1、文献综述蛋白概述蛋白蛋白活性调控及其辅助调控因子信号通路基本功能染色体浓缩调节因子结构域功能参与调控核质运输参与有丝分裂期纺锤体的组装参与调控细胞周期和核膜重建防止多重复制动态的与染色质结合调节纺锤体组装检验点调控核膜重建嗜热四膜虫概述本课题的研究意义第二章嗜热四膜虫中基因的生物信息学分析材料菌株与质粒主要试剂主要试剂配制主要实验仪器实验所用引物万方数据方法嗜热四膜虫细胞的培养和饥饿嗜热四膜虫的交配嗜热四膜虫的提取嗜热四膜虫的合成嗜热四膜虫基因的实时荧光定量分析嗜热四膜虫基因的克隆蛋白序列聚类分析及表达特性结果基因序列的扩增基因的表达谱分析蛋白序列分析和聚类分析讨论第三章嗜热四膜虫中细胞定位分析材料菌株和质粒试剂与工具酶实验所需引物主要实验仪器主要试剂配制方法四膜虫细胞培养过表达载体的构建嗜热四膜虫重组载体的构建嗜热四膜虫细胞基因枪转化阳性克隆的筛选嗜热四膜虫的快速提取和鉴定免疫荧光定位分析结果万方数据内源性表达融合载体的构建及重组鉴定在四膜虫不同细胞周期中的定位模式讨论第四章嗜热四膜虫中异常表达都导致异常细胞核分裂材料质粒和菌株试剂与工具酶实验所需引物主要实验仪器主要试剂配制方法嗜热四膜虫细胞的培养嗜热四膜虫过表达载体的构建嗜热四膜虫敲除载体的构建嗜热四膜虫细胞转化阳性克隆的筛选染色细胞核结果过表达载体的构建及重组鉴定基因在不同浓度诱导下转录水平测定过表达影响细胞核分裂载体的构建及重组鉴定敲减基因转录水平测定敲减引起小核异常分裂讨论参考文献总结与展望万方数据攻读学位期间取得的研究成果致谢个人简况及联系方式承诺书学位论文使用授权声明万方数据万方数据万方数据。
2、是否依赖于的分布，。随后有研究表明爪蟾提取物中添加，外源的或，会克服抑制囊泡融合，表明依赖于的产生是必须的，。在核膜重建的过程中，需要的调节。此外还控制着细胞核的过程在细胞周期中，在分裂间期，促进的两种结合态的转变进而促进核质运输在分裂期，与染色质紧密的结合并产生高浓度的，促进微管稳定的组装，在分裂末期，调节转变为，促进细胞核膜的重建图。万方数据第章文献综述图及其辅助因子调控细胞周期和核膜重建防止多重复制蛋白调控的复制是多方面的，方面是对复制起始的调控，另方面是对复制终止的调控。复制起始时，需要酶的活性图。复制起始时，会与微小染色体维持蛋白结合，使将要进行复制的获得执照，开始的复制，当复制完成之后，会从上分离下来，复制完成。若加入蛋白的突变体，复制被中断，。为了防止和的再次结合，作用下促使的生成，生成的与形成复合体，防止期的多重复制。图及其辅助因子调控纺锤体组装万方数据嗜热四膜虫中染色体浓缩调节因子的鉴定及功能分析动态的与染色质结合爪蟾提取物中微管动态的变化以及纺锤体的组装依赖于的浓度。的产生是由与染色质相关联的产生。在爪蟾卵提取物中发现与染色质结合量会随着细胞周期的变化而变化。尤其是在核膜破裂后和分裂中期的表达水平会上升，但是当核膜重新形成之后，的表达水平会恢复到基本水平。研究表明与染色质结合是个动态变化的过程，并且随着细胞周期的变化而变化图。图表达随周期变化调节纺锤体组装检验点细胞周期中的检验点可以阻止后期促进复合物的活性，当所有的染色体被附着并在有丝分裂时期排列时，检验点关闭，。运用爪蟾卵提取物这个很好的检验点控制模型，发现与染色质相互作用的的表达量。
3、使细胞增殖速度变慢，但至今还没有发现关于嗜热四膜虫中蛋白的相关研究。本研究首次从嗜热四膜虫大核基因组中鉴定出个新的基因，并在生物信息学水平和细胞分子水平进行了分析，研究结果如下生物信息学分析通过同源序列比对，我们从四膜虫基因组数据库鉴定了人的同源物基因，该基因全长，开放阅读框，预测编码个氨基酸。对其氨基酸序列分析发现含有个结构域，将其编码基因命名为四膜虫。检测的转录水平，发现在嗜热四膜虫不同细胞周期中都有表达，并在有性生殖时期表达水平达到最高。本研究结果与四膜虫功能基因组文献综述第章文献综述蛋白概述蛋白蛋白是种含量丰富的酶蛋白。蛋白在真核生物中高度保守，并且在细胞核质运输有丝分裂纺锤体的组装和核膜重建，等方面发挥着重要的功能。像其他酶蛋白，蛋白在和两种结合态的构象之间变化并且与许多调控因子和辅助因子相互作用，进而调控细胞的核结构和功能，。在多种细胞中，蛋白与相互作用，形成网络信号通路，共同调控细胞的生命活动。蛋白活性调控及其辅助调控因子信号通路中，存在和两种结合状态，在其发挥生物学功能时，主要有两类辅助调控因子鸟嘌呤核苷酸交换因子，快速促进鸟嘌呤核苷酸交换和促使转化为的功能，主要分布在细胞核中的酶促进因子，是种酶激活蛋白，可以促进酶活性并且提高水解效率，是种结合蛋白，与共同水解。和主要分布在细胞质中，。细胞核内的蛋白在的作用下，由结合态转变结合态通过核孔复合体进入到细胞质中，在和结合的催化下，的酶活性激活，水解为。在的不断循坏转换中，导致细胞核中高浓度的和细胞质中高浓度的，使细胞核质内外形成的浓度梯度差是蛋白调控细胞核质运输的必须条件图。图酶活性的调控万方。
4、升高，并且随着周期蛋白的损伤而发生动态变化，适度的添加外源的蛋白可取消有丝分裂检验点的阻止图。爪蟾中纺锤体组装的检验点主要特征是活性的减少，在爪蟾提取物中的增加激活检验点修复了的活性。可以调节检验点的阻止，使得减数分裂被阻止从而进入有丝分裂期。与染色质紧密的结合在起，它会通过干扰着丝粒以种非特异性的方式中断纺锤体的检验点。万方数据届硕士学位论文嗜热四膜虫中染色体浓缩调节因子的鉴定及功能分析作者姓名段文靖指导教师王伟教授学科专业水生生物学研究方向细胞分子生物学培养单位生命科学学院学习年限年月至年月二〇四年六月万方数据山西大学届硕士学位论文嗜热四膜虫中染色体浓缩调节因子的鉴定及功能分析作者姓名段文靖指导教师王伟教授学科专业水生生物学研究方向细胞分子生物学培养单位生命科学学院学习年限年月至年月二〇四年六月万方数据，万方数据承诺书承诺书本人郑重声明所呈交的学位论文，是在导师指导下独立完成的，学位论文的知识产权属于山西大学。如果今后以其他单位名义发表与在读期间学位论文相关的内容，将承担法律责任。除文中已经注明引用的文献资料外，本学位论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写过的成果。作者签名年月日万方数据学位论文使用授权声明学位论文使用授权声明本人完全了解山西大学有关保留使用学位论文的规定，即学校有权保留并向国家有关机关或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印缩印或扫描等手段保存汇编学位论文。同意山西大学可以用不同方式在不同媒体上发表传播论文的全部或部分内容。保密的学位论文在解密后遵守此协议。作者签名导师签名年月日万方数据目录中文摘要第章。
5、段构成了结构域图。结构域形成七面螺旋桨结构，面与蛋白相互作用，促进的获得，另面与组蛋白和结合，含有结构域的蛋白在原生生物植物动物单细胞真核生物中都有广泛分布。会形成折叠随着端的延伸，并且端的甲基化进步调节和核小体的结合，而它的磷酸化修饰影响了和染色质的相互作用。哺乳动物细胞中的的端包含有定位信号，由于的存在，使得主要定位于细胞核中。图的结构域预测万方数据第章文献综述功能参与调控核质运输大分子蛋白的核质间运输需要蛋白所介导。和的不断循环和相互转化，使得细胞核质内外形成浓度梯度差，从而介导核质运输。细胞核中，鸟嘌呤核苷酸快速的交换会产生高浓度的浓度梯度差在结合染色质的作用下，会竞争性的与结合，从而引起输入复合体的解离，输入复合体是由包含有赖氨酸核定位信号的蛋白输入受体和组成，通过将入核蛋白运输到细胞核中相反的输出受体和包含亮氨酸核输出信号蛋白构成三元复合体，通过将出核蛋白运输到细胞质中，如此形成个的循坏通路图。图调控核质运输参与有丝分裂期纺锤体的组装有丝分裂期纺锤体的组装主要受浓度梯度的调控。爪蟾提取物中研究表明当浓度处于个低浓度的状态时，纺锤体的组装会受到严重损伤，合成的微管会发生紊乱。在纺锤体组装过程中，与染色质相结合，产生的浓度促进微管稳定的组装。哺乳动物细胞中也已经证实染色体周围存在着高浓度的。在染色体附近，产生的高浓度的，扰乱了抑制万方数据嗜热四膜虫中染色体浓缩调节因子的鉴定及功能分析复合体，并且激活了纺锤体组装因子的活性，从而促进纺锤体的组装图。图调控纺锤体组装参与调控细胞周期和核膜重建蛋白对细胞的核膜重建起着重要的调控作用，但是并不清楚其发挥功能。
6、的调控下进行和两种结合态之间不断循环转变，表现出功能的多样性。染色体浓缩调节因子是唯已知的的鸟嘌呤核苷酸交换因子，含有保守的结构域，与蛋白结合，促进转变为结合态，从而促进核质运输，同时在染色体端粒沉默细胞周期的调控和微管的组装发挥重要功能。嗜热四膜虫是种营自由生活的淡水单细胞原生生物，具有核的二态性，即含有多倍体的体细胞大核和二倍体生殖小核。生殖方式主要有无性生殖和有性生殖两种方式。无性生殖时期，大核无丝分裂而小核进行有丝分裂有性生殖时期，小核进行减数分裂和有丝分裂后进行核的交换进而形成合子核，产生新的大核和小核而旧大核降解。嗜热四膜虫细胞中核结构精细动态的变化使其成为研究细胞核结构和发育的良好模式生物。本课题组先前研究表明嗜热四膜虫中和蛋白调控了大核的无丝分裂，它们的异常表达会使细胞增殖速度变慢，但至今还没有发现关于嗜热四膜虫中蛋白的相关研究。本研究首次从嗜热四膜虫大核基因组中鉴定出个新的基因，并在生物信息学水平和细胞分子水平进行了分析，研究结果如下生物信息学分析通过同源序列比对，我们从四膜虫基因组数据库鉴定了人的同源物基因，该基因全长，开放阅读框，预测编码个氨基酸。对其氨基酸序列分析发现含有个结构域，将其编码基因命名为四膜虫。检测的转录水平，发现在嗜热四膜虫不同细胞周期中都有表达，并在有性生殖时期表达水平达到最高。本研究结果与四膜虫功能基因组文献综述第章文献综述蛋白概述蛋白蛋白是种含量丰富的酶蛋白。蛋白在真核生物中高度保守，并且在细胞核质运输有丝分裂纺锤体的组装和核膜重建，等方面发挥着重要的功能。像其他酶蛋白，蛋白在和两种结合态的构象之间变化并且与许多。
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