特性。 主要技术关键 微波萃取技术逆向动态多级连续提取藤茶黄酮和多糖时，微 波功率微波作用时间料液比提取温度浸泡次数等工艺参数的 确定。 黄酮结晶温度的控制及结晶洗涤方法溶解溶剂及浓度的确 定。 大孔树脂的选择及静态因子和动态因子的优化。 分子印迹技术分离二氢杨梅素时，交联剂功能单体的选择， 分子印迹聚合物的制备及提高分子印迹聚合物对二氢杨梅素的选择 识别特性。 主要创新点 采用微波萃取技术，逆向动态多级连续提取藤茶黄酮和多糖， 既确保藤茶黄酮和多糖的最大溶出，又节省了提取时间。 采用大孔树脂富集黄酮，有效的去除色素单宁类的杂质， 达到纯化富集黄酮的目的。 采用分子印迹技术分离二氢杨梅素，确保了分离效果，保证了产品的中二氢杨梅素的含量。 项目完成时达到的技术水平 项目预期达到的目标为国内领先水平，提供小试基础上的扩 大试验优化的工艺参数，可指导中试生产性试验，为工业化分离精制 藤茶提取物提供工艺参数和技术支持。 二氢杨梅素产品纯度藤茶多糖产品纯度藤茶 甙产品纯度。 二氢杨梅素提取率多糖提取率藤茶甙提取率 。 各种技术资料齐全，并制定藤茶提取物生产标准，以及提取 过程中跟踪检测方法。 项目技术方案论述 技术研究内容 藤茶中黄酮和多糖的微波萃取工艺研究将经过预处理的藤 茶，以水为提取剂，采用微波萃取技术，逆向动态多级连续提取其中 的黄酮和多糖，以单因数实验和响应面实验相结合的方法，研究微波 功率微波作用时间料液比提取温度浸泡次数等因素对黄酮和 多糖溶出的影响。黄酮结晶及溶剂工艺的研究黄酮结晶的温度控制条件，结 晶洗涤方法溶解溶剂的种类及浓度。 多糖沉淀的研究研究溶剂种类茶提取物主要是黄酮，但普遍存在工艺技术落后产 品中有效成分含量低资源利用不合理等缺陷，导致目前市场上的产 品附加值低，应用范围窄，市场竞争力不强。 本项目取材于江西省特色资源藤茶，采用先进的微波萃取技 术大孔树脂富集技术分子印迹技术分离精制藤茶中主要活性成分 二氢杨梅素，并获得藤茶多糖藤茶甙等产品。与市场上其它产 品相比，具有附加值高，生产工艺先进，应用范围广，资源利用合理 充分等优势。而且项目承担单位与本项目相关的技术储备多，多个项 目已经产业化。项目负责人在天然产物提取与分离工作方面已从事研 项目的必要性 项目所处技术领域产业政策 本项目针对藤茶提取物进行分离与精制，符合国家产业发展政策 和我市的中药现代化及农业发展规划，所支持产业符合江西省委省 政府在山上再创个江西的发展思路。藤茶栽培可以充分利用我省丘 陵地区荒山荒坡发展特色经济，提高农民收入。项目所处技术领域为 生物医药有效成分提取与浓缩技术及产品，天然产物提取与分离 是国家重点支持的研究开发项目，也是农业调整产业结构，实现经济 作物中药材高效益的技术支撑。对推进中药材体化进程，延长 中药产业链，改造传统产业及生产工艺，发展农业优势，将发挥重要 作用。同时，藤茶为药食两用植物，最初作为剂草药应用于民间， 我国广西湖南等省区壮族瑶族和湖北土家族苗族人民常用其幼嫩 茎叶入茶，夏天泡茶，数日不馊，有神茶之称，已有数百年的历史。 据中草药汇编等文献记载，该药性味甘淡清热解毒主治黄疸 型肝炎感冒风热咽喉肿痛等。民间认为大凡失音中暑口舌生 疮风火牙痛便秘等症，用开水泡饮藤茶，疗效明显对马牙疳 核准通过，归档资料。 未经允许，请勿外传,脚丫湿疹等用藤茶外敷外洗也有定疗效。藤茶的药用价值和保健 功能显著。因此，本项目的研究目的在于开发出高含量的二氢杨梅素 产品，提高其附加值，扩大其应用范围，并开发藤茶甙藤茶多糖等 产品，实现藤茶资源的充分合理利用。 项目所处技术领域技术发展现状 粗品，残留液经醇沉后即得藤茶多糖。 将黄酮粗品采用溶剂溶解后，选用相应的大孔树脂富集黄酮，分子印 迹技术精制黄酮中的二氢杨梅素，经真空冷冻干燥后得高含量的二氢 杨梅素产品。并对二氢杨梅素的最小抑菌浓度进行研究。项目预期达 到的目标为国内领先水平，为工业化分离精制藤茶提取物提供技术支 持。 本项目实施对推进中药材体化进程，延长中药产业链，改造传 统产业及生产工艺，发展农业优势，将发挥重要作用。同时，项目实 施拓展藤茶提取物应用领域。再者，本项目的实施为以花果茎叶为原 料提取分离有效成分提供非常有参考价值技术路线和工艺参数。 项目目前进展情况 到目前为止，项目组已进行大量前期研究工作，已获得藤茶萃 取分离黄酮新工艺研究技术成果赣科鉴字第号，该成 果达到了国内领先水平，并转让给本项目合作单位江西东南野生植物 开发有限公司进行工业化生产。 二技术方案论述 项目技术关键点或创新点论述，项目完成时达到的技术水平主要技术原理 根据藤茶中黄酮和多糖都易溶于水的特性，以水为提取剂， 采用微波萃取技术，逆向多级动态连续提取其中的黄酮和多糖，以单 因数实验和响应面实验相结合的方法，确保黄酮和多糖的最大溶出。 黄酮粗品经溶剂溶解后，还含有大量的色素单宁类物质， 而大孔树脂对色素单宁类物质又有很强的吸附能力，采用大孔树脂 除去色素单宁类物质后，达到富集黄酮的目的。 采用分子印迹技术分离黄酮中的二氢杨梅素，以二氢杨梅素 为模板分子，选择合适的单体及交联剂通过聚合解吸等步骤制备出 分子印迹聚合物，利用其对二氢杨梅素的选择识别特性，达到分离精 制二氢杨梅素的目的。该技术般包括以下几个步骤在定溶剂 也称致孔剂中，模板分子与功能单体依靠官能团之间的共价或非共 价作用形成主客体配物加入交联剂，通过引发剂引发进行光或热 聚合，使主客体配合物与交联剂通过自由基共聚合在模板分子周围形 成高联的刚性聚合物将聚合物中的印迹分子洗脱或解离出来，这 样在聚合物中便留下了与模板分子大小和形状相匹配的鉴于藤茶及其提取物的多种功效，目前已被广泛应用于食品添加 剂保健品化妆品和医药产品等领域。我国的江西湖南广西 广东福建湖北等地的不少厂家研制生产了为数不少的藤茶类产品 各类保健茶，但这类产品均为初级加工产品。其应用范围窄，附 加值低。而在国外，由于藤茶属于我国特色资源，资源的限制导致国 外藤茶类产品研究少。 目前，国内有较多关于藤茶中提取黄酮的研究报道，而藤茶甙 藤茶多糖的研究则较少。资料显示，藤茶黄酮的提取工艺主要采用乙 醇回流或水煎煮法，采用这些方法黄酮的得率较低，且所得黄酮产品 中杂质较多，也有少量报道研究了将黄酮粗提物经过柱层析结晶等 方法分离后得到二氢杨梅素，但其分离效果均不理想，产品中二氢杨 梅素的含量般不超过。而且这类研究中只单的提取黄酮或多 糖等种有效成分，导致资源不能充分合理的利用。而在国外，由于资源限制的原因，藤茶提取物的研究仅仅局限于其药理及临床应用上 的研究，而关于藤茶提取物的分离精制报道较少。为此，我们提出采 用微波萃取技术，逆向动态多级连续提取其中的黄酮和多糖，然后采 用大孔树脂富集分子印迹分离等技术精制二氢杨梅素，获得高含量 二氢杨梅素产品及藤茶甙藤茶多糖等产品，既提高了其附加值，满 足了市场需要，又实现了资源的充分合理利用。 针对藤茶提取物分离与精制及抗菌活性的研究课题，对近二 十年来的万方数据库中国专利数据库全库以及近十年来中国学术期 刊数据库进行相关文献进行国内检索，所检索到的文献经比较分析 鉴别，可得到如下结论 国内有关于从藤茶中提取二氢杨梅素的相关报道研究，但 未见工艺中同时采用微波萃取大孔树脂吸附分子印迹技术制备二 氢杨梅素的相关报道。 国内有关于藤茶黄酮或二氢杨梅素产品的相关报道，但未见 有关于产品中二氢杨梅素含量达到以上的产品。 项目技术先进性，对相关领域技术进步的推动作用 本项目采用微波萃取，逆向动态多级连续提取藤茶中黄酮和多 糖。提取完毕后离心分离，滤渣乙醇浸提柱层析分离后得藤茶甙清液经浓缩重结晶得到黄 细菌总数 酵母菌和霉菌 大肠杆菌阴性 沙门氏菌阴性 黄曲霉菌阴性分阶段描述项目执行过程中各阶段目标 起止年月阶段目标 完成了藤茶中提取黄酮文献检索市场调研 进行预备实验，拟定研究方案及工艺技术路线。 完成了藤茶中黄酮萃取精制工艺研究，确定其 最佳工艺参数。并完成了阶段成果鉴定工作。 进步完成藤茶中黄酮多糖和甙类成分分离 纯化文献检索市场调研及项目申报工作 进行预备实验，拟定研究方案及工艺技术路线。 完成藤茶中黄酮和多糖的微波萃取工艺研究， 确定其最佳工艺参数。完成藤茶甙分离工艺研 究，确定其最佳工艺参数。 完成分子印迹分离黄酮中二氢杨梅素的工艺研 究，确定其最佳工艺参数。完成二氢杨梅素的 抑菌性实验。 按照技术路线要求，对接技术组合工艺达 到科学合理操作简便。提纯含量为 的二氢杨梅素产品及少量藤茶多糖藤茶甙等 产品。 评价工艺水平，制定产品检测方法及产品执行 标准，并将研究产品送法定检测单位检测。整理 材料，进行项目总结，申请项目鉴定。 项目经费预算情况 项目投资与资金筹措单位万元 序号项目金额 投资总额 固定资产投资 流动资金 资金筹措 自筹资金 其中已完成投资 新增投资 申请科技三项经费 借贷款 项目拟购设备清单 序 号设备名称 规格 型号 单 位 数 量 单价 万元 金额万 元 微波真空冷冻干燥装置套 旋转蒸发仪套 紫外分光光度计台 设备