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ppt 细胞培养的基本技术(黄建华) ㊣ 精品文档 值得下载

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《细胞培养的基本技术(黄建华)》修改意见稿

1、以下这些语句存在若干问题,包括语法错误、标点使用不当、语句不通畅及信息不完整——“.....大部分细胞常能在短时间内大约完成附着过程但不定完全伸展而上皮细胞大部分细胞在短时间内不能附着或附着不稳定,稍加振荡即浮起,这样可以利用此差别来纯化细胞克隆法将细胞分成单个细胞,使之分别生长成克隆,然后对每克隆进行测试,选择出所需要的克隆。培养基限定方法些细胞在生长过程中必须存在或必须去除种物质,否则将无法生长。而其它细胞与之相反,可以利用这种技术来纯化细胞。如杂交瘤技术常用的培养液,就用来筛选杂交瘤细胞而抑制其它细胞。细胞的冻存冻存细胞要缓慢冷冻。减少细胞内冰晶的形成是减少细胞损伤的关键。冷冻保护剂的使用,可使细胞免受冰晶形成和渗透压改变而致的损伤。常用二甲基亚砜和甘油。冻存细胞最好每三个月复苏次,检测细胞原特性是否改变。细胞冻存步骤取生长对数期的细胞消化成细胞悬离心细胞记数冻存液加含冻存液熔封置度数小时......”

2、以下这些语句存在多处问题,具体涉及到语法误用、标点符号运用不当、句子表达不流畅以及信息表述不全面——“.....模拟体内生理环境,在无菌适当温度和定营养条件下,使之生存生长并维持其结构和功能的方法。细胞组织,包括器官培养终归是离体培养,缺少生物整体的严密联系,不能代表整个机体。在进行医学生物实验过程及对结果的评估是都必须考虑这些。基本操作技术和要求由于体外培养的细胞没有抗感染能力,因此防污染是决定培养成功的首要条件。切操作需要保证无菌和有条不紊。培养室内的无菌技术培养前的准备按实验计划和程序准备物品,作到心中有数培养室和超净台定期全面彻底消毒培养用品的无菌处理高压灭菌过滤酒精消毒实验中无菌培养操作均在火焰近处进行,实验用品需火焰灭菌,冷却后接触培养细胞,以防烧死细胞。培养细胞的取材基本要求取材组织用培养液浸泡,度运送,内尽快培养。取材无菌操作,避免对组织的机械损伤,尽量去除脂肪神经结缔坏死组织,污染组织可用青链霉素和制霉菌素漂洗。原代取材同时保留组织学和电镜标本,对供体来源部位及般情况做记录。皮肤和粘膜的取材皮肤和粘膜是上皮细胞培养的重要来源......”

3、以下这些语句在语言表达上出现了多方面的问题,包括语法错误、标点符号使用不规范、句子结构不够流畅,以及内容阐述不够详尽和全面——“.....可将组织可放入小盖玻片上后再放进培养瓶培养。换液需轻巧,以免组织块漂起,细胞死亡消化培养法采用前述的组织消化分散法。将妨碍细胞生长的细胞间质去除,使细胞分散,形成悬液,按不同浓度接种培养瓶培养。传代培养和细胞系的维持培养细胞增殖长满瓶壁时,既达到所谓的饱和密度。此时正常细胞则不再生长恶性细胞重叠生长,易于从瓶壁上成片脱落为此传代势在必行。培养细胞的生长过程原代初代培养期从机体取下组织培养到第次传代,此代细胞保持异质性,细胞种类较多,接近原组织细胞种类。维持时间,因细胞种类不同,般周。传代期培养初代培养的细胞生长到定程度,即可连接传代,使其连续生长。般正常二倍体细胞,不加附加条件,可传代代,此时可发生染色体丢失突变细胞增殖变慢停止分裂,进入衰退期,我们称之有限细胞系。这转折点有人称之危象临界点有些细胞的少数后代,或通过人工条件转化的细胞可通过这期,获得持久的增殖传代能力,我们称细胞系,或无限细胞系,即般通称的细胞系。衰退期传代细胞到达定代数,即发生增殖缓慢......”

4、以下这些语句该文档存在较明显的语言表达瑕疵,包括语法错误、标点符号使用不规范,句子结构不够顺畅,以及信息传达不充分,需要综合性的修订与完善——“.....生物学特性,培养液要求传代换液时间和规律,细胞的遗传学标志,生长形态,常规病理染色的标本等。细胞系的维持防细胞之间的交叉污染,传代时所用器械要编号或做好标记每种细胞系都应有充足的冻存储备,以防绝种另外二倍体细胞等有限细胞系如果暂时不用最好冻存以免传代太多,造成细胞衰老或发生改变培养细胞的纯化自然纯化自然纯化即利用种类细胞的增殖优势,而排除其它细胞生长,靠自然的增殖潜力最后留下生长优势细胞,去除其它细胞,达到细胞纯化的目的。人工纯化利用人为手段造成对细胞生长有利的环境条件,抑制其它细胞的生长,从而达到纯化细胞的目的。酶消化法酶消化法由于上皮细胞和成纤维细胞对胰蛋白酶的耐受性不同成纤维细胞先脱壁,而上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁,利用这种差异采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开。机械划除法机械划除法上皮细胞和成纤维细胞多数都同时出现,混杂生长常常分区呈片,采用机械的方法去除不需要的细胞区域,而保留需要的细胞。反复贴壁法成纤维细胞和上皮细胞相比......”

5、以下这些语句存在多种问题,包括语法错误、不规范的标点符号使用、句子结构不够清晰流畅,以及信息传达不够完整详尽——“.....细胞交叉污染有效防止细胞交叉污染所有器具要严格区分不要触及培养液瓶瓶口细胞系都要在早期留有充足的冻存储备,可以复苏早期冻存细胞使用。流式细胞仪分离法流式细胞仪可根据细胞核酸含量些物质含量或细胞结构大小等参数来将细胞分离成不同的群体。第四章细胞培养的基本技术解放军总医院基础医学研究所免疫学研究室黄建华细胞培养技术平台基因治疗基因诊断试管婴儿组织工程药物筛选致病机理主要内容基本操作技术和要求原代培养传代培养和细胞系的维持细胞冻存与复苏细胞培养污染的检测和排除细胞是生命活动的基本单位年英国学者,用自制的显微镜观察软木的薄片,第次发现植物的细胞结构,并首次借用拉丁文小室词德国植物学家施莱登和动物学家施旺确立了“细胞学说”的基本原则。细胞是有机体,动植物都是由细胞发育来的每个细胞都作为个相对的单位,有自己的“生命”。新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生。进化论,遗传学和细胞学说定为现代生物学的三大基石,而细胞学说又是后二者的基石......”

6、以下这些语句存在多方面的问题亟需改进,具体而言:标点符号运用不当,句子结构条理性不足导致流畅度欠佳,存在语法误用情况,且在内容表述上缺乏完整性。——“.....即利用特殊容器内盛液氮或干冰冻存充液法选择生长状态良好的细胞。般以生长瓶底壁为宜,换新液,保留微量空气,拧紧瓶盖用棉花等做防震防压处理细胞培养污染的检测和排除培养细胞的污染概念包括所有混入培养环境中对细胞生存生存有害的成份和造成细胞不纯的异物真菌细菌病毒和支原体化学物质及细胞微生物污染的途径空气般培养室环境中每立方米含菌数不应超过个器材温箱操作血清组织样本微生物污染的检测真菌污染细菌污染支原体污染可做如下检测相差显微镜检测荧光染色法电镜检查分子杂交或支原体培养等方法微生物污染的防治防止的关键在于严格无菌操作,把好每个关口,尽可能禁止其它污染的物品进入培养操作环节微生物污染的防治抗生素般用常用量的倍作冲击疗法。用药后,再换常规培养液。加温处理根据支原体对热敏感的特点,将受支原体污染的细胞放置在作用,最长不超过,以杀灭支原体。动物体内接种将支原体污染的细胞接种在同种动物的皮下或腹腔,借动物体内的免疫系统消灭支原体。待定时间后取出细胞......”

7、以下这些语句存在标点错误、句法不清、语法失误和内容缺失等问题,需改进——“.....但其增加速度在减慢,直至细胞数量不再增加,处于平衡状态。原代细数量不再增加,处于平衡状态。原代细胞培养的传代细胞由培养瓶内分离再培养称之为传代,进行次分离再培养称之为传代。原代培养的首次传代是建系的关键时期,细胞需覆盖大部分瓶底后再传代。首次传代时细胞接种数量要多些,使细胞能尽快适应新环境而利于细胞生存和增殖。细胞传代方法贴壁生长的细胞用消化法传代部分贴壁生长的细胞用直接吹打即可传代悬浮生长的细胞采用离心分离后传代,贴壁细胞传代步骤吸除瓶内旧培养液加入消化液或室温消化分钟显微镜下进行观察,发现胞质回缩细胞间隙增大后直接加少许含血清的培养液,终止消化细胞脱离瓶壁后形成细胞悬液计数,分别接种在新的培养瓶内。悬浮细胞的传代直接传代即让悬浮细胞慢慢沉淀在瓶底后,将上清洗掉,然后用吸管吹打形成细胞悬液后,再传代。离心法离心除上清,加新的培养液,然后传代接种......”

8、以下文段存在较多缺陷,具体而言:语法误用情况较多,标点符号使用不规范,影响文本断句理解;句子结构与表达缺乏流畅性,阅读体验受影响——“.....进而发生衰退死亡,多数传代细胞或叫有限细胞系,不能通过所谓的“危象临界点,导致最终死亡,这现象可能说明生物学衰老的细胞学基础。人胚胎成纤维细胞可以进行代增殖,而岁老人的肺成纤维细胞仅传代了代后便死亡。表皮细胞寿命天红细胞周个月,白细胞天,神经细胞数年或更多。密度抑制或接触抑制年等学者提出的种现象,培养细胞再生长过程中多发生分裂增殖,细胞移动而相互靠近,这时些细胞可移向其他方向,保证细胞不会重叠,但接触,这种活动即可停止。所谓接触抑制实际使细胞汇合形成单层时,细胞变得拥挤,与培养液接触的表面区域也相应减少,营养成分消耗,其分裂也将停止。细胞生长曲线细胞数量生长天数缓慢生长期对数生长期平衡期迟缓期或延迟期当细胞接种到培养瓶后,细胞逐渐贴附于瓶底,并恢复贴壁形状,代谢开始旺盛,出现细胞分裂及增殖,但生长缓慢。对数生长期此期几乎所有的细胞都在进行分裂,细胞数目迅速增长。期细胞倍增时间等于细胞周期时间长度。这期常用细胞倍增时间及细胞分裂指数来判定......”

9、以下这些语句存在多方面瑕疵,具体表现在:语法结构错误频现,标点符号运用失当,句子表达欠流畅,以及信息阐述不够周全,影响了整体的可读性和准确性——“.....面积尽可能去除皮下和粘膜下组织。因分布在体表,故细菌霉菌很多,需严格消毒,可用较高浓度抗菌素漂洗。内脏和实体瘤的取材内脏除消化道和泌尿管道外基本是无菌的,明确取材部位,去除结缔组织。肿瘤组织取材避免坏死液化和结缔组织,标本应按污染组织处理。血细胞的取材血细胞培养可用于造血干细胞移植免疫活性细胞的治疗和染色体分析等。取血抗凝剂量过大易导致溶血,肝素常用浓度为,针管用较高浓度肝素湿润。组织材料的分离欲从组织中获得大量生长良好的细胞,须将组织分散开,使细胞解离出来。常用方法有机械法和化学法。细胞悬液的分离方法离心法血液和体液等细胞悬液转速分钟。离心速度过大时间过长,会造成细胞损伤和死亡。密度梯度离心法用离心法将细胞分到不同密度的梯度介质中,再分别吸出各层细胞。适于分离密度不等的的细胞。常用介质有泛影葡胺等机械分散法适于较柔软的组织,如脑肝脾淋巴结胸腺胚胎组织和肿瘤组织等。剪切组织为碎块后,置于组织匀浆研磨......”

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