卡介苗大多采用表面培养，少数采用深层培养。表面培养采用改良的苏通培养 基，培养温度，培养时间天，生产的卡介苗活力高，用培养 天的幼龄苗，有利于制备冻干制品，采用对数生长期的幼龄培养菌代替稳定期 的培养菌生产，可使活菌率由左右提高至。菌膜收集后压平，移 入盛有不锈钢珠瓶内，可加入适量稀释液，低温下研磨，研磨好的原液稀释成各 种浓度的菌苗。 制造过程 菌种 制造卡介苗的菌种，应由中国药品生物制品检定所分发或经同意。严 禁使用通过动物的菌种制造卡介苗。 如果采用次代种子批，单批收获培养物的总代数不得超过代包 括在马铃薯培养基上培育的代数与在液体苏通培养基上的代数。 菌种检定 新收到的菌种或新制备种子批应进行下列检定。 培养特性卡介菌在苏通培养基上发育良好。培育温度在之间。抗酸染色应为抗 酸杆菌。在苏通马铃薯培养基上发育的卡介菌应是干皱成团略呈浅黄色。在牛 胆汁马铃薯培养基上为浅灰色粘膏状菌苔。在鸡蛋培养基上有突起的皱型和扩 散型两类菌落，且带浅黄色。在苏通培养基上卡介菌应浮于表面，为多皱微带 黄色的菌膜。 毒力试验 用结素试验阴性，体重的同性健康豚鼠只，于肌 内侧皮下各注射菌液，注射前称体重，注射后每周观察次 注射部位及局部淋巴结的变化。每周称体重次。周时解剖只，满个 月将另只豚鼠解剂，检查各脏器应无肉眼可见的结核病变。若有可疑病灶时， 应作涂片和组织切片检查，并采取部分病灶磨碎，加少量生理盐水混匀，皮下 注射只豚鼠。若证明系结核病变，该菌种即应废弃。试验经过详细记录备查。 若未满个月试验豚鼠因其他病患死亡应解剖检查，依上法处理。若死亡只 以上应重试。 免疫力试验 用原代种子批以人份的剂量免疫豚鼠，以强毒人型结核分枝杆 菌感染，免疫组与对照组动物的病变指数及脾脏毒菌分离数的对数值经统计学 处理，应有显著差异。如无条件，可送中国药品生物制品检定所进行。 菌种保存 冻干菌种保存于。 菌苗制造 卡介苗制造室必须与其他生物制品部门及实验室分开。所需用具如高 压锅冰箱及玻璃器皿等，均须单独设置并专用。卡介苗制造包装及保存过 程均须避光。 卡介苗制造的工作人员及经常进入卡介苗制造室的人员，必须身体健康，经 线检查无结核病，且以后每年经线检查次，可疑者暂不在卡介苗制造室 工作，其检查记录必须保存备查。 制造用培养基 生产用培养基不得含有能使人产生毒性或变态反应的物质。培养基所用的原料 应符合中国生物制品主要原材料试行标准规定。 菌种传代与培养 冻干菌种在苏通马铃薯培养基胆汁马铃薯培养基以及液体苏通培养基上每传 次为代。马铃薯培养基上培育的菌种放冰箱保存不超过个月。用于生产 菌苗的培养物的总代数不超过代。 原液制造 收集 培养瓶应逐瓶检查，若有污染湿膜混浊等情况应废弃。收集菌膜压干，移 入盛有不锈钢珠瓶内，钢珠与菌体的比例应根据研磨机转速控制在适宜的范 围，并尽可能在低温下研磨。加入适量无致敏原保护液稀释成定浓度的原液。 稀释用中国药品生物制品检定所发给的冻干卡介苗参考比浊标准，以分光光度法或 其他适宜方法测定原液浓度，用保护液将原液稀释成。 纯菌试验 用于制造卡介苗的培养物原液以及稀释后的菌苗均应按生物制品无菌试 验规程抽样做纯菌试验。 菌苗分批 用同代菌种同时制造的菌苗为批，稀释为数瓶者，按瓶分亚批。 分装 分装过程中勿使苗混合均匀。每人份卡介苗应为。 冻干 菌苗原液分装后应立即进行冻干。干燥完毕后立即进行真空封口。亦可充氮封 口。 成品检定 物理化学检查 冻干卡介苗应为白色疏松体或粉末状。加入稀释液后，应于分钟内完全溶解 成均匀悬液。残余水分不应超过。包装前应每支安瓿检查真空，不合格的安 瓿应废弃。 鉴别试验 每批菌苗须做涂片检查，抗酸染色应是抗酸杆菌。 纯菌试验 每亚批菌苗抽样按生物制品无菌试验规程进行。 活菌计数 同代菌种制造的各批冻干卡介苗应抽批做干前活菌计数。同批菌种制造 的各亚批菌苗均应做干后活菌计数，抽安瓿支稀释混合。冻干菌苗活菌数应 在万以上。可与热稳定性试验同时进行。 热稳定性试验 取冻干后菌苗放置天进行加速失活试验，测定活菌数，与保存的同 批菌苗同时进行比较，计算降低的百分离。加温放置制品的活菌数应不少于 冷藏菌苗的，但不得低于万。此试验可与参考菌苗同时进行参考菌 苗加入试验的目的为检查培养基的质量。每机柜冻干菌勒应抽样进行此项 试验。 安全试验 同代菌种生产的各批冻干卡介苗应抽个亚批做安全试验。用结素试验 阴性，体重的同性健康豚鼠只。每只皮下注射相当于 人份的冻干皮内注射用卡介苗，每周称重次，观察周后，解剖检查每只 动物，若肝脾肺等脏器无结核病变，该批菌苗即可发出使用。若有可疑病 灶时，应按项处理。 保存与效期 保存于暗处。自首次活菌计数结束之日起效期为年。 该项目的国内外发展现状 在国家产业政策的支持下，我国疫苗行业取得了快速发展。国内疫苗企业在 技术设备产品质量生产工艺等方面与，销售量达到万支的年营业收入 为万元，营业收入营业税金及附加和增值税 销售税金估算 增值税消费税 增值税产品增值税为原材料和动力消耗为。 营业税金及附加 城市维护建设税按增值税与消费税之和的计取。 教育费附加按增值税与消费税之和的计取。 财务分析 财务分析依据 企业会计制度财会号 企业会计准则中国石油和化学工业协会中石化协产发号关于印 发化工投资项目可行性研究报告编制办法化工投资项目项目申请报告编制 办法和化工投资项目资金申请报告编制办法的通知。 中国石油化工集团公司发布的中国石油化工集团公司项目可行性研究技术经济 参数与数据国家发展改革委建设部发布的建设项目经济评价方法与 参数第三版。 财务分析基础数据 财务基准收益率财务基准收益率为。 所得税企业所得税税率为。 其它法定盈余公积金按税后利润的计取。任意盈余公积金按税后利 润的计取。 财务指标分析 财务盈利能力分析 通过项目投资现金流量计算项目投资财务内部收益率税前 税后财务净现值税前万元税后万元计算表明，全 部投资财务内部收益率远高于财务基准收益率，证明该项目具有良好的经济收 益。 项目销售量达到万支的年均利润总额为万元，年均上缴所 得税为万元，年均税后利润万元，利润与利润分配 财务计划现金流量表 财务盈利能力分析 项目投资财务内部收益率所得税后 项目投资财务净现值所得税后万元 项目投资回收期所得税后年含建设期 总投资收益率 项目资本金净利润率 通过上述指标数据可以看出，项目具有非较强的盈利能力。项目偿债 能力分析本项目资金全部来自自有资金，资产负债主要来源于应付帐款。因此， 该项目资产负债率很低，也表明企业和债权人的风险较小。 敏感性分析 敏感性分析是分析预测影响项目评价结论的各个主要因素发生变化时， 对项目经济效益的影响程度。本报告敏感性分析选取产品价格原料价格建设 投资生产负荷作单因素敏感性分析。 建设投资原料价格产品价格生产负荷基准收益率 从分析结果来看，产品价格的变化对本项目的经济效益影响最敏感，经计算当售价 降低时，项目的内部收益率税后将下降到财务基准收益率，说明产 品价格是项目抗风险能力的主要因素，因此企业应在降低生产物耗提高产品质量上给 予充分的重视，要加大市场开发的力度，要紧紧抓住企业发展的关键因素，才能在市场 中立于不败之地。 盈亏平衡分析 通过对项目的产品销售收入成本费用销售税金等方面的数据进行分析来确定项 目的盈亏平衡点，分析生产能力利用率对项目盈亏的影响。 盈亏平衡点以生产能力利用率表示固定成本销售收入可变成本税金及附 加。 财务评价结论 从主要经济指标汇总表可以看出，报告中项目投资财务内部收益率所得税后为 ，高于财务基准收益率。上述财务分析说明项目具有良好的市场前景，具 有较好的财务效益和定的抗风险能力。 表经济分析主要指标表 指标与数据名称单位指标与数据备注 基本数据 总投资万元 建设投资万元 建设期利息万元 流动资金万元 报批总投资万元 建设投资万元 建设期利息万元 铺底流动资金万元 资本金万元 年均营业收入万元生产期平均 年均增值税万元生产期平均年均营业税金及附加万元生产期平均 年均总成本费用万元生产期平均 年均利润总额万元生产期平均 年均所得税万元生产期平均 年均税后利润万元生产期平均 总投资收益率 项目资本金净利润率 全投资投资回收期Ⅰ税前年含建设期 全投资内部收益率Ⅰ税前 全投资净现值Ⅰ税前万元 全投资投资回收期Ⅱ税后年含建设期 全投资内部收益率Ⅱ税后 全投资净现值Ⅱ税后万元 盈亏平衡点 表总成本费用估算表 人民币单位万元 项目合计计算期 生产成本 直接材料费 直接动力费 直接工资及福利费 制造费用 折旧费 修理费 其他制造费 管理费用 无形资产摊销 其他资产摊销 其他管理费用 财务费用 利息支出 长期借款利息 可抵扣增值税借款利息 流动资金借款利息 短期借款利息 营业费用 总成本费用合计 其中可变成本 固定成本 经营成本 表固定资产折旧费估算表 人民币单位万元 项目合计计算期 土地使用权 原值 当期折旧费 净值 房屋建筑 原值 当期折旧费 净值 机械设备 原值 当期折旧费 净值 电子设备