TOP31毕业论文设计_沙门氏菌X4062染色体-质粒平衡致死系统的构建.doc文档免费在线阅读

我不是您最出色的学生，而您却是我最尊敬的老师。

您治学严谨，学识渊博，思想深邃，视野雄阔，为我营造了种良好的精神氛围。

在此我再次表示衷心的感谢。

也感谢所有任课老师和所有同学在这四年来给自己的指导和帮助，是他们教会了我专业知识，教会了我如何学习。

正是由于他们，我才能在各方面取得显减毒细菌活载体疫苗载体疫苗是将所需的编码病原特异性抗原的片段插入减毒的活细菌或病毒载体，以提呈表达所编码的抗原，以期达到预防种或多种疾病的作用。

重组细菌疫苗载体大多数利用共生细菌或者减毒的病原质粒在中的体外遗传稳定性重组菌表达产物的分析讨论参考文献致谢附录华南农业大学本科专业毕业论文成绩评定表前言减毒沙门氏菌载体系统的研究进展的鉴定重组质粒的构建及鉴定片段的扩增基因的扩增重组质粒的鉴定重组质粒在鼠伤寒沙门氏菌中的表达中的体外遗传稳定性实验结果与分析减毒鼠伤寒沙门氏菌缺失株的构建基因的制备含位点和基因的同源重组片段的制备同源重组菌的鉴定重组菌沙门氏菌的构建表达载体的构建策略载体构建所用引物重组质粒的构建质粒在减毒鼠伤寒沙门氏菌中的表达质粒在点和基因的同源重组片段的制备和纯化沙门氏菌电转感受态细胞的制备重组酶质粒的转化和诱导表达基因的敲除沙门氏菌的鉴定氯霉素抗性基因的去除含的双启动子互补表达载体减毒研究意义与目的研究内容技术路线材料与方法实验材料试剂和仪器毒株细胞菌株及质粒培养基试剂的配制仪器和器材方法减毒鼠伤寒沙门氏菌缺失株的构建菌株与质粒引物设计基因的制备含位目录前言减毒沙门氏菌载体系统的研究进展减毒细菌活载体疫苗减毒沙门氏菌活载体疫苗的应用减毒沙门氏菌进入机体免疫系统的机制沙门氏菌的目录前言减毒沙门氏菌载体系统的研究进展减毒细菌活载体疫苗减毒沙门氏菌活载体疫苗的应用减毒沙门氏菌进入机体免疫系统的机制沙门氏菌的减毒研究意义与目的研究内容技术路线材料与方法实验材料试剂和仪器毒株细胞菌株及质粒培养基试剂的配制仪器和器材方法减毒鼠伤寒沙门氏菌缺失株的构建菌株与质粒引物设计基因的制备含位点和基因的同源重组片段的制备和纯化沙门氏菌电转感受态细胞的制备重组酶质粒的转化和诱导表达基因的敲除沙门氏菌的鉴定氯霉素抗性基因的去除含的双启动子互补表达载体的构建表达载体的构建策略载体构建所用引物重组质粒的构建质粒在减毒鼠伤寒沙门氏菌中的表达质粒在中的体外遗传稳定性实验结果与分析减毒鼠伤寒沙门氏菌缺失株的构建基因的制备含位点和基因的同源重组片段的制备同源重组菌的鉴定重组菌沙门氏菌的鉴定重组质粒的构建及鉴定片段的扩增基因的扩增重组质粒的鉴定重组质粒在鼠伤寒沙门氏菌中的表达质粒在中的体外遗传稳定性重组菌表达产物的分析讨论参考文献致谢附录华南农业大学本科专业毕业论文成绩评定表前言减毒沙门氏菌载体系统的研究进展减毒细菌活载体疫苗载体疫苗是将所需的编码病原特异性抗原的片段插入减毒的活细菌或病毒载体，以提呈表达所编码的抗原，以期达到预防种或多种疾病的作用。

重组细菌疫苗载体大多数利用共生细菌或者减毒的病原菌作为载体，利用减毒病原菌作为载体，可以同时产生针对异源抗原和载体病原菌的免疫反应。

减毒细菌活载体疫苗因其能够刺激机体产生针对活载体及其携带的外源抗原的体液细胞免疫和局部粘膜免疫受到人们的广泛关注。

减毒细菌通过口服进入机体，诱导机体产生针对特定抗原的各种免疫应答。

减毒细菌通过突变其些致病基因，使其毒性降低，由于减毒的微生物仍有定的感染性，可以模拟天然的疾病发生过程，通过口服，进入肠道相关淋巴组织，因此可以全方位地激活机体免疫系统，从而产生粘膜免疫应答及全身免疫应答王芳，。

目前些病原菌，如李斯特菌沙门氏菌耶尔森菌志贺氏菌及分支杆菌己经被广泛用作载体菌携带外源抗原，而些有益的微生物也成功地被用做载体，如乳酸菌为载体的疫苗，它们可以以食物的形式进入体内，也可以通过阴道途径进行免疫童光志，。

减毒细菌活载体疫苗的优点培养方便，生产成本相对低廉，适用于大范围内的免疫接种免疫方法简便易行，可以通过口服和鼻腔接种高效的免疫原性，能够刺激机体的全身免疫可以携带较大的基因片段，易于构建多价疫苗。

减毒沙门氏菌活载体疫苗的应用沙门氏菌是寄生于人类和动物肠道，内生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。

沙门氏菌无芽胞，无荚膜，多数有菌毛，鞭毛。

沙门氏菌是肠杆菌科的重要病原菌属，到年为止已发现种血清型，。

沙门氏菌属分为两个种名，分别是和，其中又分为六个亚种。

绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性，能引起人和动物的多种不同临床表现的沙门氏菌病。

年首次从鼠身上分离出鼠伤寒沙门氏菌年证实该菌可引起食物中毒，明确了该菌可，致谢大学生涯即将结束，在论文完成之际，非常感谢赵亚华教授老师在我大学的最后学习阶段从毕业论文最初的定题，到资料收集，到写作修改，到论文定稿，老师倾注了大量的心血，严格把关，循循善诱，给了我耐心的指导和无私的帮助，在教导我完成毕业论文的同时，老师也教导我学习如何做人。

我不是您最出色的学生，而您却是我最尊敬的老师。

您治学严谨，学识渊博，思想深邃，视野雄阔，为我营造了种良好的精神氛围。

在此我再次表示衷心的感谢。

也感谢所有任课老师和所有同学在这四年来给自己的指导和帮助，是他们教会了我专业知识，教会了我如何学习。

正是由于他们，我才能在各方面取得显著的进步，在此向他们表示我由衷的谢意，并祝所有的老师培养出越来越多的优秀人才，桃李满天下，同时感谢广东省农科院兽医所的宣华老师，向华老师，张健騛老师，张凤英老师，黄元师兄，徐敏师兄，陈晶师姐，谢守玉师兄，陈少勤师姐，感谢他们在实验过程中对我的无私的帮助和关怀。

最后特别感谢李志强师兄在实验过程中全程的耐心指导，包容我的，指出我的不足，以及在论文的完成过程中师兄百忙之中抽出时间给了我大量的帮助，在此再次表示我衷心的感谢。

也借此机会感谢我的爸爸妈妈，养育之恩，无以回报，你们永远健康快乐是我最大的心愿。

最后再次感谢所有在毕业论文完成过程中曾经帮助过我的良师益友和同学们，以及在论文中被我引用或参考的论著的作者。

附录华南农业大学本科专业毕业论文成绩评定表学号姓名刘永伟专业生物科学毕业论文题目沙门氏菌染色体质粒平衡致死系统的构建指导教师评语成绩指导教师签名年月日评阅人评语及成绩评定成绩评定标准评分项目分值得分选题质量专业培养目标课题难易度课题工作量理论意义或实际价值能力水平查阅文献资料能力综合运用知识能力研究方案的设计能力研究方法和手段的运用能力外文应用能力成果质量写作水平写作规范篇幅成果的理论或实际价值评阅人评语成绩评阅人签名年月日续上表答辩组评语与成绩评定成绩评定标准评价项目具体要求级标准最高分评分论文设计质量水平论文设计结构严谨，逻辑性强有定的学术价值或实用价值文字表达准确流畅论文格式规范图表或图纸规范符合要求。

论文设计报告讲解思路清晰概念清楚，重点创新点突出语言表达准确报告时间节奏掌握好。

答辩情况回答问题有理有据，基本概念清楚主要问题回答准确有深度。

答辩组评语答辩组成员签名答辩组组长签名年月日成绩答辩委员会主任签名年月日论文成绩总评论文总评分数论文成绩总评等级注论文成绩评定等级参考评阅人的评阅指导教师评阅情况，结合答辩情况，建议按指导教师评分∶评阅人评分∶答辩评分为∶∶的比例评定论文总成绩分数，然后按优分良分中分及格分不及格分给出成绩等级。

论文成绩以分数的形式登记到教务管理系统。

本科毕业论文沙门氏菌染色体质粒平衡致死系统的构建指导教师教授学院名称生命科学学院专业名称生物科学论文提交日期年月日论文答辩日期年月答辩委员会主席评阅人摘要鉴于临床多种耐药性菌株不断产生和迅速水平传播扩散，食品与药物管理机构已禁止在重组菌生产中使用抗生素和含抗药性基因作为筛选标志的载体质粒。

染色体质粒平衡致死系统是近年来发展起来的类以非抗生素作为筛选标记的载体表达系统，它的宿主菌通常是类染色体管家基因的突变体，该缺陷型菌株不能在基本培养基上生长，当导入带有其完整基因的互补质粒后，质粒与缺陷型菌株即以遗传互补的方式构成染色体质粒平衡致死系统，此时互补质粒对其宿主菌的生长起到功能性互补的作用，旦质粒丢失，细菌则由于不能合成必需物质而死亡。

基于减毒沙门氏菌染色体上基因的已知序列，利用噬菌体的同源重组系统步法构建沙门氏菌的基因缺失突变株，在二次重组中利用携带能够表达位点特异性重组酶基因的质粒介导二次同源重组，以去除上述缺失突变株中氯霉素抗性筛选基因。

结合扩增和测序结果，证明沙门氏菌缺失突变株的正确构建。

另外，从沙门氏菌基因组中扩增出基因片段，将该片段整合到带有表达荧光蛋白基因的质粒中，命名为。

缺失突变株失去了在普通培养基上生长的能力，只有添加或导入含有基因的质粒才能在培养基上生长，与原型沙门氏菌比较，其生长速度和生长对数期接受不同拷贝数质粒的转化效率几乎相致，基于该缺失突变株构建出以营养基因为标志的沙门氏菌染色体质粒平衡致死系统。

关键词沙门氏菌受体菌重组系统基因缩略语及英汉对照氨苄青霉素氯霉素食品和药物管理局二氨基庚二酸基因双蒸水三磷酸脱氧核糖核苷细菌基础培养基小时分钟毫升毫摩尔摩尔聚合酶链式反应每分钟转数秒核糖核酸微升