1、。 本项目建立的方法不产生非特异性扩增产物。 对病原菌目的基因的等温扩增过程在分钟内完成，显 色法检测扩增产物在分钟内完成，电泳法检测扩增产物在分钟内 完成。 四项目执行过程中各阶段目标 年度 第季度设计引物，引物合成，购买实验菌株和有关试剂，完 善实验条件。 第二季度样品采集，病原菌提取。 第三季度等温扩增反应体系优化，温育条件优化。 第四季度扩增反应产物检测方法的建立快速显色法电泳分 析法。 年度 第季度环介导等温扩增快速检测病原菌方法操作程序确定，多重等温扩增同时检测多种病原菌实验技术建立。 第二季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 的。
2、品开发和病 原菌检验人员人，培养硕士研究生人。 环境影响及效益。 本项目的研究和产品开发过程中不会使用有害物质，也不会过度 利用自然资源，因此不会对环境造成影响。 选题的必要性 项目所处技术领域产业政策 本项目属生物高技术领域，是国家重点支持的研究领域，项目主 要针对严重影响人类健康的主要病原菌的检测与诊断需要进行检测技 术的研究与试剂盒的开发，本项目的实施可产生具有自主知识产权的 科研成果。本项目技术含量高，市场竞争力强，项目完成后能够产生 较好的经济效益和社会效益，项目符合国家产业技术政策。 项目所处技术领域技术发展现状 目前的病原菌检测方法费时。
3、础，建立常见病原菌的环介导等温扩增和 多重环介导等温扩增快速检测技术。 常见病原菌的环介导等温扩增快速检测方法的灵敏度分析 将常见病原菌目标基因克隆至载体，转化后提取质粒， 倍比稀释成含目的基因拷贝数为，以其为模板 做环介导等温扩增反应，检测本方法的灵敏度。 常见病原菌的环介导等温扩增快速检测方法的特异性分析 分别以病原菌和非病原菌基因组为模板做环介导等温扩增反 应，检测本方法的特异性。常见病原菌的环介导等温扩增快速检测方法与国际标准方法 及常规扩增方法比较分析 以的两个外引物做常规扩增，并与的扩增结果进 行比较分析，进步判断技术的灵敏度特异性和稳定性。 常见病原。
4、费力准确性低，开发快速准确 低成本的检测技术和配套试剂是病原菌检测工作中亟待攻克的难题。 本项目针对病原菌检测中存在的问题，采用高灵敏度高特异性的环 介导等温扩增技术开发出简便快速经济的检测试剂。 项目技术先进性，对相关领域技术进步的推动作用 环介导等温扩增是利用个特殊设计的引物和具有链置换活性的 聚合酶，在恒温条件下异性试验反应条件优化阴性对照阳性对照 试剂盒 中试 同类产品比较试验国标法比较试验 方法应用于病原体检测 样品收集 核酸提取引物设计 基因序列分析本项目建立的方法对病原菌检测的准确率达到。 本项目建立的方法对病原菌目的基因检测的灵敏度达到 拷贝。
5、原菌的试剂盒包括单病原菌检测试剂盒 和多种病原菌同时检测试剂盒。 工艺流程 三项目技术质量指标 引物优化组合 反应体系的建立 灵敏度试验特异技术和配 套试剂盒。该检测方法简单快速便宜，不需要昂贵的仪器设备， 易于在基层食品检测部门和医院推广。这对于保障我省食品安全和人 体健康具有重要意义，能够产生明显的社会效益。 对资源利用情况 本项目是生物高科技产品，技术含量高，产品的生产原料主要是 常规生物化学试剂，因此不会破坏自然资源。 对人才培养情况 本项目的实施，将为我省培养从事现代分子生物学产。
6、重等温扩增同时检测多种病原菌实验技术建立。 第二季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 的准确度分析。 第三季度环介导等温扩增和多重等温扩增快速检测病原菌方法 的灵敏度分析。 度。 扩增产物的检测建立快速显色法和电泳分析法两种检测扩增 产物的方法。 以上述研究结果为基础，建立常见病原菌的环介导等温扩增和 多重环介导等温扩增快速检测技术。 常见病原菌的环介导等温扩增快速检测方法的灵敏度分析 将常见病原菌目标基因克隆至载体，转化后提取质粒， 倍比稀释成含目的基因拷贝数为，以其为模板 做环介导等温扩增反应，检测本方法的灵敏度。 常见病原菌的环介导等温扩增。
参考资料：
1、该文档不包含其他附件(如表格、图纸)，本站只保证下载后内容跟在线阅读一样，不确保内容完整性，请务必认真阅读。
2、有的文档阅读时显示本站（www.woc88.com）水印的，下载后是没有本站水印的（仅在线阅读显示），请放心下载。
3、除PDF格式下载后需转换成word才能编辑，其他下载后均可以随意编辑、修改、打印。
4、有的标题标有”最新”、多篇，实质内容并不相符，下载内容以在线阅读为准，请认真阅读全文再下载。
5、该文档为会员上传，下载所得收益全部归上传者所有，若您对文档版权有异议，可联系客服认领，既往收入全部归您。
（定稿）环介导等温扩增快速检测病原菌新型试剂盒研制项目立项申报材料（完整版）