血红蛋白电泳检查电泳法 原理 血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。每条链含有血红素和络合铁原子 的卜啉。所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。所测定的血红蛋白的蛋白部分称 之为珠蛋白。正常人血红蛋白多肽链包括和。血红蛋白的结构分子 特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。氨基酸不同可形成不同的血红蛋白， 其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。本实验在碱性条件下，以琼 脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基 黑染色。多余的染色液用酸性液体洗去。待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别 有无电泳条带异常。运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。血红 蛋白异常有二种类型血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。血红蛋白中 的条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。 标本采集 标本采集前病人准备受检者应空腹。 标本种类抗凝血 标本要求抗凝剂选用，柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。常规静脉采血 ，加入含有枸橼酸钠溶液的干燥。清洁试管中，充分混匀。 标本储存储存于冰箱中，天。 标本运输储存于状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。 标本拒收标准细菌污染溶血或脂血标本不能作测定。 试剂 试剂名称血红蛋白电泳检查试剂 试剂生产厂家法国公司 包装规格 试剂盒组成 琼脂糖凝胶块溶血素瓶 缓冲液条带包条薄滤纸张 氨基黑浓缩液瓶点样模具滤纸条盒 试剂储存条件及有效期贮存于室温或冰箱，不能冷 冻。有效期两年。 仪器设备 仪器名称电泳仪 仪器厂家法国公司 仪器型号 操作步骤 血红蛋白液制作抗凝血离心分钟，去掉血浆，用倍体积的 生理盐水洗涤红细胞次，若红细胞体积小于，需特别小心。取红细胞 加入溶血液造成溶血。震荡混匀秒钟，室温下培育分钟待测。 启动电泳仪 将加样器放在平板上，有数字的端储存于冰箱中，天。 标本运输储存于状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。 标本拒收标准细菌污染溶血或脂血标本不能作测定。 试剂 试剂名称血红蛋白电泳检查试剂 试剂生产厂家法国，不能冷 冻。有效期两年。 仪器设备 仪器名称电泳仪 仪器厂家法国公司 仪器型号 操作步骤 血红蛋白液制作抗凝血离心分钟，去端向上。各加样孔加入溶血的样品， 分钟内加样完毕。将加样器放入保湿盒内，齿端向上转运时用塑料齿保护架。 等待分钟，使样品扩散至齿端。打开电泳仪盖，抬起电极和加样器支架。 使用取出凝胶板。将薄的滤纸轻轻吸去凝胶板表面的多余液体，然后立即丢弃滤纸。 在电泳仪温度控制板表面的边线内加蒸馏水或去离子水。凝胶面朝上，放置 凝胶板，边缘对齐边线。略略将凝胶弯曲，然后放平，使水头键，电泳开始。 凝胶染色扫描 打开盖子 取出并丢弃加样器 升高两个支架，握住塑料端取出并丢弃缓冲条。 打开凝胶托架，平放，将干燥的凝胶片放入两层间，然后关上托架。 将凝胶支志处。 结果判断与参考范围 扫描得到的只是每种血红蛋白条带的相对浓度值。取出胶片后，首先清洁胶片的 背面。判断溶血液的浓度是否合适，主要看基质带的浓度，如基质带浓度过淡，说 明溶血液的浓度太淡﹤ 质量控制 建议测定每批样本时都附有控制品或含有血红蛋白和的血样本。 临床意义 检测地中海贫血 轻型轻度升高，大多在 中间型胞内有包涵体。血红蛋白电泳无异常发现。 血红蛋白病在或电泳时，向阳极方向移动，泳速快于 在电泳时，仍向阳极方向移动。 血红蛋白胎儿水肿综合症精和手淫天。这是因为少于 小时采取的精液，因相距时间太短，精液中精子的数量可能偏少，容易造成少 精症的假象。如果超过天，精子活率活力都有所下降，也可造成弱精子症的 假象。精液检查应间隔周或两周，要进行次检查。因为个人精子的产生 在年中，可因季节气候等,诸多因素的影响而有些变化。 标本种类精液 标本要求用清洁干燥小瓶收集，不应采用避孕套内精液。 标本储存立即送检。 标本运输室温运输，冬季需保温运输。 标本拒收标准久置标本，污染标本，避孕套内标本。 操作步骤 纪录精液量颜色透明度粘稠度和液化时间。 精子活动率取新鲜标本混匀后，在温玻片上用高倍镜观察个精子，计 数活动精子与不活动精子的比例，计算精子活动的百分率。 精子活动率活动精子数活动精子数不活动精子数 取上述新鲜湿片标本，观察精子的活动力，可按下列五级报告 级精子完全不活动，加温后仍不活动 级精子运动不良，运动迟缓，原地打转或抖动，向前运动能力差 级精子活动较好，运动速度尚可，游动方向不定，呈直线或非直线运动， 带有回旋