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年生产15000吨基因重组纤维素酶系列生产品项目建议书 年生产15000吨基因重组纤维素酶系列生产品项目建议书

格式:word 上传:2023-09-14 20:25:48

《年生产15000吨基因重组纤维素酶系列生产品项目建议书》修改意见稿

1、“.....此外,公司技术专 家有十年以上纤维素酶生产经验,已经掌握了成熟的纤维素酶生产工艺,因此,可以实现产业化生产。 公司专家已经设计了纤维素酶系列产品生产线,主体设备及内部构件和管路连接已经完成。配套设备及 装饰工程完工后即可投入生产。 必要的说明。纤维素酶工程菌株的构建采用的是国际前沿的生物工程技术及基因打靶技术,但是,酶制剂生 产工艺是公知技术。此外,生产过程的发酵条件优于实验室条件,因此,只要中试设定条件与生产工艺条件致,那 么,所生产出来的产品性能将优于中试。 技术或工艺特点以及与现有技术或工艺比较所具有的优势 技术原理 纤维素酶 自然界中纤维素的降解需要内切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶共同作用。纤维素降解过程首先被外切纤维素酶的 吸附到不溶性纤维素表面,使结晶结构的纤维素长分子链开裂,聚集结构解聚,长链分子末端部分发生游离从而为纤维素水解酶类的作用提高了可及性和反应性......”

2、“.....分解 其,键,产生纤维二糖三糖等短链低聚糖。在内切葡聚糖酶外切葡聚糖酶和,葡萄糖苷酶的协同作 用下,纤维素的,糖苷键逐步水解,形成纤维寡糖和葡萄糖。其催化机理与溶菌酶相似,糖苷配基的脱去涉及 个保守羧基氨基酸分别作为质子供体和亲核试剂执行酸碱催化的双置换反应谷氨酸位于细菌和真菌,及葡 萄糖苷酶的活性位点。协同作用其作用顺序不是绝对按各酶的功能也不是简单固定的。和都能引起纤维素的分 散和脱纤化,因此纤维素的结晶结构被打乱导致变形,使纤维素酶能深入纤维素分子界面之间,从而使纤维素孔壁 腔壁和微裂隙壁的压力增大,水分子的介入又使纤维素分子之间的氢键被破坏,产生部分可溶性的纤维的微结晶,利 于进步降解。 基因的同源重组技术 基因的同源重组技术,又称基因打靶,指外源与受体细胞 染色体上的同源序列之间发生重组并整合在预定位点上,从而改变细胞遗传特性的方法......”

3、“.....靶基因原有结构被破坏,此即为基因破坏或剔除 靶基因的显性标记。 培养基及培养条件麦芽汁液体培养基培养。 试剂购自公司,购自上海生工公司, 限制性内切酶购自公司。 真菌总的提取 离心收集菌体,加入提取液 充分振荡后加入及氯化苄振荡混匀,保温,每隔振荡次 加入醋酸钠,离心,收集上清,用异丙醇沉淀得到总。 扩增序列 根据已知绿色木霉序列,设计引物,由上海生工公司合成 扩增用标准反应体系进行反应。 循环条件预变性,变性,复性,延伸,个循环后再延伸。 重组质粒载体的构建 用试剂盒从胶中回收产物,得到约的片段,将其用酶补平后回收 纯化。 将质粒载体在多克隆位点用限制性内切酶消化,产生的粘性突出末端用酶补平并将其 回收纯化,将上述两个片段以合适的比例建立反应体系,转化大肠杆菌,获得重组质粒载体。对筛选到 的重组质粒用内切酶和进行鉴定分析......”

4、“..... 重组质粒载体的构建 将质粒载体在用限制性内切酶消化,产生的粘性突出末端用酶补平并将其回收纯化,与片段以合适的比例建立反应体系,转化大肠杆菌,获得具有启动子的重组质粒载体。 重组质粒的转化及重组菌的筛选 将构建的重组质粒电转化宿主菌,利用显性标记进行初筛而后进步采用液体摇瓶培养检测发 酵液复筛,获得株表达量较高的重组菌,命名为。 液体培养基深层发酵 在的通气机械搅拌发酵罐中,接种量为,发酵过程采取分段控制值温度和溶解氧的工艺,发酵 左右酶活力最高,实验室样品酶活力达到液体。 技术的先进性 蛋白质基因同源重组技术是国家计划项目,计划项目在技术上均为国际领先或先进技术。基因重组纤维 素酶菌株构建是计划蛋白质基因重组技术的延续。本项目采用的基因打靶技术是国际先进技术,纤维素酶的技术 指标中热稳定性高于国外同类产品水平......”

5、“.....所生产的纤维素酶在技术及其它方面具有以下优势 产品技术性能优势 第高活力。诺威信公司的同类产品酶活为,该公司产品的发酵液活力可达 第二热稳定性。美国杰能克公司产品的热稳定性在以下,该公司产品的热稳定性可达。 生产成本优势 据了解,国外厂家万活力纤维素酶生产成本在元吨以上,该公司的生产成本可控制在元吨以 下。 价格优势 国外同类产品市场售价为万元吨,可研及本报告中该公司产品出厂价为液态酶万元吨,固态酶 万元吨。 该重大关键技术的突破对行业技术进步的重要意义和作用 提高酶制剂行业整体水平。该项目是我国第个采用有自主知识产权的基因重组工程菌株进行产业化生产 的项目,对提升我国酶制剂行业总体水平,提高我国酶制剂行业和国外企业的竞争能力具有积极的意义。 基因重组纤维素酶菌株构建技术的成熟将对耐高温糖化酶菌株构建及其它酶制剂的基因重组具有借鉴意 义......”

6、“..... 三项目建设方案 建设规模 根据吉林市的资源状况自然环境和市场调查情况,结合生产实际情况建厂条件资金情况原辅材料供应等 各种因素,该项目纤维素酶生产规模确定为年产吨......”

7、“.....食品级工业级食品级工业级 铅, 砷, 菌落总数, 大肠菌群, 沙门氏菌样不得检出不得检出 食品级产品也可用作饲料添加剂用作饲料添加剂的纤维素酶制剂还应符合其他相关标准 法规的要求 工业级产品不得用于食品工业及饲料添加剂食用酒精和蒸馏酒类除外 可根据需要任意标注种酶活 采用的工艺技术路线与技术特点 工艺流程简图 种子制备级种子培养二级种子培养 原料处理发酵过滤浓缩配制包装入库 气流干燥 喷雾造粒 流化床干燥 粉碎 混粉包装入库 生产工艺过程简述由菌种室通过摇瓶机培养出合格种子......”

8、“.....发酵结束后, 将发酵液放入后处理车间回收。 液体产品 发酵液经板框过滤后的滤液进行浓缩至合格后,加入防腐剂进入贮罐冷藏,出厂前检测酶活,合格后包装出厂。 固体产品 种是发酵液经板框过滤后,滤饼用气流和流化床两步干燥后至水分合格,经粉碎后,进行混粉至合格酶活后包 装入库另种是发酵液直接经喷雾干燥造粒至合格水分和颗粒度,然后混合至合格后包装入库。 设备选型 主要设备选型是在研究和初步确定技术方案的基础上,对所需要的主要设备辅助设备之间的能力设备配套的 可靠性设备成熟性保证产品质量等诸多因素进行比选,最终采用招标的形式购置......”

9、“.....市场这只看不见的手使传统的工业文明达到了鼎盛时期。工业化在创造传统工业文明的 同时,也对现代经济社会发展的生态基础造成了根本性的破坏,资源环境和生态危机日益严重,其直接原因是 世纪以来造与自然尖锐对立的非持续的工业生产技术,其本质在于单纯的市场调节已无力减少技术发展的边际外 部费用递增趋势。 生物技术革命将促使有害生态环境的技术向无害化并能保护生态环境的方向发展,从而引起了社会生产技术体系 的变化和飞跃。生物技术创新及其产业化,将为人类社会创造新的更高水平的文明开辟了广阔的空间。运用生物工 程技术,将使经济发展投入的资源少,利用率高,产出的产品或服务多,废弃物少,因此,人类将对生物工程技术产 品的需求也将不断增加......”

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