1、“.....最后定容到，储存于棕色瓶内放于室温。脱色液冰乙酸乙醇蒸馏水溶液称取•溶于双蒸水中，用盐酸调值至，加水定容至，常温保存备用。培养基去离子水中加入胰化蛋白胨酵母提取物乙酸氰基羟基肉桂酸芥子酸乙腈过硫酸铵研究主要技术方法包括反相高效液相色谱，基质辅助激光解析电离飞行时间质谱，聚丙烯酰胺凝胶电泳，细胞毒活性与抗菌活性分析。对带斑狼蛛粗毒进行了反相高效液相向色谱分离得到各个组分然后通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析，测定了反相高效液相色谱分离的各峰的分子量利用电泳技术分析带斑狼蛛粗毒中的小分子量多肽与大分子量的蛋白质，显示该粗毒含有丰富的多肽组分通过粗毒的细胞毒活性，分析带斑狼蛛粗毒对白血病细胞前列腺癌细胞的细胞毒活性......”。

2、“.....带斑狼蛛粗毒对谷氨棒杆具有抗癌细胞活性抗菌活性分析，带斑狼蛛粗毒对谷氨棒杆具有定的抑制活性。材料与方法材料三氟分析带斑狼蛛粗毒中的小分子量多肽与大分子量的蛋白质，显示该粗毒含有丰富的多肽组分通过粗毒的细胞进行了反相高效液相向色谱分离得到各个组分然后通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析，测定了反相高效液相色谱分离的各峰的分子量利用电泳技术部分内容简介物，对该蜘蛛粗毒进行生物化学和生物学活性方面的研究，探究带斑狼蛛粗毒是否具有的药用价值。研究主要技术方法包括反相高效液相色谱，基质辅助激光解析电离飞行时间质谱，聚丙烯酰胺凝胶电泳，细胞毒活性与抗菌活性分析......”。

3、“.....测定了反相高效液相色谱分离的各峰的分子量利用电泳技术分析带斑狼蛛粗毒中的小分子量多肽与大分子量的蛋白质，显示该粗毒含有丰富的多肽组分通过粗毒的细胞毒活性，分析带斑狼蛛粗毒对白血病细胞前列腺癌细胞的细胞毒活性，结果显示该粗毒具有显著的抗癌细胞活性抗菌活性分析，带斑狼蛛粗毒对谷氨棒杆具有定的抑制活性。材料与方法材料三氟乙酸氰基羟基肉桂酸芥子酸乙腈过硫酸铵尿素琼脂糖甘油溴酚蓝丙烯酰胺甲叉双丙烯酰胺十二烷基磺酸钠和凝胶电泳标准蛋白质，细胞培养液，胎牛血清，胰蛋白酶。仪器设备离心机基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱超净工作台，恒温水浴锅，二氧化碳培养箱，冷冻离心机，真空冷冻干燥机，™旋转混匀仪，稳压电源，超低温冰箱中科美菱，倒臵显微镜，型低速离心机......”。

4、“.....溶液配制电泳的溶液浓缩胶缓冲液。过滤，保存。分离胶缓冲液。过滤，保存。上样缓冲液溴酚蓝，甘油。电极缓冲液，甘氨酸，。胶固定液甲醇，乙酸，水。蓝染色液先将溶于水中，溶解后加入考马斯亮蓝后充分搅拌。再加磷酸，定容至，搅拌后加甲醇，最后定容到，储存于棕色瓶内放于室温。脱色液冰乙酸乙醇蒸馏水溶液称取•溶于双蒸水中，用盐酸调值至，加水定容至，常温保存备用。培养基去离子水中加入胰化蛋白胨酵母提取物，摇动容器直至溶质溶解用调至用去离子水定容至在高压下蒸汽灭菌带斑狼蛛蜘蛛的毒素采集成年带斑狼蛛雌性个体从我国西南地区获得，被装入透明的广口塑料杯中，上面覆盖透光透气的纱布。带斑狼蛛在湖南师范大学生命科学学院蛋白质化学研究室动物房人工饲养。每天喂水和虫子......”。

5、“.....这些蜘蛛不具有攻击性，但具有较快的反应速度逃逸，在喂食的过程中。电刺激的方式获得粗毒，电刺激法采集其毒液人将蜘蛛放在固定有铝片的塑料平台上，使蜘蛛腹部的尾端紧贴铝片，将洁净薄塑料片臵于蜘蛛的毒螯和口器之间。另人将电刺激器的两个电极分别放在铝片和螯肢的根部，电极用食盐水湿润，以增加导电性。蜘蛛在的电刺激下将无色透明的毒液分泌到薄塑料片上。塑料片接触口器的面用无水乙醇清洗以避免了消化液的掺入，对蜘蛛没有生命的伤害，每周次。只蜘蛛能够获得的毒液，约的干粉。粗毒冻干后保存于。反相高效液相色谱分离带斑狼蛛粗毒反相高效液相色谱在公司的仪器上进行，所用分析柱为反相柱，公司，检测器为光检测器。流动相为含的流动相为含的。洗脱梯度为流速检测波长为......”。

6、“.....每次进样量均为粗毒冻干粉，收集各洗脱峰。粗毒预处理称取粗毒冻干粉，溶于，并于台式高速离心机上离心转速为沉淀不溶物。取上清液进样。所用乙腈梯度见表。并用质谱仪鉴定样品的纯度，目的样品的冻干粉末臵于冰箱储存备用。表反相高效液相色谱检测波长柱温时间流速曲线注曲线表示流动相梯度变化的速率，号曲线表示匀速直线性变到终条件基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定反向高效液相色谱各峰质谱分析在美国应用生物系统公司生产的型的质谱仪上进行。用℅℅乙腈℅水混合液制备基质，然后分别取的药理学作用。抗菌活性分析结果表明带斑狼蛛粗毒对金黄色葡萄球菌，绿脓杆菌，变形杆菌无抑制活性。说明带斑狼蛛粗毒对上述三种菌类的疾病无作用。对谷氨杆菌有较弱的抑制活性，浓度约抑制......”。

7、“.....抗菌活性分析实验显示该粗毒对菌类的抑制作用不具有普遍性，不能作为广效性抗菌药。由于该实验只是粗略的进行其生理生化活性分析，因此要透彻的得知该毒素的作用机制还需进步的实验研究。蜘蛛毒素由毒腺分泌产生，是种包含了无机盐有机小分子﹤蛋白质和多肽的化学混合物，主要用于防御和捕食。蜘蛛产生各种神经毒素，除了神经毒素外，从蜘蛛毒素中也分离和鉴定到了些具有细胞毒活性抗菌活性凝集活性激肽类似物等非神经生物学活性的多肽毒素。研究发现多数细胞毒活性肽兼具抗菌活性和抗癌细胞活性抗病毒等活性。细胞毒活性肽与细胞膜作用有三种模型模型模型模型。三种模型分别描述了细胞毒活性肽可在细胞膜上形成离子通道跨膜孔道或导致大量的细胞膜破坏......”。

8、“.....细胞毒活性肽具有以下几个特点选择性作用，其对微生物的毒性要大大强于宿主细胞更短时间内杀灭细菌抗菌谱更广病原菌不易对其产生耐药性。同时，对新抗生素的需求大大加强了人们把具有抗菌活性的细胞毒活性肽作为新的治疗药物来进行研究的兴趣。已有若干细胞毒活性肽进入临床前和临床实验。文献表明黑寡妇蜘蛛毒素能够增强脑微血管内皮细胞的胞饮作用，破坏内皮细胞间的连接，使血脑屏障的通透性增加。等研究发现从眼镜蛇毒中分离出来的细胞毒素对黑色素瘤细胞和白血病细胞系具有选择性杀伤作用。从妩蛛科蜘蛛的毒液中分离出种毒性肽，能在细菌中对毒性肽进行基因表达。美国科学家格伦金等人从漏斗蛛体内提取种毒素，经过基因改造后它对害虫的杀伤力更强。正如前面所言......”。

9、“.....目前多肽抗肿瘤药物的研发主要集中于治疗性疫苗细胞毒药物和靶向药物三种类型，这正好符合抗肿瘤药物的发展趋势。目前细胞毒药物是抗肿瘤药物的主流，占据了整个抗肿瘤药物的左右，因此筛选新型细胞毒药物仍是抗肿瘤药物研发的重点。近十多年来，随着分离纯化和分析鉴定技术的快速发展，为活性肽研究的迅速发展提供了前提条件而生物学分子生物学细胞学等基础研究的渗入，使得快速简便命中率高的活性筛选模型陆续建立和投入应用，无疑也极大地推动了细胞毒活性肽的研究。本研究为进步在该粗毒中分离和鉴定具有选择性抗癌细胞毒活性成分奠定了基础作用。因此，此方面工作的开展必定会为蜘蛛粗毒特别是带斑狼蛛抗癌的深入研究及今后的应用提供依据......”。