1、“.....蛋白定量分析色谱法离子交换色谱和凝胶色谱电泳法醋酸纤维薄膜电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳，琼脂糖凝胶电泳离心质粒的小量快速制备中使用酶活性测定过氧化氢酶值测定酶竞争性抑制实验操作考试课堂讨论及课堂答疑色谱法第节概述色谱法早在年由俄国植物学家茨维特分离植物色素时采用。他在研究植物叶的色素成分时，将植物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内，然后加入石油醚使其自由流下，结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。阴离子交换剂←离子交换色谱分离样品时，主要依靠增加流动相离子强度或改变酸碱度来进行洗脱。增加流动相离子强度当缓冲液离子强度增加时，即增加了它与生物大分子对交换基团竞争吸附能力，把生物大分子置换下来。改变酸碱度当缓冲液接近生物大分子等电点时......”。

2、“.....从而可被洗脱。离子交换色谱二离子交换剂类型主要有离子交换树脂离第节概述按操作形式不同分类柱色谱法固定相装于柱内色谱法。平面色谱法色谱过程在固定相构成平面层内进行色谱法，包括纸色谱法薄层色谱法和薄膜色谱法。第二节常用色谱方法基本原理利用不同生物大分子带电部分与具有相反电荷离子交换剂吸附强弱不同，经过强弱不同洗脱剂进行洗脱从而达到分离目。离子交换色谱离子交换剂藉酯化氧化或醚化等化学反应在琼脂糖纤维素或凝胶分子上引入阳离子或阴离子基团特殊剂型。当离子交换剂带阳离子基团时，可吸附阴离子样品称为阴离子交换剂，如。反之，离子交换剂带阴离子基团时，可吸附阳离子样品称之为阳离子交换剂，如。离子交换色谱离子交换色谱阳离子交换剂分子中具有酸性基团，能和流动相中阳离子进行交换。例←阴离子交换剂分子中具有碱性基团，能和流动相中阴离子进行交换。如←......”。

3、“.....主要依靠增加流动相离子强度或改变酸碱度来进行洗脱。增加流动相离子强度当缓冲液离子强度增加时，即增加了它与生物大分子对交换基团竞争吸附能力，把生物大分子置换下来。改变酸碱度当缓冲液接近生物大分子等电点时，其净电荷为零，从而可被洗脱。离子交换色谱二离子交换剂类型主要有离子交换树脂离脂吸附而直接流出色谱柱。在条件下，解离为阴离子从树脂上被交换下来。阳离子交换色谱原理示意图操作步骤树脂处理装柱已作好平衡检查色谱柱有无裂痕和气泡，调流速滴分钟加样和洗脱示教收集管加样就开始收集，每管改换高洗脱液收集管操作步骤测定收集管按顺序编号，每管取于另试管，加入洗脱液茚三酮溶液，水浴，水冷却，加入乙醇，摇匀，型分光光度计比色，波长为，空白对照管为柠檬酸洗脱液，茚三酮,乙醇......”。

4、“.....型分光光度计使用方法吸光度测定开机预热以上。转动波长选择钮，选用所需波长。将装有空白标准样品比色杯放入比色杯架，使空白管对准光路。打开样品室暗箱盖光门自动关闭，按键，即能自动进行机械零点调整，数码显示为。盖好比色杯暗箱盖光门自动开启，按键，即能自动进行空白零点调整，数码显示为。次如有误差可再按次按键选择吸光度测定模式灯亮，数码显示自动转换为吸光度值。拉动比色杯架拉杆，使测定杯进入光路，从数码显示上即可读出样品吸光度比色完毕后，关上电源开关，取出比色杯，将比色杯暗箱盖好，清洗比色杯并晾干。二凝胶色谱基本原理凝胶色谱是指混合物随流动相流经装有凝胶作固定相色谱柱时，混合物中各种物质因分子大小不同而被分离技术。二凝胶色谱凝胶是指类具有三维空间多孔网状结构物质，凝胶颗粒直径般在之间。色谱过程与过滤相似，故又名凝胶过滤......”。

5、“.....在洗脱过程中，分子大小不物质同时加入凝胶床，大分子因直径大于凝胶网孔，在凝胶颗粒间隙流动，阻滞小，流程短，先流出色谱柱小分子因直径小于网状结构孔径而进入凝胶颗粒内部，受阻滞作用大，流程长，移动速度慢，后流出色谱柱。小分子大分子凝胶色谱原理二凝胶种类交联葡聚糖凝胶是由葡聚糖右旋糖苷和甘油通过醚桥相交联而成。聚丙烯酰胺凝胶琼脂糖凝胶凝胶三特点洗脱条件温和，不会引起物质变性失活。洗脱过程中不需改变洗脱液成分和种类，凝胶柱可反复使用。实验具有高度重复性，回收样品几乎可达，既可用于大样品制备，也可用于小样品分析。四应用作为脱盐工具高分子溶液浓缩用于去除热源物质用于测定高分子物质分子量用于物质分离提纯。五实验举例血红蛋白与核黄素凝胶柱色谱分离原理采用凝胶柱，分离血红蛋白和核黄素。血红蛋白因分子量大，不易进入凝胶颗粒内网孔......”。

6、“.....受阻力小，流程短，先流出核黄素分子量小，易渗透到网孔内部，阻力大，流程长，后流出，从而将二者分离。操作步骤凝胶处理装柱平衡加样与洗脱收集与测定三实验安排讲实验原理操作步骤示教学生自己做实验，人组实验对换结果分析，书写实验报告第节概述按操作形式不同分类柱色谱法固定相装于柱内色谱法。平面色谱法色谱过程在固定相构成平面层内进行色谱法，包括纸色谱法薄层色谱法和薄膜色谱法。第二节常用色谱方法基本原理利用不同生物大分子带电部分与具有相反电荷离子交换剂吸附强弱不同，经过强弱不同洗脱剂进行洗脱从而达到分离目。离子交换色谱离子交换剂藉酯化氧化或醚化等化学反应在琼脂糖纤维素或凝胶分子上引入阳离子或阴离子基团特殊剂型。当离子交换剂带阳离子基团时，可吸附阴离子样品称为阴离子交换剂，如。反之，离子交换剂带阴离子基团时......”。

7、“.....如。离子交换色谱离子交换色谱阳离子交换剂分子中具有酸性基团，能和流动相中阳生物化学实验教学实验内容生物化学常用四大技术分光光度法血糖测定，蛋白定量分析色谱法离子交换色谱和凝胶色谱电泳法醋酸纤维薄膜电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳，琼脂糖凝胶电泳离心质粒小量快速制备中使用酶活性测定过氧化氢酶值测定酶竞争性抑制实验操作考试课堂讨论及课堂答疑色谱法第节概述色谱法早在年由俄国植物学家茨维特分离植物色素时采用。他在研究植物叶色素成分时，将植物叶子萃取物倒入填有碳酸钙直立玻璃管内，然后加入石油醚使其自由流下，结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色谱带。这种方法因此得名为色谱法。又称层析法。第节概述石油醚流动相碳酸钙固定相玻璃管色谱柱胡萝卜素叶黄素和叶绿素连续色带色谱植物叶子石油醚萃取液第节概述在色谱法中......”。

8、“.....第节概述当流动相中样品混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用，由于各组分在性质和结构上差异，与固定相相互作用类型强弱也有差异，因此在同推动力作用下，不同组分在固定相滞留时间长短不同，从而按先后不同次序从固定相中流出。第节概述色谱法是利用混合物中各组分理化性质差异吸附力溶解度分子形状和大小分子极性分子亲和力等，使各组分以不同程度分布在两个相中，其中个相叫固定相，另相流过此固定相叫做流动相。由于各组分受流动相作用产生推力和受固定相作用产生阻力不同，使各组分产生不同移动速度，从而使结构上只有微小差异各组分得到分离。第节概述特点具有极高分辨效力同系物同分异构体，甚至同位素......”。

9、“.....具有极高灵敏度样品组分含量仅数微克，或不足个微克都可进行很好分析。操作简便，应用广泛第节概述从不同角度，可将色谱法分类如下按两相状态分类气体为流动相色谱称为气相色谱根据固定相是固体吸附剂还是固定液又可分为气固色谱和气液色谱。第节概述液体为流动相色谱称液相色谱同理液相色谱亦可分为液固色谱和液液色谱。第节概述按分离机理分类利用组分在吸附剂固定相上吸附能力强弱不同而得以分离方法，称为吸附色谱法。利用组分在固定液固定相中溶解度不同而达到分离方法称为分配色谱法。利用组分在离子交换剂固定相上亲和力大小不同而达到分离方法，称为离子交换色谱法。第节概述利用大小不同分子在多孔固定相中选择渗透而达到分离方法，称为凝胶色谱法或尺寸排阻色谱法。将具有生物学活性如酶辅酶抗体等配位基，键合到载体或基质表面形成固定相......”。