1、酶活性测定的连续监测法和定时法的概念区别和结果的计算方法酶偶联反应的在酶活性测定和酶法分析代谢物中的应用以为指示系统和色素原底物在酶活性测定中的应用本章教学要求熟悉酶促反应进程酶促反应底物动力学酶学分析在临床诊断上的应用。了解值值的应用及和的测定同工酶测定和酶活性测定最适条件的选择。第节酶活性测定的基本知识酶活性的概念酶活性单位酶活性单位的计算酶促反应进程酶促反应底物动力学酶活性的概念酶活性即酶促反应速度，指在规定条件下单位时间内底物的减少量或产物的生成量。底物浓度为,产物浓度为,时间为，反应速度为或。注在实际测定酶促反应速度时，以测定单位时间内产物的生成量为好。二酶活性单位定义指在定条件下使酶促反应达到速度时所需要的酶量。酶活性单位是个人为规定的标准。惯用单位酶活性测定方法的建立者所规定的单位。国际单位指在规定条件最适，最适底物浓度下，每分钟转化底物的酶量。单位为。单位指在规定条件下，每秒钟转化底物的酶量。三酶活性单位的计算步骤运用公式进行计算。明确测定方法的酶单位定义，按照酶单位定义确定物质量体积和时间的单位，计算公式产物的增加量每单位规定的保温时间酶单位升每单位规定的产物增加量实际保温时间实际标本用量分光光度法测定的公式测定对照总每单位规定的保温时间酶单位升标实际保温时间四酶促反应进程酶促反应进程曲线酶量的测定通过酶活性测定间接测得酶的含量，因此，要准确测定酶量，应使酶浓度与酶促反应速度成正比，即∝或∝。能够真正代表酶活性大小的是线性期的酶促反应速度，即酶促反应初速度。酶活性测定时首先要确定线性期，在此期测定反应速度才能准确代表酶活性。酶的含量酶活性酶促反应初速度五酶促反应底物动力学中间产物学说酶促反应进行时，酶首先与底。
2、成浪费。三的应用定义指酶完全被底物分子饱和时的反应速度。应用可用来计算酶的转化率，即单位时间内每分子酶可使底物发生化学反应的分子数，单位为分子数秒。当反应速度达到最大反应速度时，如果已知酶量，则可计算出酶的转化率底物转化量酶量四和的测定作图法,又称为双倒数作图法作图法又称为直线线性作图法。第二节酶活性测定方法及酶学分析的类型酶活性的测定方法工具酶酶偶联确测定的酶促反应。式中为底物，为中间产物，为产物必须能够直接测定，为待测酶，都为工具酶。按照工具酶作用的不同，又称为辅助酶，又称为指示酶，称为指示反应。酶偶联反应的原理在应用酶偶联法测定时，关键在于确定恒态期，因为只有恒态期才能代表酶活性。如酶促反应底物动力学所述，恒态期可以通过测定指示酶的和等动力学因数加以计算确定。二常用指示酶及其指示反应脱氢酶用作工具酶的脱氢酶都是以为辅酶的脱氢酶，例如等，它们催化下列反应可对在紫外吸收或紫外激发荧光进行测定应用等酶活性测定。过氧化物酶可催化过氧化氢与些色原反应，例如与氨基安替比林和酚反应，将其氧化为有色物质，反应如下酚醌亚胺红色反应应用甘油氧化酶尿酸酶属于氧化酶类等都可以将各自的底物氧化为过氧化氢，因此都可以与偶联，通过反应加以测定。四底物浓度测定利用酶催化反应的高效率和专性，可以测定底物浓度。与酶活性测定类似。第三节同工酶测定同工酶的定义同工酶产生的机理同工酶的测定方法同工酶的定义是催化功能相同，但是分子组成及理化性质不同的组酶，是在同种属中由不同基因位点或等位基因编码的多肽链单体纯聚体或杂多体。同工酶产生的机理由不同基因位点编码二由等位基因编码三由多肽链化学修饰产生二同工酶的测定方法按照理化性质不同进行分离鉴定电泳法同工酶氨基酸组成不同，等电点不。
3、移酶心肝骨骼肌肌酸激酶骨骼肌心脑乳酸脱氢酶心肾骨骼肌肝肺碱性磷酸酶小肠胎盘酶的定义是催化功能相同，但是分子组成及理化性质不同的组酶，是在同种属中由不同基因位点或等位基因编码的多肽链单体纯聚体或杂多体。同工酶产生的机理由不同基因位点编码二由等位基因编码三偶联，通过反应加以测定。四底物浓度测定利用酶催化反应的高效率和专性，可以测定底物浓度。与酶活性测定类似。第三节同工酶测定同工酶的定义同工酶产生的机理同工酶的测定方法同工为有色物质，反应如下酚醌亚胺红色反应应用甘油氧化酶尿酸酶属于氧化酶类等都可以将各自的底物氧化为过氧化氢，因此都可以与可对在紫外吸收或紫外激发荧光进行测定应用等酶活性测定。过氧化物酶可催化过氧化氢与些色原反应，例如与氨基安替比林和酚反应，将其氧化学因数加以计算确定。二常用指示酶及其指示反应脱氢酶用作工具酶的脱氢酶都是以为辅酶的脱氢酶，例如等，它们催化下列反应又称为指示酶，称为指示反应。酶偶联反应的原理在应用酶偶联法测定时，关键在于确定恒态期，因为只有恒态期才能代表酶活性。如酶促反应底物动力学所述，恒态期可以通过测定指示酶的和等动力定方法工具酶酶偶联确测定的酶促反应。式中为底物，为中间产物，为产物必须能够直接测定，为待测酶，都为工具酶。按照工具酶作用的不同，又称为辅助酶，图法作图法又称为直线线性作图法。第二节酶活性测定方法及酶学分析的类型酶活性的测分子数秒。当反应速度达到最大反应速度时，如果已知酶量，则可计算出酶的转化率底物转化量酶量四和的测定作图法,又称为双倒数作使底物浓度过高而造成浪费。三的应用定义指酶完全被底物分子饱和时的反应速度。应用可用来计算酶的转化率，即单位时间内每分子酶可使底物发生化学反应的分子数，单位为反应速度的。
4、，电泳迁移率也就不同，据此可用电泳法分离鉴定。层析法根据同工酶分子荷电量不同，可用离子交换层析法加以分离。二按照底物专性不同进行鉴定同工酶底物专性不同，值也不同。如果同工酶之间的值差别足够大，可以通过测定其值加以鉴定。三按照最适不同进行鉴定同工酶分子氨基酸组成不同，最适也不同。如果同工酶最适之间的差别足够大，可以通过调节缓冲溶液的值加以鉴定。四按照免疫学特性不同进行分离鉴定五按照耐热程度不同进行鉴定六选择性抑制法第四节酶学分析在临床诊断上的应用血浆酶的来源酶的区域化分布酶活性测定在临床诊断中的应用同工酶的诊断价值血浆酶的来源血浆酶血浆特异酶非血浆特异酶外分泌酶细胞内酶二酶的区域化分布表诊断常用血清酶的来源血清酶符号来源鸟氨酸氨基甲酰转移酶肝卵磷脂胆固醇酰基转移酶肝谷氨酸脱氢酶肝山梨醇脱氢酶肝丙氨酸氨基转移酶肝肾心异柠檬酸脱氢酶肝胎盘心谷氨酰转肽酶肝胆肾小肠ˊ核苷酸酶ˊ肝胆道单胺氧化酶肝肾脑天门冬氨酸氨基转移酶心肝骨骼肌肌酸激酶骨骼肌心脑乳酸脱氢酶心肾骨骼肌肝肺碱性磷酸酶小肠胎盘肝肾酸性磷酸酶前列腺红细胞血小板淀粉酶胰唾液腺脂肪酶胰三酶活性测定在临床诊断中的应用在肝脏疾病诊断中的应用二在急性心肌梗死诊断中的应用三在急性胰腺炎诊断中的应用四在骨骼疾病诊断中的应用五在肌肉疾病诊断中的应用六在前列腺疾病诊断中的应用七在肿瘤诊断中的应用四同工酶的诊断价值第五节酶活性测定最适条件的选择标本二测定条件底物浓度酶浓度温度酸碱度辅助因子激活剂和抑制剂本章内容概要第节酶活性测定的基本知识第二节酶活性测定方法及酶学分析的类型第三节同工酶测定第四节酶学分析在临床诊断上的应用第五节酶活性测定最适条件的选择掌握酶活性的国际单位定义，酶活性浓度的表示方法及酶活性单位的计算公式。
5、度。值是酶的特征常数，具有重要的应用价值。二值的应用鉴定酶的种类值是酶的特征常数，在上式中代表反应速度，代表最大反应速度，代表底物浓度，称为米氏常数。米氏常数的定义由米曼氏方程可以导出速度才能准确代表酶活性。酶的含量酶活性酶促反应初速度五酶促反应底物动力学中间产物学说酶促反应进行时，酶首先与底物结合为中间产物，然后再催化底物反应生成产物。米曼氏方程速度才能准确代表酶活性。酶的含量酶活性酶促反应初速度五酶促反应底物动力学中间产物学说酶促反应进行时，酶首先与底物结合为中间产物，然后再催化底物反应生成产物。米曼氏方程上式中代表反应速度，代表最大反应速度，代表底物浓度，称为米氏常数。米氏常数的定义由米曼氏方程可以导出当时，。因此值为反应速度相当于最大反应速度半时的底物浓度。值是酶的特征常数，具有重要的应用价值。二值的应用鉴定酶的种类值是酶的特征常数，在反应条件定时，只与酶的种类和底物的性质有关，与酶的浓度无关。不同种类的酶其值不同，对于种未知的酶，可在规定的条件下测定其值加以鉴定。表些酶的值酶底物乳酸脱氢酶丙酮酸己糖激酶葡萄糖果糖半乳糖苷酶乳糖碳酸酐酶过氧化氢酶蔗糖酶蔗糖糜蛋白酶甘氨酰酪氨酰甘氨酸反映酶与底物的亲合力值越大，酶与底物亲合力越小，值越小，酶与底物亲合力越大。选择酶的最适底物值取决于酶的种类和底物的性质，在酶定时，不同底物有不同的值。酶活力测定时，应优先选择酶的最适底物，使酶促反应容易进行，并节省底物用量。计算不同底物浓度时酶促反应速度相当于最大反应速度的比率根据米曼氏方程可以计算设计适宜的底物浓度酶促反应进程曲线表明，只有初速度才能真正代表酶活性，般要求初速度达到最大速度的底物消耗率为。这样既可以近似地表示酶活性，又不致于使底物浓度过高而造。
6、交换层析法加以分离。二按照底物专性不同进行鉴定同工酶底物专性不同，值也不同。如果同工酶之间的值差别足够大，可以通过测定其值加以鉴定。三按照最适不同进行鉴定同工酶分子氨基酸组成不同，最适也不同。如果同工酶最适之间的差别足够大，可以通过调节缓冲溶液的值加以鉴定。四按照免疫学特性不同进行分离鉴定五按照耐热程度不同进行鉴定六选择性抑制法第四节酶学分析在临床诊断上的应用血浆酶的来源酶的区域化分布酶活性测定在临床诊断中的应用同工酶的诊断价值血浆酶的来源血浆酶血浆特异酶非血浆特异酶外分泌酶细胞内酶二酶的区域化分布表诊断常用血清酶的来源血清酶符号来源鸟氨酸氨基甲酰转移酶肝卵磷脂胆固醇酰基转移酶肝谷氨酸脱氢酶肝山梨醇脱氢酶肝丙氨酸氨基转移酶肝肾心异柠檬酸脱氢酶肝胎盘心谷氨酰转肽酶肝胆肾小肠ˊ核苷酸酶ˊ肝胆道单胺氧化酶肝肾脑天门冬氨酸氨基转移酶心肝骨骼肌肌酸激酶骨骼肌心脑乳酸脱氢酶心肾骨骼肌肝肺碱性磷酸酶小肠胎盘酶的定义是催化功能相同，但是分子组成及理化性质不同的组酶，是在同种属中由不同基因位点或等位基因编码的多肽链单体纯聚体或杂多体。同工酶产生的机理由不同基因位点编码二由等位基因编码三偶联，通过反应加以测定。四底物浓度测定利用酶催化反应的高效率和专性，可以测定底物浓度。与酶活性测定类似。第三节同工酶测定同工酶的定义同工酶产生的机理同工酶的测定方法同工为有色物质，反应如下酚醌亚胺红色反应应用甘油氧化酶尿酸酶属于氧化酶类等都可以将各自的底物氧化为过氧化氢，因此都可以与可对在紫外吸收或紫外激发荧光进行测定应用等酶活性测定。过氧化物酶可催化过氧化氢与些色原反应，例如与氨基安替比林和酚反应，将其氧化学因数加以计算确定。二常用指示酶及其指示反应脱氢酶用作工具酶的脱氢。
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