1、“.....本项目拟通过酵母表达获得抗菌肽，并将抗菌 肽添加到饲料中，为日益严重的鱼类和畜禽病害防治开辟新的途 径。 项目所处技术领域技术发展现状 由于抗菌肽具有独特的抗菌机制，广谱的杀菌作用，高效的 抗菌活性以及靶菌株难以产生抗性等优点，因此有着广阔的开发 应用前景，是目前国际学术研究的活跃领域之。计算机检索表 明，国外的科学家作了大量的工作，对抗菌肽的研究已经取得了 许多进展......”。

2、“.....目的是尽可能得到不同类型的抗菌肽分子。迄今国外科学家已在不同生物中发现了多种抗菌肽，我国在抗菌肽的研究方面 起步较晚，仅有少量报道。大量结果显示不同的抗菌肽其抗菌活 性和抗菌谱存在很大的差异，因此继续寻找高效广谱的生物抗菌 肽，是广大生命科学工作者努力的方向。 项目技术先进性，对相关领域技术进步的推动作用 本项目采用的是先进的分子生物学研究技术......”。

3、“.....构建重组分子。然后用醋酸锂法将重组分 子转入解脂耶氏酵母中，筛选高效表达抗菌肽的工程菌，以工程 菌工业化发酵生产抗菌肽，进而开发出高效广谱的新型抗菌剂。 该项目的实施对相关领域技术进步有定的推动作用。 项目目前进展情况。 我们已进行了前期工作，用引起人畜共患病的多种微生物诱导 鱼，继而采用差异显示技术从经微生物诱导的鱼的肝脏中分 离到了三个特异表达的分子，并使用技术克隆了它们的全长基因......”。

4、“..... 二技术方案论述 项目技术关键点或创新点论述，项目完成时达到的技 术水平 目前，人们主要以两种方法获得抗菌肽。其是直接从生物体 内分离抗菌肽，用这种方法不能获得大量的抗菌肽。其二是根据 已发现的抗菌肽基因的序列设计引物在不同的生物中通过技 术克隆抗菌肽基因，该方法只能在不同生物中获得该抗菌肽的同 源基因，而不能获得新的抗菌肽基因。在本项目中，我们将前期 工作中获得的抗菌肽基因与载体连接......”。

5、“.....以工程菌工业化发酵生产抗菌肽，用这种方法可获得大量 新的高效广谱抗菌肽。 计算机检索结果表明，人们对昆虫抗菌肽进行了较多的研究， 而对鱼类抗菌肽研究很少。目前国内只有厦门大学最近采用传统 方法从海水养殖的鲈鱼中分离出种抗菌肽基因，但并未对该基因的表达及其产物的抗菌活性进行分析，也没有开发出基于鱼类 抗菌肽基因的广谱抗菌肽制剂。本项目将开发出具有自主知识产 权的新型抗菌肽制剂。 项目完成时至少可达到国内领先水平。 目前......”。

6、“.....其是直接从生物体 内分离抗菌肽，用这种方法不能获得大量的抗菌肽。其二是根据 已发现的抗菌肽基因的序列设计引物在不同的生物中通过技 术克隆抗菌肽基，用这种方法可获得大量 新的高效广谱抗菌肽。 计算机检索结果表明，人们对昆虫抗菌肽进行了较多的研究， 而对鱼类抗菌肽研究很少。目前国内只有厦门大学最近采用传统 方法从海水养殖的鲈鱼中分离出种......”。

7、“..... 抗菌肽基因酵母表达体系的构建及高效表达系统的筛选 采用醋酸锂法将重组载体转入解脂耶氏酵母，构建抗菌肽基因 酵母表达系统。采用法和经 层析，收集各个洗脱峰，用的分析鉴定目的多肽 所在的峰。将含有目的多肽的洗脱液用透析，冻干浓缩。多肽于 保存，用于分析鉴定及生物功能试验......”。

8、“.....将大 肠杆菌等受抑菌培养后分别加入到平皿中，用玻璃刮铲将菌液涂布 均匀，再将浸透被测样品液的滤纸片放在培养基的表面，标记后置 家相关行业许可认证等 项目达到的目标 构建出抗菌肽酵母高效表达体系，大量表达抗菌肽。 研制出具有自主知识产权的高效广谱的抗菌肽制剂。 考核指标 该酵母表达体系对抗菌肽的表达稳重组载体转入解脂耶氏酵母，构建抗菌肽基因 酵母表达系统。 月筛选高效表达抗菌肽的酵母系统。 月酵母发酵条件的优化......”。

9、“..... 月抗菌肽的分离和纯化。 月抗菌算情况项目投资总额项目已完成投资 项目须新增投资及投资构成和投资预算申请科技三项经费的 使用预算见附表。 申请经费总额万元。其中仪器设备购置费万元材料样品费万元试验费检测费万元资料调研费 万元鉴定费万元。 三项目实施支撑条件 项目技术来源 课题申请人在法国国家农业研究中心分子遗传学实验室工作 期间，参加了欧盟资助的有关微生物抗菌肽在解脂耶氏酵母中表达 的研究课题......”。