【33页】【测控指导】2015-2016学年高中生物4.1生物成分的分离与测定技术课件苏教版选修1.ppt源文档全文在线看

多少等，用来分离不同种类的蛋白质。

探究点三探究点探究点二名师精讲蛋白质的分离方法薄膜透析在动物体内，丙种球蛋白和许多蛋白质混在起。

要获得纯净的丙种球蛋白，就必须进行提取和分探究点二蛋白质的分离原理问题导引为年老多病的人注射丙种球蛋白，可以在定程度上增强其身体的抵抗力如乙醚等中，经段时间后取出残渣，再蒸去溶剂，即可获得蜡质的膏状提取物。

二三四五探究点机械压力作用而直接榨出，则般采用压榨法制得如采用简易的手动榨汁器等。

些植物的芳香油既可以采用蒸馏法提取，也可以采用压榨法制得，如橘皮芳香油。

些植物的芳香油还可以采用萃取法，如制取茉莉浸膏桂花浸膏就是将新鲜的植物材料浸泡在低沸点的有机溶剂如乙醚等中，经段时间后取出残渣，再蒸去溶剂，即可获得蜡质的膏状提取物。

二三四五探究点探究点二蛋白质的分离原理问题导引为年老多病的人注射丙种球蛋白，可以在定程度上增强其身体的抵抗力。

在动物体内，丙种球蛋白和许多蛋白质混在起。

要获得纯净的丙种球蛋白，就必须进行提取和分离。

你能提供分离蛋白质的思路吗提示根据蛋白质各种特性的差异，如分子的大小所带电荷的性质和多少等，用来分离不同种类的蛋白质。

探究点三探究点探究点二名师精讲蛋白质的分离方法薄膜透析法原理蛋白质水溶液具有亲水胶体溶液性质，不能透过半透膜。

目的去除小分子化合物杂质，如无机盐单糖二糖氨基酸等。

常用的半透膜肠衣玻璃纸等。

步骤将待纯化的蛋白质溶液装入透析袋内，再把透析袋放入透析液中即可。

离心沉降法原理在离心力的作用下，分子大小密度不同的分子沉降速度不同，从而被分离。

目的使分子大小密度不同的不同种类的蛋白质彼此分离。

探究点三探究点探究点二电泳概念带电颗粒在电场作用下向着与其电性相反的电极移动的现象。

原理不同的物质所带电荷不同，颗粒的大小形状不同，因此，在电场中的泳动速度不同。

影响泳动速度的因素带电颗粒的性质，即颗粒的大小形状和所带电荷的多少此外还有电场强度溶液的等因素。

泳动规律带电颗粒直径越小越接近于球形，所带净电荷越多，则在电场中的泳动速度越快反之，则越慢。

常用方法支持物电泳。

支持物滤纸醋酸纤维薄膜大分子凝胶等。

探究点三探究点探究点二例题生物产品的分离纯化是现代生物技术中种常见的技术。

下列关于物质提取纯化原理的叙述中，不正确的是使用透析法可以去除样品中相对分子质量较大的杂质电泳法是利用样品中各种分子带电性质和数量以及样品分子大小不同，产生的迁移速度不同而实现样品中各种分子的分离电泳速度受颗粒大小形状和所带净电荷多少影响，还与电场强度有关，与溶液无关离心法分离蛋白质的依据是不同大小的分子离心时沉降速度不同解析透析的原理是小分子能够通过半透膜，利用透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质。

电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异及分子本身的大小形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。

电泳速度还与电场强度溶液有关。

不同大小的分子离心时沉降速度不同也可分离不同的蛋白质。

答案探究点三探究点探究点二方法点拨蛋白质的来源和性质不同，分离方法差别很大。

要依据蛋白质的理化性质和特点选择相应的分离方法。

变式训练下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来离心沉降法通过控制离心速率使分子大小密度不同的蛋白质分离蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动解析在电场的作用下，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。

答案探究点三血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳问题导引血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳在临床上常用于分析血尿等样品中的蛋白质，供临床上诊断肝肾等疾病参考。

如慢性肝炎和肝硬化患者，由于肝细胞受损，肝脏合成血浆蛋白质的能力大大下降，使血浆白蛋白显著降低，球蛋白相对持醋酸纤维薄膜的清洁，避免用手直接接触薄膜。

点样是本实验的关键步骤。

点样前，应将薄膜表面多余的缓冲液用滤纸吸去，以免引起样品扩散但不宜太干，否则样品不易进入膜内，造成点样起始参差不齐，影响分离效果。

点样量要适量，均匀和垂直，避免弄破薄膜。

次左右即可，盖玻片的边缘应避免出现明显液滴。

探究点探究点二探究点三点样时血清离膜两侧要空，如点样靠边易产生边流现象，影响实验结果。

点样处不要搭在滤纸上，以免血清渗入滤纸。

有记号的面朝上，薄膜加样端置于阴极，另端置于阳极。

醋酸纤维薄膜应绷直，避免电泳槽隔离板的干扰。

不可同时接触正负极，防止触电。

电泳时间不低于。

结果及其分析结果血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳图谱示意图探究点探究点二探究点三结果分析从电泳图谱示意图中可以看出血清蛋白主要包括五种蛋白质，且含量最多的是清蛋白，其他依次是球蛋白球蛋白球蛋白球蛋白。

由五种蛋白质所处的位置可判断出它们均带负电荷，四种球蛋白在电场中的泳动速度由快到慢依次为清蛋白球蛋白球蛋白球蛋白球蛋白。

容易产生的现象及原因区带拖尾缓冲液离子强度小于。

区带过于紧密缓冲液离子强度大于。

染色后血清蛋白中间色浅染色时间不足，或血清蛋白含量过高。

球蛋白反方向移动是电渗现象，可升高缓冲液液面高度，或适当加大电流量。

探究点探究点二探究点三例题下图是人血清蛋白在以醋酸纤维薄膜为支持物，为的巴比妥缓冲液电泳分离结果示意图，由此图不能得出的结论是在为的巴比妥缓冲液中和清蛋白都带负电荷在为的巴比妥缓冲液中电泳时，和清蛋白迁移速率不同球蛋白的相对分子质量定比球蛋白的相对分子质量大在为的巴比妥缓冲液中球蛋白迁移速率最慢，清蛋白迁移速率最快解析带电粒子在电场中迁移的速率是带电粒子带电性质带电量粒子大小粒子形状共同作用的结果。

答案探究点探究点二探究点三橘皮精油提取的实验设计问题导引玫瑰精油是“精油之后”，橘皮精油是“精油之王”。

利用此装置提取橘皮精油的过程是怎样的提示此装置为水蒸气蒸馏装置，提取橘皮精油的过程是将洗净后的新鲜橘皮切碎与适量的水放入蒸馏瓶，安装好此装置。

点燃酒精灯实施蒸馏。

蒸馏结束后锥形瓶中的收集液经静置后，油便浮于水面，再经分离即可得到芳香油。

探究点探究点二探究点三名师精讲蒸馏装置如图所示，整套蒸馏装置可分为左中右三部分，其中左边的部分通过加热进行蒸馏，中部将蒸馏物冷凝，右边的部分用来接收冷凝后的蒸馏物。

加热装置包括铁架台酒精灯铁圈石棉网蒸馏烧瓶铁夹单孔塞及温度计。

温度计位置温度计水银球应与蒸馏烧瓶的支管口下沿保持水平加热时要防暴沸垫石棉网，向液体中加入几片碎石或瓷片烧瓶内液体量烧瓶容积的。

探究点探究点二探究点三冷凝装置由铁架台和冷凝管组成，冷凝管中水流应从下方进水，上方出水，与蒸汽流向相反。

接收装置由接液管和接收器通常用锥形瓶组成，收集冷凝后的液体。

具体实验操作安装仪器般都按照自下而上自左到右的顺序。

拆卸仪器的顺序与安装时相反。

具体安装顺序和方法如下固定热源酒精灯。

固定蒸馏瓶，保持蒸馏瓶轴心与铁架台的水平面垂直。

安装蒸馏头，使蒸馏头的横截面与铁架台平行。

连接冷凝管。

保证上端出水口向上，通过橡皮管与水池相连下端进水口向下，通过橡皮管与水龙头相连。

连接接液管。

将接收瓶瓶口对准接液管出口。

常压蒸馏般用锥形瓶而不用烧杯作接收器，接收瓶应在实验前称重，并作好记录。

将温度计固定在蒸馏头上，使温度计水银球的上限与蒸馏头侧管的下限处在同水平线上。

探究点探究点二探究点三例题分析图示装置，回答有关名称。

写出图中数字所代表的名称。

在图中用箭头表示水的流动方向。

该装置为蒸馏装置。

分离后的油层中，有定的水分，此时可加入进行吸水，放置过夜。

同学采用的玫瑰花瓣，出油为，则出油率为。

探究点探究点二探究点三解析水蒸气蒸馏装置中表示温度计，表示出水口，表示进水口。

水从进水口进入，从出水口流出，起到冷凝作用。

水蒸气蒸馏法的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层，从而将芳香油分离出来。

过滤得到的油层中含有少量的水分，可以用无水吸去。

出油率芳香油质量原料质量。

答案温度计出水口进水口水从进水口流入，从出水口流出图略。

水蒸气无水探究点探究点二探究点三第四章生物化学与分子生物学技术实践第节生物成分的分离与测定技术情境导入课程目标早在古代，人类就已发现具有芳香气味的植株或花卉能使人神清气爽，将这些植物制成干品后，可当做药材和香料使用。

但是，植物香料易挥发，不易储存。

欧洲中世纪香料贸易的发展，促成了植物芳香油提取技术的诞生。

植物芳香油是如何提取的呢尝试蛋白质的分离。

尝试从生物材料中提取些特定成分。

尝试测定生物材料中些化学物质的含量。

二离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质在提取蛋白质时，可以采用研磨与超声波结合的方法将生物组织或细胞完全破碎，使蛋白质从细胞中释放出来，并使其溶解在适当的抽提液中。

抽提液的选择需要根据蛋白质的特性而定，般酸性蛋白质用偏碱性溶液抽提，碱性蛋白质用偏酸性溶液抽提，脂蛋白等则可用有机溶剂抽提。

为了防止提取过程中蛋白质被蛋白酶分解，还可在抽提液中加入蛋白酶抑制剂。

细胞破碎后，蛋白质溶解在抽提液中，通常用过滤或离心的方法除去其他物质。

离心沉降法是通过控制离心速度，使分子大小密度不同的蛋白质发生沉降分层，从而达到分离出不同种类蛋白质的目的。

通过离心沉降法分离出来的蛋白质，往往要重新溶解，并脱去其中的盐分和有机溶剂，再根据蛋白质的不同特性，运用薄膜透析法等再次进行分离和纯化。

薄膜透析法是利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性，使蛋白质与其他小分子化合物如无机盐单糖二糖以及氨基酸分离的方法。

三四五二凝胶色谱法分离蛋白质凝胶色谱法是根据蛋白质分子量的大小差异对其进行有效分离的方法。

凝胶是由胶体溶液凝结而成的固体物质。

凝胶颗粒在合适的溶剂中浸泡后充分膨胀，然后装入层析柱内，再加入欲分离的蛋白质混合物，以同溶剂洗脱。

在洗脱过程中，大分子蛋白质不能进入凝胶内部而沿凝胶颗粒间的空隙移动，洗脱路程较短，移动速度较快，因此最先流出柱外小分子蛋白质可以进入凝胶颗粒内部的多孔网状结构，洗脱路程较长，移动速度缓慢，以致需要较长的时间才能流出柱外。

这样使样品中分子量大小不同的蛋白质按顺序被先后分离出来。