分技法限制酶的选择技巧根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类。应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择Ⅰ。不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择Ⅰ。为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用Ⅰ和Ⅰ两种限制酶但要确保质粒上也有这两种酶的切割位点。根据质粒的特点确定限制酶的种类。所选限制酶要与切割目的基因的限制酶致，以确保产生相同的黏性末端。质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶Ⅰ会破坏标记基因如果所选酶的切割位点不是个，则切割重组后可能丢失些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。考题回访济南模拟根据基因工程的有关知识，回答下列问题限制性内切酶切割分子后产生的片段，其末端类型有和。质粒载体用Ⅰ切割后产生的片段如下„„„„为使载体与目的基因相连，含有目的基因的除可用Ⅰ切割外，还可用另种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是。按其来源不同，基因工程中所使用的连接酶有两类，即连接酶和连接酶。解析当限制酶在它识别序列的中心轴进行光合作用。表达载体构建时需限制酶和连接酶等工具酶。由题干信息“构建该种生物缺失基因的变异株细胞”可知，构建重组质粒的目的在于破坏基因并筛选出变异株细胞。由图乙知，获得基因需酶和酶对此基因所在的进行切割，同时对质粒也要用同种酶切割处理，以便构建重组质粒。由题意知四种酶同时切割时含对碱基的片段共有个。若用酶和酶同时切割时，产生的片段有对碱基另片段为对碱基。答案没有以核膜为界限的细胞核能够进行光合作用限制性核酸内切酶和连接酶破坏基因操作成功后筛选出该变异株细胞酶和酶质粒和含基因的含有对碱基和对碱基的两种片段加固训练土壤农杆菌是种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有质粒。质粒是携带细菌向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，其上只有片段才能转入植物细胞的基因组。质粒的结构及转化过程如图所示，请分析并回答为了使种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对质粒进行修饰，即去除冠瘿瘤基因，将抗旱基因转移至片段，然后在定条件下将外植体在含土壤农杆菌的稀释培养基上培养，此时修饰的转入植物细胞并整合到植物基因组中。将上述外植体置于个含有的选择培养基中进行筛选，发生转化的外植体开始增殖，形成后，通过产生不定芽再长出整个植物。基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，可以直接在个体水平对上述转基因植物与非转基因植物的性能进行比较。解析目的基因要插入上，外植体与含目的基因的土壤农杆菌混合培养，修饰的转入植物细胞并整合到植物基因组中。质粒含有抗四环素基因，将外植体置于含有四环素的选择培养基中培养筛选，发生转化的外植体能增殖，形成愈伤组织后，通过产生不定芽再长出整个植物。对转基因植物与非转基因植物的抗旱性能进行比较，是在个体水平。答案四环素愈伤组织抗旱易错提醒基因工程所用的工具与常用的工具酶不同工具包含工具酶和载体，工具酶包括限制酶和连接酶。由于外源基因插入的位置未知，因此目的基因不定表达，因此需要检测。如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图，据图回答下列问题代表的物质和质粒的化学本质都是，二者还具有其他共同点，如，写出两条即可。若质粒分子的切割末端为，则与之连接的目的基因切割末端应为可使用把质粒和目的基因连接在起。氨苄青霉素抗性基因在质粒上称为，其作用是。下列常在基因工程中用作载体的是苏云金芽孢杆菌抗虫基因土壤农杆菌环状分子大肠杆菌的质粒动物细胞的染色体解题指南解答本题需注意两点质粒的化学本质是小型环状分子。质粒作为载体的条件以及载体的种类。解析代表的物质是大型环状分子，质粒是种裸露的结构简单于细菌拟核之外的小型环状分子，两者都能自我复制，并蕴含遗传信息。