22（毕业论文）谷朊粉水解物螯合锌的制备工艺研究文档

螯合物的鉴定极差加入过量的硫化钠前样品水溶液中，用茚三酮试剂检测，溶液颜色未发生改变加入过量的硫化钠后样品水溶液中得到的黄色滤液，用茚三酮试剂检测，溶液变为紫红色，即样品溶液中没有游离的氨基酸或小肽，在生成金属无机盐沉淀后溶液中有游离的氨基酸或小肽。

这说明待测物质是谷朊粉水解物和锌离子形成的种特殊物质，该物质即是谷朊粉水解物与锌的螯合物。

讨论影响螯合反醇离心分离，将所得沉淀用水溶解定容在容量瓶中，定容，摇匀。

用络合滴定法测定螯合态锌离子的含量。

络合滴定准确移取试液于锥形瓶中，加两滴二甲酚橙指示剂，滴加质量分数为的六亚甲基螯合物总重量。

螯合率的测定准确移取谷朊粉水解物螯合液于容量瓶中，定容，摇匀，用络合滴定法测定锌离子的总量另移取谷朊粉水解物螯合液于烧瓶中浓缩至近干，加入无水乙离心获得沉淀无水乙醇洗涤抽滤次少量乙醚洗涤抽滤左右烘干螯合物。

指标的测定方法螯合物得率的测定螯合物得率按下式计算螯合物得率反应物总重量法值加酶量温度反应时间胰蛋白酶胃蛋白酶碱性蛋白酶螯合物的制备工艺称取定量的谷朊粉水解物于大烧杯中用蒸馏水溶解加入定量的氯化锌溶液调节值在水浴离心分离沸水浴冷却离心分离离心取上清液浓缩干燥谷朊粉水解物。

各制备方法具体见表。

表谷朊粉水解物的制备制备方限公司方法谷朊粉水解物的制备工艺分别称取谷朊粉于大烧杯中用蒸馏水定容在水浴冷却调节值调节温度加酶水解期间用的和的维持稳定灭酶活循环水式多用真空泵郑州长城科工贸易有限公司低速离心机科大创新股份有限公司中佳分公司数显恒温水浴锅国华电器有限公司精密计上海精科公司型电热鼓风干燥箱黄石力恒丰医疗器械有氯化锌国药集团化学试剂有限公司硫化钠，上海统亚化工科技发展有限公司乙二氨四乙酸二钠，国药集团化学试剂有限公司。

仪器磁力加热搅拌器江苏金坛市金城国胜实验仪器厂Ш料与方法试剂与仪器原料谷朊粉江苏睢宁科泰小麦蛋白科技有限公司。

试剂胃蛋白酶，中国医药集团上海试剂公司胰蛋白酶，中国医药集团上海试剂公司碱性蛋白酶，中国医药集团上海试剂公司螯合锌相结合，可有效降低有机螯合锌的成本提高谷朊粉的附加产值。

对于食品强化锌制剂的开发具有积极意义，可有效提高强化食品中锌的吸收利用率，对锌需要量较大的儿童孕妇乳母等特殊人群具有重要意义。

材比无机盐高，且无毒副作用。

因此在日常饮食中合理添加有机锌是条预防缺锌切实可行而有效的途径，但由于现在的有机锌价格都比较昂贵，而不利于强化普及使用。

本项目将谷朊粉的精深加工利用与营养强化剂研制的非特异免疫功能和特异性细胞免疫及体液免疫功能，与无机锌相比有机锌吸收利用率更高。

早在世纪年代人们就已经发现氨基酸和小肽具有促进锌吸收的作用，且氨基酸和肽的金属复合体如和的生物学利用率就会减少，不再对锌的吸收产生影响。

另据调查，吃面包的西方人，缺锌状况就相对较少。

除了食物固有因素带来的吸收问题，朱璘等人研究了有机锌对小鼠免疫功能的影响，结果表明有机螯合锌能增强免疫低下小鼠的北方人长得比较高，而习惯吃米饭的南方人则相对矮些，这是因为在米面中存在植酸，它能够与锌元素结合，形成化合物，使得人体无法正常吸收，导致缺锌。

不过，存在于米面中的植酸也有个特点，如果把它发酵，植酸成锌摄入量不足。

锌主要存在于动物性食品中，我国家庭中多以植物性食物为主，而且植物性食品中的草酸植酸等严重干扰锌的吸收。

为什么北方人个头比南方人高有研究表明，主食是造成这种情况的重要原因。

习惯吃馒头州等多个城市调查发现，约有的儿童缺锌。

我国有多万先天愚型的儿童，经遗传免疫和临床研究，均显示和缺锌有关。

婴幼儿儿童青少年，生长发育速度较快，对锌营养的需求量很高，但往往饮食搭配不合理，造能脂质代谢等有着密切的关系。

虽然自然界中锌源十分丰富，但由于锌在人体内的吸收代谢受种种因素的限制，人类膳食中锌的相对缺乏并不罕见，婴幼儿老人妊娠期妇女的锌缺乏已被广泛研究。

据北京杭州郑州能脂质代谢等有着密切的关系。

虽然自然界中锌源十分丰富，但由于锌在人体内的吸收代谢受种种因素的限制，人类膳食中锌的相对缺乏并不罕见，婴幼儿老人妊娠期妇女的锌缺乏已被广泛研究。

据北京杭州郑州等多个城市调查发现，约有的儿童缺锌。

我国有多万先天愚型的儿童，经遗传免疫和临床研究，均显示和缺锌有关。

婴幼儿儿童青少年，生长发育速度较快，对锌营养的需求量很高，但往往饮食搭配不合理，造成锌摄入量不足。

锌主要存在于动物性食品中，我国家庭中多以植物性食物为主，而且植物性食品中的草酸植酸等严重干扰锌的吸收。

为什么北方人个头比南方人高有研究表明，主食是造成这种情况的重要原因。

习惯吃馒头的北方人长得比较高，而习惯吃米饭的南方人则相对矮些，这是因为在米面中存在植酸，它能够与锌元素结合，形成化合物，使得人体无法正常吸收，导致缺锌。

不过，存在于米面中的植酸也有个特点，如果把它发酵，植酸就会减少，不再对锌的吸收产生影响。

另据调查，吃面包的西方人，缺锌状况就相对较少。

除了食物固有因素带来的吸收问题，朱璘等人研究了有机锌对小鼠免疫功能的影响，结果表明有机螯合锌能增强免疫低下小鼠的非特异免疫功能和特异性细胞免疫及体液免疫功能，与无机锌相比有机锌吸收利用率更高。

早在世纪年代人们就已经发现氨基酸和小肽具有促进锌吸收的作用，且氨基酸和肽的金属复合体如和的生物学利用率比无机盐高，且无毒副作用。

因此在日常饮食中合理添加有机锌是条预防缺锌切实可行而有效的途径，但由于现在的有机锌价格都比较昂贵，而不利于强化普及使用。

本项目将谷朊粉的精深加工利用与营养强化剂研制螯合锌相结合，可有效降低有机螯合锌的成本提高谷朊粉的附加产值。

对于食品强化锌制剂的开发具有积极意义，可有效提高强化食品中锌的吸收利用率，对锌需要量较大的儿童孕妇乳母等特殊人群具有重要意义。

材料与方法试剂与仪器原料谷朊粉江苏睢宁科泰小麦蛋白科技有限公司。

试剂胃蛋白酶，中国医药集团上海试剂公司胰蛋白酶，中国医药集团上海试剂公司碱性蛋白酶，中国医药集团上海试剂公司氯化锌国药集团化学试剂有限公司硫化钠，上海统亚化工科技发展有限公司乙二氨四乙酸二钠，国药集团化学试剂有限公司。

仪器磁力加热搅拌器江苏金坛市金城国胜实验仪器厂Ш循环水式多用真空泵郑州长城科工贸易有限公司低速离心机科大创新股份有限公司中佳分公司数显恒温水浴锅国华电器有限公司精密计上海精科公司型电热鼓风干燥箱黄石力恒丰医疗器械有限公司方法谷朊粉水解物的制备工艺分别称取谷朊粉于大烧杯中用蒸馏水定容在水浴冷却调节值调节温度加酶水解期间用的和的维持稳定灭酶活沸水浴冷却离心分离离心取上清液浓缩干燥谷朊粉水解物。

各制备方法具体见表。

表谷朊粉水解物的制备制备方法值加酶量温度反应时间胰蛋白酶胃蛋白酶碱性蛋白酶螯合物的制备工艺称取定量的谷朊粉水解物于大烧杯中用蒸馏水溶解加入定量的氯化锌溶液调节值在水浴离心分离离心获得沉淀无水乙醇洗涤抽滤次少量乙醚洗涤抽滤左右烘干螯合物。

指标的测定方法螯合物得率的测定螯合物得率按下式计算螯合物得率反应物总重量螯合物总重量。

螯合率的测定准确移取谷朊粉水解物螯合液于容量瓶中，定容，摇匀，用络合滴定法测定锌离子的总量另移取谷朊粉水解物螯合液于烧瓶中浓缩至近干，加入无水乙醇离心分离，将所得沉淀用水溶解定容在容量瓶中，定容，摇匀。

用络合滴定法测定螯合态锌离子的含量。

络合滴定准确移取试液于锥形瓶中，加两滴二甲酚橙指示剂，滴加质量分数为的六亚甲基四胺至溶液呈现稳定的紫红色，再加六亚甲基四胺。

用滴定，当溶液由紫红色转变为黄色时为滴定终点。

锌离子的总量螯合态锌离子的含量螯合率滴定螯合态锌离子所消耗的溶液体积滴定全部锌离子所消耗的溶液体积。

螯合物制备条件的优化单因素试验在其他条件都相同的情况下，以螯合物得率和螯合率为指标，分别考察谷朊粉水解物的制备方法胰蛋白酶法胃蛋白酶法碱性蛋白酶法值谷朊粉水解物与锌离子质量比个因素对螯合物制备的影响。

正交试验在单因素试验的基础上，选择水平进而设计正交试验，以螯合物得率和螯合率为指标，优选最佳螯合工艺物得率明显下降螯合率在谷朊粉水解物与锌离子质量比为时最大，再增大谷朊粉水解物与锌离子质量比，螯合率基本不变。

正交试验结果分析通过单因素试验得到正交试验因素水平见表。

试验结果见表表正交试验设计因素水平水平谷朊粉水解物的制备方法值谷朊粉水解物与锌离子质量比胰蛋白酶法胃蛋白酶法碱性蛋白酶法表正交试验结果水平因素螯合物得率螯合率螯合物得率结果如下螯合率结果如下极差由表可知，影响螯合物得率的因素的主次顺序为，即谷朊粉水解物的制备方法谷朊粉水解物与锌离子质量比值，其最佳的螯合工艺条件为，影响螯合率的因素主次顺序为，即谷朊粉水解物与锌离子质量比谷朊粉水解物的制备方法值，其最佳的螯合工艺条件为，总的来看当谷朊粉水解物的制备方法为碱性蛋白酶法，值为，谷朊粉水解物与锌离子质量比为，此条件下螫合物得率最大为，螯合率最大为。

螯合物的鉴定极差加入过量的硫化钠前样品水溶液中，用茚三酮试剂检测，溶液颜色未发生改变加入过量的硫化钠后样品水溶液中得到的黄色滤液，用茚三酮试剂检测，溶液变为紫红色，即样品溶液中没有游离的氨基酸或小肽，在生成金属无机盐沉淀后溶液中有游离的氨基酸或小肽。

这说明待测物质是谷朊粉水解物和锌离子形成的种特殊物质，该物质即是谷朊粉水解物与锌的螯合物。

讨论影响螯合反应的因素影响螯合反应的因素较多，除了该试验的个因素外，锌盐的种类螯合反应时间