高中人教版生物选修1课题1DNA的粗提取与鉴定》（共68张PPT）（最新）

因此，通过反复溶解与析出，就能够除去与溶解度不同的多种杂质二案例二以菜花为实验材料进行的粗提取课前准备将新鲜菜花和体积分数为的乙醇溶液放入冰箱冷冻室提取的具体步骤取材称取菜花，去梗取花，切碎研磨将碎菜花放入研钵中，倒入研磨液，充分研磨研磨液的配制方法如下将.加入到蒸馏水中，使其溶解，然后，用的溶液调节至.，再加入。

待上述药品全部溶解后，再用蒸馏水定容至提供缓冲体系，在这体系中呈稳定态为三羟甲基氨基甲烷乙二胺四乙酸二钠是酶的抑制剂，可以防止细胞破碎析出减小杂质的溶解度，加快杂质的析出向溶有的的溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中的溶解度变化情况分别是减小减小增大增大先减小后增大增大减小欲使溶有的的溶液中的析出，最有效的办法是加蒸馏水加矿泉水加清水加生理盐水与析出粘稠物有关的叙述，不正确的是操作时缓慢滴加蒸馏水，降低的溶解度操作时用玻棒轻缓搅拌以保证分子的完整加蒸馏水可以同时降低和蛋白质的溶解度当丝状粘稠物不再增加时，溶液的浓度可以认为是.遇二苯胺会染成沸水浴硅红色红色紫色蓝色此实验中使用几次溶液共次。

第，第，第八。

都是溶解，第步析出。

后酶降解十二烷基磺酸钠可以使蛋白质变性，与分离过滤在漏斗中垫上尼龙纱布，将菜花研磨液过滤到烧杯中有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心，用的转速，离心，取上清液放入烧杯中。

在冰箱中放置几分钟后，再取上清液沉淀将倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为的预冷乙醇溶液中，并用玻璃棒缓缓轻轻地搅拌溶液玻璃棒不要直插到烧杯底部。

沉淀后，可见白色的絮状物出现。

用玻璃棒缓缓旋转，将絮状物缠绕在玻璃棒上然后进行以鸡血为实验材料进行的粗提取观察你提取的颜色，如果不是白色丝状物，说明中的杂质较多二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功，如果不呈现蓝色，可能所提取的含量低，或是实验操作中出现错误，需要重新制备四课题成果评价是否提取出了本实验提取的粗制品有可能仍然含有核蛋白多糖等杂质二分析中的杂质三不同实验方法的比较对于不同的实验方法，本课题可以采用分组的方法进行研究。

首先选取不同的实验材料，其次同种材料还可以采用不同方法，从多方面比较实验结果，如的纯度的颜色二苯胺显色的深浅等，看看哪种实验材料哪种提取方法的效果更好在制备鸡血细胞液的过程中，加入柠檬酸钠的目的是.防止凝血.加快析出.加快溶解.加速凝血的溶解度最低时，的物质的量浓度为.在向溶解的溶液中，不断加入蒸馏水的目的是加快溶解的速度加快溶解杂质的速度减小的溶解度，加快馏水质量浓度为．的柠檬酸纳溶液务质量的浓度分别为和．的氯化纳溶液二苯胺试剂。

铁架台铁环镊子三角架酒精灯石棉网载玻片玻璃棒滤纸滴管量筒，个烧杯，个，各二个试管，二个漏斗试管夹纱布。

课前准备鸡血细胞液过程课前准备鸡血细胞液的过程课前准备鸡血细胞液取质量浓度为．的柠檬酸钠溶液抗凝剂，置于烧杯中。

注入新鲜的鸡血约，同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸钠溶液充分混合，以免凝血。

将烧杯中的血液置于冰箱内，静置天，使血细胞自行沉淀。

也可以将血液倒入离心管内，用转每分的离心机离心，血细胞沉淀于离心管底部。

实验时，用吸管除去离心管上部的澄清液，就可以得到鸡血细胞液。

过程柠檬酸钠作用防止血液凝固作用机理柠檬酸钠能与血浆中的发生反应，生成柠檬酸钙络合物，血浆中游离的大大减少，血液就不会凝固鸡血细胞破碎以后释放出的，容易被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了减少的损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液注意事项讨论提取鸡血中的时，为什么除去血液中的上清液答血液分为两部分，部分是血浆，部分是血细胞，离心后除去的上清液是血浆方法步骤提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液，注入到烧杯中。

向烧杯中加入蒸馏水，同时用玻璃棒充分搅拌，使血细胞加速破裂。

然后，用放有纱布的漏斗将血细胞液过滤至。

取其滤液。

提取鸡血细胞的细胞核物质方法步骤讨论答让氯化钠溶液取个烧杯，用放有两层纱布的漏斗过滤步骤中的溶液。

取其滤液，溶于滤液中提取含杂质较少的在上述滤过的溶液中，加入冷却的酒精的体积分数为的溶液使用冷却的酒精，对的凝集效果较佳，并用玻璃棒搅拌，溶液中会出现含杂质较少的丝状物。

用玻璃棒将丝状物卷起，并用滤纸吸取上面的水分。

这种丝状物的主要成分就是答因为不溶于冷酒精，而其他物质可以溶解在酒精中，使含杂质较少的丝状物可以析出，悬浮于溶液中讨论观察丝状物呈什么颜色答白色为什么要加的冷酒精取两支的试管，各加入氯化钠的物质的量浓度为．或者的溶液，将丝状物放入其中支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。

然后，向两支试管中各加入的二苯胺试剂。

混合均匀后，将试管置于沸水中加热，待试管冷却后，观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化的鉴定讨论答有丝状物的试管变成蓝色，另试管还是原来颜色这鉴定结果说明什么问题比较两个试管中溶液的颜色有什么不同答提取出的丝状物是的直径约为，实验中出现的丝状物的粗细是否表示个分子直径的大小答分子直径只有。

丝状物是多个子聚在起形成的提取鸡血细胞的细胞核物质过滤溶解析出含的粘稠物滤取含的粘稠物将的粘稠物再溶解过滤含有的氯化钠溶液提取含杂质较少的的鉴定答整个实验共“两次蒸馏水，三次过滤，两次析出，六次搅拌”讨论两次蒸馏水第次细胞吸水胀破第步第二次使黏稠细胞内浓度大于周围溶液的浓度，细胞会吸水以至胀破为什么要加入蒸馏水加入蒸馏水后细胞会有什么变化用玻璃棒搅拌有什么意义答用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的破裂。

注意应沿个方向快速搅拌，但也不能太快太猛，防止打碎滤去的是什么物质得到的是什么答过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质得到的是与蛋白质等物质结合在起的溶解析出含的粘稠物滤取含的粘稠物溶解将氯化钠的物质的量浓度为的溶加入到滤液中，并用玻璃棒沿个方向搅拌，使其混合均匀，这时在溶液中呈溶解状态沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌，这时烧杯中有丝状物出现，注意观察丝状物呈什么颜色。

继续加入蒸馏水，溶液中出现的粘稠物会越来越多。

当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水这时溶液中氯化钠的物质的量浓度相当于.析出含的粘稠物讨论加入蒸馏水的目的降低溶液浓度到使溶解度最低点，使从溶液中析出将溶液中的与其他杂质分离，这步骤是实验成败的关键。

实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水，并轻轻地沿个方向不停地均匀搅拌，以利于分子的附着和缠绕注意事项滤取含的粘稠物用放有多层纱布的漏斗，过滤步骤中的溶液至的烧杯中，含的粘稠物被留在纱布上将的粘稠物再溶解过滤含有的氯化钠溶液提取含杂质较少的将的粘稠物再溶解取个烧杯，向烧杯内注入氯化钠的物质的量浓度为的溶液。

用钝头镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中，用玻璃棒不停地搅拌，使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中过滤含有的鉴定的实验设计实验材料的选取材料鱼卵猪肝菜花香蕉鸡血哺乳动物的红细胞猕猴桃洋葱豌豆菠菜在液体培养基中培养的大肠杆菌。

从中选取种实验材料原则凡是含有的生物材料都可以考虑，但选用含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大动物细胞的破碎较易，例如，在鸡血细胞液中加入定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可二破碎细胞，获取含的滤液动物细胞答蒸馏水对于鸡血细胞来说是种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂细胞膜和核膜的破裂，从而释放出讨论为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂植物细胞需要先用定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜植物细胞讨论加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么答洗涤剂是些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于的释放食盐的主要成分是，有利于的溶解实例提取洋葱时，在切碎的洋葱中加入定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液答研磨不充分会使细胞核内的释放不完全，提取的量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物用二苯胺鉴定不显示蓝色等讨论如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响三去除滤液中的杂质为了纯化提取的需要将滤液作进步处理讨论此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分答可能含有核蛋白多糖和等杂质和。

讨论为什么反复地溶解与析出，能够去除杂质答用高盐浓度的溶液溶解，能除去在高盐中不能溶解的杂质用低盐浓度使析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。

因此，通过反复溶解与析出，就能够除去与溶解度不同的多种杂质讨论方案二与方案三的原理有什么不同答方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的与蛋白质分开方案三利用的是和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与分离方案二利用了酶的专性方案三利用了的稳定性。

四的析出与鉴定的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒精溶液体积分数为，静置，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取。

用玻璃棒沿个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分的析出的鉴定鉴定时在试管中先加入物质的量的浓度为的溶液于两只试管中，其中只加入丝状物，各加入二苯胺试剂。

混合均匀后，将试管置于沸水中加热，待试管冷却后，比较两只试管中溶液颜色的变化，看看溶解有的溶液是否有蓝色案例以鸡血为实验材料进行的粗提取三实验案例鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长鸡血细胞做实验材料的原因鸡血细胞核的含量丰富，材料易得实验原理在溶液中的溶解度，是随着的浓度的变化而改变的。

当的物质的量浓度为.时，的溶解度最低。

利用这原理，可以使溶解在溶液中的析出。

不溶于酒精溶液，但是细胞中的些蛋白质可以溶于酒精溶液。

利用这原理，可以进步提取出含杂质较少的。

遇二苯胺沸水浴会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定的试剂。

实验材料和用具鸡血细胞液体积分数为的冷酒精溶液实验前置于冰箱内冷却蒸专题和蛋白质技术课题的粗提取与鉴定基础知识提取的方法提取生物大分子的基本思路选用定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子提取的基本思路利用与蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取，去除其他成分的溶解性和蛋白质等其他成分在不同浓度的溶液中溶解度不同，利用这特点，选择适当的盐浓度就能使充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反讨论根据在溶液中的溶解度曲线图，思考在什么浓度下，的溶解度最小在