通量分子标记的研究小麦高籽粒蛋白含量基因的物理图谱和种高通量分子标记的研究,摘要谷蛋白含量增加与染色体短臂在之间相关,使用田间次重复试验和在和之间系列中间，变异来源被被映射到区域单个孟德尔基因位点，包含限制性片段长度多态性位点和，该位点被指定为。为找到位置，我们以水稻和小麦之间微共线性，使用水稻基因组顺序作为来自对应于小麦表达序列标签区域新标记基础。这是我们能通过标记和缩小基因位点位点到区域，对应于水稻号染色体上个区间。fi通过，这个区域被认为在排好序水稻基因组上。遗传学改良直是小麦面团和面包质量育种项目常规目标，因为外文翻译题目小麦高籽粒蛋白含量基因物理图谱和种高通量分子标记研究小麦高籽粒蛋白含量基因物理图谱和种高通量分子标记研究摘要谷蛋白含量是种人体所需重要营养物质，它对面团和面包质量有重要影响。数量性状基因位点，取自野生二粒小麦谷蛋白每千克增加，其数量性状基因位点定于染色体。利用小麦和水稻共线性，开发小麦区高浓度图谱并且绘制了数量性状基因位点作为设计个简单孟德尔轨迹。使用个四倍体小麦人工构建细菌染色体文库，揭露了个区域约物理图谱。构建两个物理图谱包括两个侧翼标记和个来自水稻共线性区域完全链接到潜在供选基因。讨论了小麦中，在物理和遗传学图距，通过定位克隆分离基因可行性之间关系。揭示了高通量共显性标记，在收集个培养四倍体小麦和二倍体小麦中，个等位基因缺失，表明对于包含来自野生二粒小麦高等位基因研究转变到商业化小麦，这种标记是有用。关键词共显性谷蛋白含量物理图谱数量性状基因位点水稻小麦介绍谷蛋白含量是种人体所需重要营养物质，它影响面团和面包质量。提高小麦谷蛋白可能方法是从相关野生小麦属种提取出高谷蛋白基因。野生二粒小麦，圆锥小麦−比其它大部分面包小麦栽培品种−含量高，因为未使用过高基因，所以可作为种很有用资源。,查阅啦相关二粒小麦，在野生小麦调查中发现种高谷蛋白含量材料来源−,。在培养二倍体到四倍体硬质小麦染色体中，发现了套完整二体生物替代线。二体生物替代线可使数量性状基因位点构图更容易。在这些不同群体中，为减少遗传多样性和增加数量性状基因位点灵敏度，严格使用来自不同植物之间单个染色体。这种方法用于分析复杂小麦已经超过个世纪,用二粒小麦全染色体替代物到里，出现了最高蛋白密度。谷蛋白含量有效增加与面团质量增加相关，与麦粒产量或麦粒质小麦高籽粒蛋白含量基因物理图谱和种高通量分子标记研究量无关,。虽然在试验观察到了产量和谷蛋白含量呈负相关，但在引进合适硬质小麦中，与二粒小麦等位基因相关谷蛋白含量每千克增加,而对蛋白质量和植株高度无影响,。二粒小麦等位基因渗入到普通小麦品种使得谷蛋白含量更多fi。此外，与品系相比，小麦品种中开花后叶中等位基因和可溶性蛋白及氨基酸表现出高水品。其它研究表明影响小麦族主要因素可能是位于同源第组染色体短臂上个主要基因。坚定了两个四倍体小麦和，分别位于和染色体末端。用标记个二倍体小麦染色体臂得数量性状基因位点与扩增片段长度多态性标记相关。最终，在很少染色体中报道了个在附近标记主要数量性状基因位点,。评价个来自和之间重组带换系作图群表明增加与染色体短臂在之间相关,使用田间次重复试验和在和之间系列中间，变异来源被被映射到区域单个孟德尔基因位点，包含限制性片段长度多态性位点和，该位点被指定为。为找到位置，我们以水稻和小麦之间微共线性，使用水稻基因组顺序作为来自对应于小麦表达序列标签区域新标记基础。这是我们能通过标记和缩小基因位点位点到区域，对应于水稻号染色体上个区间。fi通过，这个区域被认为在排好序水稻基因组上。遗传学改良直是小麦面团和面包质量育种项目常规目标，因为能从经济上减少肥需要。然而，由于复杂遗传机制，环境影响大，和谷物产量负相关性传统育种在改良这些特点上非常缓慢。通过鉴定这些基因，包括影响和直接选择分子标记确定等位基因，不选择低产量而致力于改善可以加快进程速度。该研究特殊目有更进步研究在水稻区域和直系同源小麦区域之间包含位点构建包括染色体臂区域物理图谱开发个紧密共显性标记，这可已避免酶切扩增多态性序列标记要求而使用限制性内切酶步骤，并显示系列商业性小麦多样性材料和方法作图群体映射群体数量包括来自,交叉纯合，植物，新植物总共个配子。在三项田间试验中，首先评估来自第二个群体重组体但新重组体线还未鉴定特征，在现在水稻小麦共线性研究中使用了个配子。加利福利亚大学戴维斯分校，加州，美国大学通过使用三个字母代号鉴定了标记开发，而其它在海法，以色列大学依据小麦品种特征基因规则使用为实验代号,。杂交步骤依据记录从单个植物叶中提取了核，文库高密度过滤杂交和基因印迹按照进行。用种不同限制性内切酶消化双亲型和基因，并用印迹映射组成。比较绘图使用下面方法，鉴定了来自共线性水稻序列水稻基因和他们小麦纯合子，预测开放阅读框，从和获得了共线性水稻区域外显子内含子界限。通过使用蛋白和数据库，数据库，使用对预测编码区可能进行了测验。在和数据库中研究水稻阅读框预测小麦纯合体序列，消除预测蛋白重复元素。物理图谱,四倍体小麦文库个高密度过滤器，通过使用杂交探针，发现其上面染色体片段包含了高基因,。通过和印迹验证了正向克隆。为了建立克隆基因用试剂盒和毛细管电泳法辨别了正向克隆。小麦高籽粒蛋白含量基因物理图谱和种高通量分子标记研究末端排序末端排序使用参照说明书方法进行，载体引物根据载体序列设计。包括,依据试剂盒提供去捕获未知目标序列位点。使用这种方法，我们能扩增片段，这些产物进琼脂糖凝胶纯化，用试剂盒克隆，并测序。结果坚定了来自水稻低拷贝数量候选基因来自号染色体染色体片段与小麦区域呈共线性包括个推测基因，其中个在数据库或数据库未知转座子元件有重要相似性，其中个与别蛋白或是植物中任何无重大相关性。通过揭示了五种水稻和小麦重要相似性。设计基因引物成功扩增出了来自基因个。个产物作为探针,在印迹法中杂交用限制性内切酶消化双亲型。杂交结果出现多条带表明该基因是个多基因家族，而其余三个出现条带或两条带，表明是单拷贝或是多拷贝基因。尽管大量限制性内切酶被筛选，在双亲线中没有发现多态性。因此，标记比标记更成熟。标记在,和中应用引物扩增出产物，通过探针发现了个确定克隆，只有个属于基因组。用酶切包含出个片段，并测序。通过标记找到了个单核苷酸多态性。用限制新内切酶得到和片段，片段。这种多态性被用于作图。按表使用设计引物从从得到了片段，用限制性酶酶切得到和片段，酶切白数量上有重要作用，并且这对于基因定位克隆是合理。小麦高籽粒蛋白含量基因物理图谱和种高通量分子标记研究由于谷物基因组范围巨大四倍体小麦，二倍体小麦温带谷物大基组定位克隆不是个琐细实验。然而，最近小麦和大麦定位克隆成功报道证明了这种方法可行性。按照小麦种定位克隆方法大麦中和抗病基因被定位克隆,。在这项报告中，我们鉴定了包括侧翼标记基因两个重叠克隆，表明小麦种染色体步移限制性是可能。然而，这项任务困难之处是小麦复杂基因组大量重复序列，调整为减少染色体步移努力，高分辨率遗传图谱巨大投资。小麦水稻微共线性在之前研究中，通过标记小麦染色体和区域，与水稻号染色体区域存在微共线性,。除了末端分析片段中断外，小麦该区域个基因和水稻存在共线性。在水稻和小麦基因区域发现,和存在共线性。小麦基因是水稻基因同源基因，所以推测其可作为基因候选基因。基因功能未知，但在其第和第二个外显子之间有个保守区，表明该基因可能调控其它基因表达。通过在小麦外作图发现水稻基因毗邻与基因，水稻基因中断了水稻和小麦接近基因共线性。因此，该机应不能作为候选基因，基因可作为水稻位点共线性候选基因。为了证实这个结论，证明是基因，我们需要对小麦区域共线性进行排序，次来证明没有其它小麦基因存在于该区域。通过收集小麦该研究证明了结合了水稻基因组序列信息是为了建立小麦高分辨遗传和物理图,。通过观察和其它微共线性研究表明小麦物理图还需要更进步定位克隆,。基因物理图谱通过,和基因探针单杂交，被选择定位克隆平均数量是，正如预期估计每个基因组中文库覆盖个基因组量。理论上基因组定位克隆数量和基因组应该相似，但是大量基因组克隆在该特殊区域被恢复。来自基因和基因不同代表可能与随机样品区域有关，这是不寻常。区域物理和遗传图距离关系通过作图发现位点在删除区片段长度在，接近于位点。基于染色体最近位置，我们预想在该区域有高度物理和遗传图谱距离比例。随着物理和遗传图距离比例更接近与着丝点，细胞遗传学研究表明在端粒结合区距离呈现指数型下降。,报道区域物理和遗传图距离比例为−,。应该致力于用定位克隆找到染色体定位目基因，仅仅使用粗略物理和遗传图距离比例来将会面临着准确位置目基因定位克隆。辅助标记比较和之间末端物理图，产生了个缺失多态性，可用于多态性共线性标记开发。该标期贷款利息建设投资建设投资估算详见附表资金筹措资金用款计划编制依据资金用款计划是根据工程实施进度计划预测的。资金用款计划及筹措本项目总投资万元，其中建设投资万元流动资金万元。资金来源渠道为企业自筹万元。其余资金扶贫贷款万元建设资金万元，年利率按计算。建设期为年，建设期利息为万元。详见附表。流动资金估算依据本项目流动资金按分项详细估算法进行计算。主要原辅料的最低周转天数为天。燃料及动力最低周转天数为天。生产过程中在产品的周转天数为天。销售过程中产成品的周转天数为天。结算过程中应收帐款天，应付帐款的周转转天数为天，现金的周转天数为天。第十章财务评价产品单位成本和总成本总成本费用估算见附表产品成本估算依据原材料燃料及动力的价格原材料燃料动力价格均按目前市场价格计算，其消耗定额根据工艺计算提供。工资及福利本项目用工人，工资及福利总额按元年人计。折旧和摊销。本项目设备折旧年限为年，建构筑物折旧年限为年，净残值率为，按分类年限计算折旧为万元详见附表固定资产投资中递延资产和无形资产摊销为万元，分别按年和年摊销计入成本费用中，详见附表。其他费用其他费用包括管理费用和销售费用，每年按销售收入的计，为