1、“.....限制酶在细菌内会将外源切割掉，以保证自身的安全。而限制酶不会切断自身，是因为在原核生物细胞中，其分子或者不具备这种限制酶的识别序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。知识构建基因工程的基本工具分子手术刀限制性核酸内切酶来源作用结果分子缝合针连接酶分类作用分子运输车基因进入受体细胞的载体常用载体质粒载体的条件其他载体应用探究目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒，质粒是较早构建的质粒载体，其主要结构如下图所示。构建人工质粒时要有抗性基因，以便于。分子中有单个限制酶作用位点，只能识别序列，并只能在与之间切割。若在目的基因的两侧各有个的切点，请画出目的基因两侧被限制酶切割后所形成的黏性末端。分子中另有单个的限制酶作用位点依次标为甲乙丙，只在甲处切，可产生两个片段，即和右边的段，如果只在乙处切，就有和段，如果只在丙处切......”。

2、“.....在甲乙两处同时切，就有和段，在乙丙种类数是答案解析每种限制性内切酶切割后会留下特征性的黏性末端，同时次切割后，会把分割成两个片段，且不同的限制酶切后的片段不样，如果将题图中的三个切割位点自左至右则会产生四种不同长度的片段。现有多个上述线性分子，若在每个分子上至少有个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性分子最多能产生长度不同的片段连接酶。答案平连接酶黏性连接酶已知种限制性内切酶在线性分子上有个酶切位点，如右图中箭头所指。如果该线性分子在个酶切位点上都被该酶切断，要形成重组片段，所用连接酶通常是。解析分析以上个片段，可清楚分析出为平末端，连接酶应用连接酶为黏性末端且相同，连接时应用成的末端，两者要重组成个分子，所用连接酶通常是。和是由另种限制酶切割形成的末端，两者个核苷酸之间的磷酸二酯键。以下是两种限制酶切割后形成的片段，分析回答问题......”。

3、“.....但后者效率低实质恢复被限制酶切开了的两性末端是反向重复序列。大多数限制酶的识别序列为个核苷酸组成，例如限制酶识别序列由个核苷酸组成，也有少数限制酶的识别序列由或个核苷酸组成。连接酶分类分子中特定的核苷酸序列只能在特定的部位进行切割。结果形成黏性末端或平末端。实质使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。知识贴士若限制酶切割后形成的是黏性末端，则形成的两个黏来源这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。种类迄今已从近种不同的微生物中分离出了约种限制酶。特点主要切割外源，而对自身的不起作用，达到保护自身的目的只能识别双链本单位，构成独特的双螺旋结构，这为不同种生物拼接成功提供物质基础。所有生物共用套遗传密码子，为生物的基因能够在其他生物细胞内正常指导蛋白质的合成提供可能......”。

4、“.....要求必须对受体细胞无害，为什么答案专性载体如果对受体细胞有害，其旦被导入受体细胞，就会影响受体细胞的生命活动，甚至破坏受体的生命活动。要点精析对基因工程概念的理解基因工程的别名基因拼接链环状。有个至多个限制酶切割位点有特殊的遗传标记基因质粒动植物病毒结构简单于细菌拟核之外自我复制思维激活不同的限制酶具有不同的识别序列，说明限制酶具有什么特点作为运载工具的载体噬菌体的衍生物和等。其中最常用的是质粒。它是种裸露的，并具有能力的双在宿主细胞中能保存下来并能大量复制。基因工程中使用的载体有在宿主细胞中能保存下来并能大量复制。基因工程中使用的载体有噬菌体的衍生物和等。其中最常用的是质粒。它是种裸露的，并具有能力的双链环状。有个至多个限制酶切割位点有特殊的遗传标记基因质粒动植物病毒结构简单于细菌拟核之外自我复制思维激活不同的限制酶具有不同的识别序列......”。

5、“.....要求必须对受体细胞无害，为什么答案专性载体如果对受体细胞有害，其旦被导入受体细胞，就会影响受体细胞的生命活动，甚至破坏受体的生命活动。要点精析对基因工程概念的理解基因工程的别名基因拼接技术或重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平分子水平基本过程剪切拼接导入表达结果人类需要的基因产物知识贴士基因工程得以实现的理论基础所有生物的都是以种脱氧核苷酸为基本单位，构成独特的双螺旋结构，这为不同种生物拼接成功提供物质基础。所有生物共用套遗传密码子，为生物的基因能够在其他生物细胞内正常指导蛋白质的合成提供可能。二基因工程的工具限制性核酸内切酶来源这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。种类迄今已从近种不同的微生物中分离出了约种限制酶。特点主要切割外源，而对自身的不起作用，达到保护自身的目的只能识别双链分子中特定的核苷酸序列只能在特定的部位进行切割。结果形成黏性末端或平末端。实质使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开......”。

6、“.....则形成的两个黏性末端是反向重复序列。大多数限制酶的识别序列为个核苷酸组成，例如限制酶识别序列由个核苷酸组成，也有少数限制酶的识别序列由或个核苷酸组成。连接酶分类连接酶来源大肠杆菌作用使黏性末端之间连接连接酶来源噬菌体作用既能连接黏性末端也能连接平末端，但后者效率低实质恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。以下是两种限制酶切割后形成的片段，分析回答问题。„„„„„„„„其中和是由种限制酶切割形成的末端，两者要重组成个分子，所用连接酶通常是。和是由另种限制酶切割形成的末端，两者要形成重组片段，所用连接酶通常是。解析分析以上个片段，可清楚分析出为平末端，连接酶应用连接酶为黏性末端且相同，连接时应用连接酶。答案平连接酶黏性连接酶已知种限制性内切酶在线性分子上有个酶切位点，如右图中箭头所指。如果该线性分子在个酶切位点上都被该酶切断，则会产生四种不同长度的片段。现有多个上述线性分子......”。

7、“.....则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性分子最多能产生长度不同的片段种类数是答案解析每种限制性内切酶切割后会留下特征性的黏性末端，同时次切割后，会把分割成两个片段，且不同的限制酶切后的片段不样，如果将题图中的三个切割位点自左至右依次标为甲乙丙，只在甲处切，可产生两个片段，即和右边的段，如果只在乙处切，就有和段，如果只在丙处切，就有和段，在甲乙两处同时切，就有和段，在乙丙处同时切，就有和段，在甲丙两处同时切，就有段三种片段，在甲乙丙三处同时切，就有四种片段。所以本题应该选。“分子运输车”载体作用是用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制称为克隆。作为载体必须具备的条件具有个或多个限制酶切割位点，该切割位点必须位于载体本身必需的基因序列之外。能够自我复制或整合到染色体上后随染色体复制。带有标记基因，便于筛选。本身是安全的，不能对受体细胞产生危害。大小适中，便于操作......”。

8、“.....该切割位点必须位于载体本身必需的基因序列之外。能够自我复制或整合到染色体上后随染色体复制。带有标记基因，便于筛选。本身是安全的，不能对受体细胞产生危害。大小适中，便于操作。但实际上，天然载体般不会同时具备上述条件，所以在基因工程中需要对载体进行人工改造。现在所用的质粒几乎都是人工改造的。质粒是基因工程最常用的载体，它的主要特点是能自主复制不能自主复制结构很小是蛋白质是环状是环状能“友好”地“借居”解析质粒存在于细菌和酵母菌等生物中，是种很小的环状，上面有标记基因，便于在受体细胞中检测。质粒在受体细胞中能随受体细胞的复制而复制，能进行目的基因的扩增和表达。答案质粒是基因工程最常用的载体，下列关于质粒的说法正确的是质粒在宿主细胞内都要整合到染色体上质粒是于细菌拟核之外的小型细胞器基因工程操作中的质粒般都是经过人工改造的质粒上碱基之间数量存在答案解析基因工程使用的载体需有至多个酶切位点，具有自我复制的能力，存在标记基因，对受体细胞安全，且分子大小适合......”。

9、“.....都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。而质粒进入宿主细胞后不定都要整合到染色体上，如宿主细胞是细菌细胞则不需整合。质粒是小型环状双链分子而不是细胞器，也不会有碱基。思维升华与遗传有关的各种酶的比较名称作用参与的生理过程与应用作用位点如下图连接酶连接两个片段基因工程限制性核酸内切酶能够识别双链分子的种特定核苷酸序列，并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开名称作用参与的生理过程与应用作用位点如下图聚合酶在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧核苷酸的复制聚合酶在核糖核苷酸链上添加单个核糖核苷酸转录解旋酶使核碱基间氢键断裂形成单脱氧核苷酸链复制及转录逆转录酶以为模板合成逆转录基因工程特别提醒连接酶和聚合酶的作用都是催化形成磷酸二酯键，而不是氢键，氢键是分子间的静电吸引力，不需要通过酶的催化形成。连接酶只能在两个片段间形成磷酸二酯键，而聚合酶只能将单个核苷酸加到已有片段上，且需要以条链为模板......”。