准官方农业化学家协会粮食及农业组织国际原子能机构国际纯粹与应用化学联盟年在匈牙利举行专家磋商。设防水平在,各级标准空白及样品高翔液相色谱图如图所示。甲睾酮保留时间约为分钟，空白样品进行了评价干扰。可以得出结论，正确保留时间出现在没有杂质任何情况。图高效液相色谱图甲基睾酮浓度为标准曲线高效液相色谱图加标甲基睾酮浓度为高效液相色谱图样品中甲基睾酮加标高效液相色谱图样品中甲基睾酮加标纵坐标吸光度横坐标保留时间，。表确定数量和检测在肌肉回收率设防水平,和。甲睾酮高效液相色谱检测方法精确性鲤鱼肌肉中甲睾酮残留高效液相色谱检测方法精度，重复性，如之间运行参数和运行内值确定表中显示之间运行值和三个强化各级水平确定。内运行值和确定设防水平在水平列于表。之间运行和内部运行值均低于，给予验收兽药残留分析方法验证与可重复性标准改编自年在匈牙利举行粮农组织国际原子能机构专家咨询建议标准。表确定水平和间运行简历肌肉中甲睾酮检测值在,和设防水平表确定水平和检测在肌肉内运行值在设防水平甲基睾酮高效液相法检测限检出限为样品中物质含量最低值。种物质存在，仍然可能被定性检测，但不具有足够可靠性程度定量测定。检出限为视为个信号程度噪声以比比例。因此，检测限为证实为或更高。结论高效液相色谱法检测鲤鱼肌肉中甲醇提取甲睾酮初步验证参考以下参数在,和水平之间运行，内值重复性和限制回收率准确度恢复以上和之间运行和内部运行值低于。检测限为。有剩余些问题要解决，特别是进步净化排除大量提取物中不同酯，使检测限可能会下降到可接受水平。致谢作者非常感谢来自财政支持农业标准制定，在渔业产品中甲基睾酮残留测定高效液相色谱法，中国农业部项目。参,件安捷伦，型，美国反相色谱柱,柱填料粒径，泵系列系统，探测器覆盖范围为调整，以和循环喷油。柱温为流动相为甲醇水。流速为。进样量为。验证确定恢复参数检测方法准确性。用甲基睾酮标准溶液回收率实验确保在鲤鱼肉里分别,和。同时，制备空白样品。之间运行和内部运行值重复性参数精密检测方法是确定。三种鱼肉样品进行分析时确保每个设防水平之间运行值在,和。三个平行肌肉样品都注射来确定运行值。设防水平与肌肉样本检出限分别为。结果与讨论甲基睾酮标准线性如图所示，甲基睾酮标准曲线线性范围。在此范围甲基睾酮标准浓度与锋面积有密切线性相关。图甲基睾酮浓度为标准曲线甲睾酮高效液相色谱检测方法准确性确定恢中文字，卷，第期，高效液相色谱检测法对鲤鱼肌肉中甲基睾酮残留物初步验证摘要在中国，将合成代谢类固醇甲基睾酮为生长促进剂是被明文禁止。食物中对甲基睾酮残留分析结果表明残留物是不可缺少。用高效液相色谱法即三氯甲烷甲醇与液液萃取方法检测鲤鱼肌肉组织初步验证结果参照以下参数恢复性准确度在,和之间，组间和组内检测值重复性，也被称为相对标准偏差以及检测限制之间。恢复性在以上，肌肉组织及组间和组内值低于，检测限值为。关键字甲基睾酮液液萃取高效液相色谱法验证前言甲睾酮是种合成促蛋白合成类固醇，且已作为种促生剂广泛适用于畜牧业和水产养殖。然而，甲基睾酮引起人类食品安全问题仍然是个悬而未决问题。人类长期接触甲睾酮对健康会带来不利影响，如肝中毒韦斯特比等人，年卢西，年哈特勒布，年和胎儿毒性格伦巴赫，年沙尔丁，年。因此，人类摄入有甲基睾酮残留物鱼类时，会对自身健康带来很大危害。欧洲共同体国家使用甲基睾酮如甾体激素以达到使牛育肥目，而这自年以来已被禁止。年，我国就已经禁止将甲基睾酮作为生长促进剂。然而，在水产品中并没有对甲基睾酮残留物分析标准。因此，我们很有必要对这些已经禁令产品使用做次筛选分析和调查。为了保证肉类产品安全，人们已在广泛研究甲基睾酮残留物检测方法。肉类等合成代谢类固醇检测比其他常用基体比如尿液和血浆更加复杂。酶联免疫吸附试验般是用作筛查尿液个更加快捷方法格塔尔，。气相色谱质谱是种广泛应用于检测肉类中合成代谢类固醇多残留方法哈特曼和斯坦哈特，年等马尔尚等施密特和斯坦哈特，年。但是，检测方法需要准备样品既复杂又耗时，般只用于类固醇衍生物。但是在中国，大多数实验室都难以接受该试验设备高成本购置。这项研究目是验证分析技术在实际应用中鲤鱼肌肉甲基睾酮残渣检测。用个简单液液萃取高效液相色谱法分析方法进行验证。实验抽样来自青岛市场鲤鱼肌肉样本被用来验证方法。他们储存在，并用家用搅拌机飞利浦匀浆并马上分析。化学品和试剂分析纯试剂，包括三氯甲烷和氯化钠路堵化学试剂中国上海，甲醇级化学试剂中国天津。纯化水与系统公司，贝德福德，马萨诸塞，美国。标准甲基雄酮，醇与以上纯度标准类固醇甲基日本，该公司股价在在甲醇溶液，在准备和储存工作方案和，使用前准备，可以保持在为个月。提取在克肌肉里加饱和溶液和甲醇匀浆分钟，后加入毫升三氯甲烷匀浆分钟混合搅拌分钟，加毫升三氯甲烷，持续搅拌分钟，离心分钟，转，将上清液转移到个分区漏斗残留物中加饱和溶液和甲醇。重复提取。合并提取液漏斗至少小时在夜间在同个分区漏斗。在圆底烧瓶中收集下层溶液并在真空蒸发器中蒸发至干。残留物溶解在毫升流动相和每个样品注入到高效液相色谱系统。甲睾酮高效液相色谱检测方法色谱系统包括所有从安捷伦以下组件安捷伦，型，美国反相色谱柱,柱填料粒径，泵系列系统，探测器覆盖范围为调整，以和循环喷油。柱温为流动相为甲醇水。流速为。进样量为。验证确定恢复参数检测方法准确性。用甲基睾酮标准溶液回收率实验确保在鲤鱼肉里分别,和。同时，制备空白样品。之间运行和内部运行值重复性参数精密检测方法是确定。三种鱼肉样品进行分析时确保每个设防水平之间运行值在,和。三个平行肌肉样品都注射来确定运行值。设防水平与肌肉样本检出限分别为。结果与讨论甲基睾酮标准线性如图所示，甲基睾酮标准曲线线性范围。在此范围甲基睾酮标准浓度与锋面积有密切线性相关。图甲基睾酮浓度为标准曲线甲睾酮高效液相色谱检测方法准确性确定恢复参数检测方法准确性。如表所示，高效液相色谱法检测甲基睾酮肌肉确定水平和回收率在,和。三个层次回收率达到以上，这是符合回收标准为接受分析方法进行验证时所允许考虑兽药改编