的温度下培养。观察在菌落计数时，每隔统计次菌落数目。原因不同种类的微生物，往往需不同的培养温度和培养时间，每隔统计次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。.以“稳定菌落”为观察对象。原因不同种类的细菌形成的菌落，在大小形状光泽度颜色硬度透明度等方面具有度的特征，菌落特征可作为菌种鉴定的重要依据。微生物的培养与观察筛选后必鉴定鉴别培养基鉴别培养基不影响微生物的生存根据微生物的代谢特点，在培养基中加入种指示剂或化学药品，用于鉴别不同种类的微生物，如加入伊红美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否大肠杆菌如有，菌落呈深色，并带有金属光泽酚红培养基鉴定分解尿素的细菌。原理脲酶催化尿素分解成氨培养基碱性增强酚红变红脲酶阳性培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏培养基的菌落数目明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出些菌落。二样品的稀释操作是否成功如果得到了个或个以上好棉塞。在稀释土壤溶液的过程中，每步都要在火焰旁进行。分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证获得菌落数在之间适于计数的平板。如果得到了个或个以上菌落数目在的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。菌落数目在的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数。三重复组的结果是否致如果学生选取的是同种土样，统计的结果应该接近。如果结果相差太远，教师需要引导学生起分析产生差异的原因。四.结果分析与评价四操作提示无菌操作做好标记规划时间无菌操作土壤取样从肥沃湿润的土壤中取样。先铲去表层土左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。制备培养基制备以尿素为唯氮源的选择培养基。样品的稀释注意为了保证结果准确，般选择菌落数在的平板上进行计数。为使结果接近真实值可将同稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。统计的菌落往往比活菌的实际数目低。这是因为两个或多个细胞连在起时，平板上观察到的只是个菌落。因此，统计结果般用菌落数而不是活菌数来表示。涂布平板法所选择倒平板的稀释度很重要，般以三个稀释度中的第二个稀释度倒平板所出现的平均菌落数在个左右为最好。应在火焰旁称取土壤。将称好的土样倒入盛有无菌水的锥形瓶中，塞的实际数目，因此统计结果般用表示。低菌落数而不是活菌数每克样品中的菌落数其中，代表稀释度下平板上生长的平均菌落数，代表涂布平板时所用的稀释液的体积，代表稀释倍数。注意事项为了保证结果准确，般选择菌落数在的平板上进行计数。为使结果接近真实值可将同稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。统计的菌落往往比活菌的实际数目低。涂布平板法所选择的稀释度很重要，般以三个稀释度中的第二个稀释度所出现的平均菌落数在个左右为最好。例两位同学用稀释涂布平板法测定同土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为的培养基中，得到以下两种统计结果。甲同学在该浓度下涂布了个平板，统计的菌落数为。乙同学在该浓度下涂布了三个平板，统计的菌落数分别为，该同学以这三个平板上菌落数的平均值作为统计结果。你认为这两位同学的作法正确吗如果有问题，错在哪甲没有重复实验至少涂布个平板乙组结果误差过大，不应用于计算平均值是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结处中分布着绝大多数的细菌。取样要求铲去表层土。注意无菌操作取土样用的小铁铲和盛土样的信封等用具在使用前都要灭菌。应在火焰旁称取土壤。并在火焰附近将土样到入锥形瓶并塞好棉塞。二.实验的具体操作㈡.制备培养基制备以尿素为唯氮源的选择培养基。三样品的稀释注意灭菌应在火焰旁称取土壤。在稀释土壤溶液的过程中，每步都要在火焰旁进行测细菌数般用稀释液测放线菌般用稀释液测真菌数般用稀释液分离不同的微生物采用不同的稀释度原因不同微生物在土壤中含量不同目的保证获得菌落数在之间适于计数的平板㈣.取样涂布实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型培养时间稀释度培养物等。如果得到了个或个以上菌落数目在的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。㈤.微生物的培养与观察培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌培养放线菌培养霉菌果的可信度。.设置对照设置对照的目的对照实验指除了的条件外，其他条件都的实验。满足该条件的称为对照组，未满足该条件的称为实验组。被测试相同实验组对照组设置对照同等条件下，培养空白培养基。菌落计数配制土壤溶液系列稀释涂布平板与培养实例在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，同学从对应的倍稀释的培养基中筛选出大约个菌落，但是其他同学在同样的稀释度下只选择出大约个菌落。分析其原因。原因土样不同，培养基污染或操作失误或者是混入了其他的含氮物质小结通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。方案由其他同学用与同学相同土样进行实验方案二将同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。结果预测如果结果与同学致，则证明无误如果结果不同，则证明同学存在操作失误或培养基的配制有问题。土壤取样土壤是天然培养基取样的位置土壤，天然培养基，含有大量的微生物，土壤中∼是细菌，细菌适宜在酸碱度接近中性的的潮湿土壤中生长。在富含有机质的土壤层的∼法对它进行纯化培养分离。实验室中微生物的筛选原理人为提供有利于目的菌株生长的条件包括营养温度等，同时抑制或阻止其他微生物生长。选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入种物质以达到选择的目的。例如培养基中不加入有机物可以选择培养微生物培养基中不加入氮元素，可以选择培养的微生物，加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。自养型固氮.琼脂.尿素.葡萄糖.本课题使用的培养基的配方从物理性质看此培养基属于哪类固体培养基在此培养基中哪些作为碳源氮源碳源葡萄糖尿素氮源尿素培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。培养基选择分解尿素的微生物的原理显微镜直接计数利用血球计数板，在显微镜下计算定容积里样品中微生物的数量。㈡.统计菌落数目不能区分死菌与活菌不适于对运动细菌的计数需要相对高的细菌浓度个体小的细菌在显微镜下难以观察缺点.间接计数法活菌计数法常用方法每克样品中的菌落数其中，代表稀释度下平板上生长的平均菌落数，代表涂布平板时所用的稀释液的体积，代表稀释倍数。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的个菌落，来源于样品稀释液中的个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。原理稀释涂布平板法。.间接计数法活菌计数法常用方法当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的个菌落，来源于样品稀释液中的个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。原理稀释涂布平板法。个菌落个活菌。统计的菌落数实际活的细菌数。用稀释涂布平板法定要重复实验，般至少要涂布个平板。重复实验结果中小于菌落的不用。不定统计原则选∼个菌落的平板统计。每个稀释度取个平板取其平均值。统计结果统计的菌落数往往比活菌课题土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课题背景尿素的利用尿素是种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。细菌利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶脲酶常见的分解尿素的微生物芽孢杆菌小球菌假单胞杆菌克氏杆菌棒状杆菌梭状芽孢杆菌，些真菌和放线菌也能分解尿素。课题目的从土壤中分离出能够分解尿素的细菌统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌.研究思路㈠.筛选菌株㈡.统计菌落数目.设置对照实例寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。因为热泉温度，淘汰了绝大多数微生物只有细菌被筛选出来。多聚酶链式反应是种在体外将少量大量复制的技术，此项技术要求使用耐高温的聚合酶。.筛选菌株原因启示要分离种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养生理生长条件等配置合适的培养基方法抑制大多数微生物生长造成有利于该菌生长的环境，结果培养定时间后，该菌数量上升，再通过稀释涂布平板法等方法的温度下培养。观察在菌落计数时，每隔统计次菌落数目。原因不同种类的微生物，往往需不同的培养温度和培养时间，每隔统计次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。.以“稳定菌落”为观察对象。原因不同种类的细菌形成的菌落，在大小形状光泽度颜色硬度透明度等方面具有度的特征，菌落特征可作为菌种鉴定的重要依据。微生物的培养与观察筛选后必鉴定鉴别培养基鉴别培养基不影响微生物的生存根据微生物的代谢特点，在培养基中加入种指示剂或化学药品，用于鉴别不同种类的微生物，如加入伊红美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否大肠杆菌如有，菌落呈深色，并带有金属光泽酚红培养基鉴定分解尿素的细菌。原理脲酶催化尿素分解成氨培养基碱性增强酚红变红脲酶阳性培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏培养基的菌落数目明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出些菌落。二样品的稀释操作是否成功如果得到了个或个以上处中分布着绝大多数的细菌。取样要求铲去表层土。注意无菌操作取土样用的小铁铲和盛土样的信封等用具在使用前都要灭菌。应在火焰旁称取土壤。并在火焰附近将土样到入锥形瓶并塞好棉塞。二.实验的具体操作㈡.制备培养基制备以尿素为唯氮源的选择培养基。三样品的稀释注意灭菌应在火焰旁称取土壤。在稀释土壤溶液的过程中，每步都要在火焰旁进行测细菌数般用稀释液测放线菌般用稀释液测真菌数般用稀释液分离不同的微生物采用不同的稀释度原因不同微生物在土壤中含量不同目的保证获得菌落数在之间适于计数的平板㈣.取样涂布实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型培养时间稀释度培养物等。如果得到了个或个以上菌落数目在的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。㈤.微生物的培养与观察培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌培养放线菌培养霉菌