精溶液中消毒次，然后在酒精灯火焰上烧遍，冷却后再接种外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，般胡萝卜块，菊的茎或叶块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件插入时应注意方向，形态学上端朝上，形态学下端朝下，不要倒插。茎段茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分正常苗污染苗外植体带菌培养基及接种器具灭菌不彻底接种操作时带入环境不清洁污染途径四培养接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒培养温度控制在每日用日光灯光照五移栽移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日。般放置在的遮荫环境中，适应。试管苗不萎蔫，有现无菌环境的四结果分析与评价对接种操作中污染情况的分析二是否完成了对植物组织的脱分化和再分化三是否进行了统计对照与记录四生根苗的移栽是否合格生长的趋势，便可移栽。打开封口膜清洗转移用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活段时间移栽幼苗长壮后，移栽到土壤中固体基质型，含水量高蓄水性强透性好，适合栽培珍珠岩,珍珠岩是种火山喷发的酸性熔岩，经急剧冷却而成的玻璃质岩石，有弧形或圆形裂隙，如珍珠的结构，所以被命名为珍珠岩。蛭石是种天然无毒的矿物质，在高温作用下会膨胀的矿物。它是种比较少见的矿物，属于硅酸盐。六栽培幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水施肥，直至开花培养基的灭菌高压蒸汽灭菌外植体的消毒酒精氯化汞接种的无菌操作酒精酒精灯灼烧无菌箱中的培养移栽到消过毒的环境中生存段时间。在整个操作过程中，是如何来胞分裂素后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率高激素的使用顺序影响植物细胞的发育方向思考以下培养基出现的现象反应了什么问题生长素细胞分裂素高利于根的形成适中利于愈伤组织的形成生长素细胞分裂素有利于根的分化生长素细胞分裂素有利于芽的分化，抑制根的分化生长素细胞分裂素促进愈伤组织生长.温度光照控制在.左右，温度控制在,每日用日光灯照射。激素用量的比例影响植物细胞的发育方向离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素生长素愈伤组织芽根细胞分裂素生长素细胞分裂素生长素再分化植物细胞培养不需要光需要光制备固体培养基外植体消毒接种培养栽培三实验具体操作过程移栽制备固体培养基培养无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为的酒精中摇动次，持续，立即将外植体取出，在无菌水中清洗消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为.的氯化汞溶液中，取出后在无菌水中至少清洗次，漂净消毒液三接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用的酒精喷雾使空气消毒，酒精擦洗工作台并用紫外线照射分钟。接种室消毒无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。材料的切取和接种将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿中切成.的小段，用镊子夹取菊花茎段接种。接种注意事项每接种块外植体前，镊子需放入体积分数为的包括多种营养成分，实验室般使用保存配制好的培养基母液来制备配制各种母液无机物中大量元素浓缩倍，微量元素浓缩倍，常温保存激素类维生素类以及用量较小的有机物般可按的质量浓度单独配制成母液用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量配制培养基分装到锥形瓶中，每瓶分装或配制培养液调培养基的分装由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素灭菌分装好的培养基连同其他器械起进行高压蒸汽灭菌琼脂加水并加热熔化，加蔗糖和各种母液选材菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝二外植体消毒消毒流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗左右酒精处理物器官组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程.细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的成无定形状态的薄壁细胞.脱分化再分化愈伤组织不同的植物，培养的难易程度差别很大烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难同种植物材料的年龄保存时间的长短等也会影响实验结果菊花的组织培养般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。二影响植物组织培养的因素．植物材料的影响营养培养基大量元素微量元素有机物甘氨酸烟酸肌醇维生素蔗糖植物激素生长素细胞分裂素赤霉素等主要影响蛋白质核酸的合成主要影响酶的活性。蔗糖既是碳源也是调节渗透压的物质维生素能促进细胞分裂和诱导器官分化甘氨酸是蛋白质的组成成分，也是有机氮源。常用植物激素生长素细胞分裂素和赤霉素生长素细胞分裂素是启动细胞分裂脱分化和再分化的关键性激素在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈加强的趋势激素的使用顺序使用的量及比例影响植物细胞的发育方向植物激素的影响生长素类，二氯苯氧乙酸，吲哚乙酸萘乙酸吲哚丁酸细胞分裂素类激动素苄基嘌呤玉米素赤霉素类赤霉酸使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用专题植物的组织培养技术植物组织培养的基本过程基础知识植物组织培养的原理概念高度分化的植物细胞，仍然具有发育成完整新个体的潜能。基础生物体的每个细胞都包含有该物种所特有全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因。因为它们都是由同个受精卵细胞有丝分裂分化而来。细胞的全能性.离体.定的营养物质.植物激素主要是生长素和细胞分裂素.适宜的外界环境条件，例如无菌适宜的温度值湿度光照等细胞全能性大小受精卵生殖细胞体细胞植物细胞动物细胞分化程度低的细胞分化程度高的细胞植物组织培养的条件从活植物体上切下进行培养的那部分细胞组织或器官。植物组织培养的相关概念外植体由高度分化的植物精溶液中消毒次，然后在酒精灯火焰上烧遍，冷却后再接种外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，般胡萝卜块，菊的茎或叶块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件插入时应注意方向，形态学上端朝上，形态学下端朝下，不要倒插。茎段茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分正常苗污染苗外植体带菌培养基及接种器具灭菌不彻底接种操作时带入环境不清洁污染途径四培养接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒培养温度控制在每日用日光灯光照五移栽移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日。般放置在的遮荫环境中，适应。试管苗不萎蔫，有无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为的酒精中摇动次，持续，立即将外植体取出，在无菌水中清洗消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为.的氯化汞溶液中，取出后在无菌水中至少清洗次，漂净消毒液三接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用的酒精喷雾使空气消毒，酒精擦洗工作台并用紫外线照射分钟。接种室消毒无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。材料的切取和接种将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿中切成.的小段，用镊子夹取菊花茎段接种。接种注意事项每接种块外植体前，镊子需放入体积分数为的